The invention discloses a preparation method of protease chitosan microspheres, which comprises the steps of preparing chitosan/modifier mixed solution, curing, crosslinking, protease immobilization, etc. The preparation method of the present invention is a macroporous chitosan microsphere with immobilized protease interoperability. Compared with the traditional method, the efficiency of protein hydrolysis catalyzed by the protein enzyme chitosan microsphere has increased by 200%, and the food enzymatic hydrolysis can be efficiently catalyzed. At the same time, the thermal stability, pH stability and storage stability of the immobilized protease are higher than those of the traditional method. Isolated enzyme.
【技术实现步骤摘要】
一种蛋白酶壳聚糖微球的制备方法
本专利技术涉及一种蛋白酶壳聚糖微球的制备方法。
技术介绍
蛋白酶广泛应用于食品加工行业，目前国内外普遍采用的是添加游离蛋白酶，容易受到环境影响变性失活，环境稳定性差，而且不可重复利用。为了提高蛋白酶的实际应用效果，很多新型酶固定化技术被研究和报道，例如以纳米材料作为载体，可以有效提高酶的固定化含量和酶活。但是，这些新型纳米材料在食品体系中很难被分离回收，载体残留容易引发潜在的安全问题，所以可应用于食品加工的固定化酶载体非常有限。大尺寸微球是一种易于分离的固定化酶载体，可以很好地应用于食品行业，微球固定化糖苷酶、乳糖酶等已经被应用在食品加工中，但是这些食品体系中都是反应底物小分子，固定化蛋白酶还无法实现在食品中的应用。目前，蛋白酶的高效固定化在世界范围仍是亟待解决的难题，因为蛋白酶的催化底物是大分子，底物在反应体系中存在扩散慢，传质差等问题，所以蛋白酶固定化技术的发展一直受到限制。有些专利技术使用戊二醛为交联剂制备壳聚糖微球，用于菠萝蛋白酶的固定化。但是，该方法所制备的壳聚糖微球三维网络致密，酶分子的自由空间小，蛋白质底物扩散速率低，...
【技术保护点】
1.一种蛋白酶壳聚糖微球的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)将壳聚糖、铵盐、改性剂加入到弱酸溶液中，制成壳聚糖含量为1‑8％、铵盐含量为0.01‑0.2mol/L、改性剂含量为0.2‑6％的混合溶液；2)将混合溶液滴加到含有碳酸盐的凝固液中，使壳聚糖发生固化反应，将沉淀洗涤后得到微球；3)将微球加入到交联剂溶液中，使微球发生交联反应，洗涤，得到互通型大孔壳聚糖微球；4)将蛋白酶溶解后，然后加入互通型大孔壳聚糖微球，低温条件下震荡，使蛋白酶负载于互通型大孔壳聚糖微球上，即得。
【技术特征摘要】
1.一种蛋白酶壳聚糖微球的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)将壳聚糖、铵盐、改性剂加入到弱酸溶液中，制成壳聚糖含量为1-8％、铵盐含量为0.01-0.2mol/L、改性剂含量为0.2-6％的混合溶液；2)将混合溶液滴加到含有碳酸盐的凝固液中，使壳聚糖发生固化反应，将沉淀洗涤后得到微球；3)将微球加入到交联剂溶液中，使微球发生交联反应，洗涤，得到互通型大孔壳聚糖微球；4)将蛋白酶溶解后，然后加入互通型大孔壳聚糖微球，低温条件下震荡，使蛋白酶负载于互通型大孔壳聚糖微球上，即得。2.如权利要求1所述蛋白酶壳聚糖微球的制备方法，其特征在于：所述弱酸为乙酸或碳酸或枸橼酸，所述弱酸溶液的重量浓度为0.1-5％。3.如权利要求1所述蛋白酶壳聚糖微球的制备方...
【专利技术属性】
技术研发人员：马美湖，刘远远，蔡朝霞，徐奇，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42
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