一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PCR检测鉴定方法技术

一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PCR检测鉴定方法，属于植物真菌分子生物学检测技术领域，包括以下步骤：A、DNA提取：分别提取谷瘟病菌和稻瘟病菌的DNA；B、引物设计：利用谷瘟病菌无毒基因PWL3编码区插入849bp的反转录转座子的两端设计一对特异性引物Mol3‑F/Mol3‑F；C、PCR：以提取的谷瘟病菌与稻瘟病菌的总DNA为模板进行PCR扩增，得到扩增产物；D、结果判定：将扩增产物进行电泳检测，若检测到1771bp的目标条带，则判定为谷瘟病菌；若检测到922bp的条带，则判定为稻瘟病菌。通过本发明专利技术方法可以将难以区分的谷瘟病菌和稻瘟病菌进行快速、准确的区分，对研究梨孢菌在自然条件下田间传播、繁殖与进化具有重要意义。

A PCR detection and identification method for differentiating grisea and Magnaporthe grisea

A method for PCR detection and identification of Magnaporthe grisea and Magnaporthe grisea belongs to the field of molecular biology detection of plant fungi, which includes the following steps: A, DNA extraction: DNA extraction of Magnaporthe grisea and Magnaporthe grisea respectively; B, primer design: insertion of 9bp reverse transcription using PWL3 coding region of non-toxic gene of Magnaporthe grisea A pair of specific primers Mol3_F/Mol3_F were designed at both ends of the locus; C and PCR: The total DNA of the two isolates was used as template for PCR amplification, and the amplified products were obtained; D. Results: The amplified products were detected by electrophoresis, and if the target band of 1771 BP was detected, the amplified products were judged to be the pathogen; if 9. The band of 22bp was identified as Magnaporthe grisea. The method of the invention can quickly and accurately distinguish the hard-to-distinguish rice blast fungus from the rice blast fungus, and is of great significance for studying the field propagation, propagation and evolution of the pear spore fungus under natural conditions.

【技术实现步骤摘要】
一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PCR检测鉴定方法
本专利技术属于植物真菌分子生物学检测
，具体涉及一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PCR检测鉴定方法。通过本专利技术方法可以将难以区分的谷瘟病菌和稻瘟病菌进行快速、准确的区分，对研究梨孢菌在自然条件下田间传播、繁殖与进化具有重要意义。
技术介绍
谷子(Setariaitalica)起源于我国，是哺育中华民族的主要粮食作物之一，其种植面积和产量均居世界之首。小米营养丰富，随着世界杂粮热的兴起，出口量在稳步增加，已经成为我国的特色创汇杂粮。谷草是牲畜的优质饲草，在耕地紧缺的情况下是发展畜牧养殖业的首选粮草兼用性作物。但是谷子病害的发生，严重影响着谷子的产量和质量。谷瘟病菌有性态为Magnaportheoryzae，属于子囊菌门大角间座壳属；无性态为Pyriculariagrise，属有丝分裂孢子真菌中的梨孢属，由梨孢菌Pyricularia引发的谷瘟病对谷子产量造成了严重威胁，在我国谷子产区大面积发生，造成大面积的减产，甚至颗粒无收。梨孢菌除了侵染谷子外，还能侵染牛筋草(Eleusineindica)、狗尾草(Setariaviri本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PCR检测鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：A、DNA提取：分别提取谷瘟病菌和稻瘟病菌的DNA；B、引物设计：在谷瘟病菌无毒基因PWL3基因编码区插入849bp的反转录转座子的两端设计一对特异性引物Mol3‑F/Mol3‑F，序列如下：Mol3‑F：5’‑TACAACACCCACGGATATCAC‑3’，Mol3‑R：5’‑TCGTAGCCTTAGCCACACAC‑3’；C、PCR：以提取的谷瘟病菌与稻瘟病菌的总DNA为模板进行PCR扩增，得到扩增产物；D、结果判定：将扩增产物进行电泳检测，若检测到1771bp的目标条带，则判定为谷瘟病菌；若检测到922b...

【技术特征摘要】
1.一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PCR检测鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：A、DNA提取：分别提取谷瘟病菌和稻瘟病菌的DNA；B、引物设计：在谷瘟病菌无毒基因PWL3基因编码区插入849bp的反转录转座子的两端设计一对特异性引物Mol3-F/Mol3-F，序列如下：Mol3-F：5’-TACAACACCCACGGATATCAC-3’，Mol3-R：5’-TCGTAGCCTTAGCCACACAC-3’；C、PCR：以提取的谷瘟病菌与稻瘟病菌的总DNA为模板进行PCR扩增，得到扩增产物；D、结果判定：将扩增产物进行电泳检测，若检测到1771bp的目标条带，则判定为谷瘟病菌；若检测到922bp的条带，则判定为稻瘟病菌。2.根据权利要求1所述的一种可以区分谷瘟病菌与稻瘟病菌的PC...

【专利技术属性】
技术研发人员：李志勇，白辉，王永芳，任世龙，董志平，董立，马继芳，全建章，刘磊，
申请(专利权)人：河北省农林科学院谷子研究所，
类型：发明
国别省市：河北,13