The invention belongs to the field of molecular biology, in particular to a reagent kit for early diagnosis of colorectal cancer and its use method. The kit comprises a TFPI2 forward primer sequence as shown in SEQ ID NO.1, a reverse primer sequence as shown in SEQ ID NO.2, a fluorescent probe sequence as SEQ ID NO.3, a probe 5'-terminal labeling FAM, and a 3'-terminal labeling MGB. Positive primers and probes for GAPDH detection, PCR Master Mix, lysate, protease K, rinse solution, bisulfite solution and ddH2O are also included. The primers and probes of the invention have strong sensitivity and specificity, and greatly improve the sensitivity of detecting colorectal cancer, the sensitivity is as high as 95%, and the specificity is as high as 100%.
【技术实现步骤摘要】
一种用于结直肠癌早期诊断的试剂盒及其使用方法
本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一种用于结直肠癌早期诊断的试剂盒及其使用方法。
技术介绍
肿瘤是危害人类健康的重要原因，而结直肠癌(colorectalcancer,CRC)在世界范围内，均位于肿瘤死亡病因的前列。在欧洲的新发肿瘤病因中CRC排列第二，同样在发达的美国，新发肿瘤病例中CRC亦位于排名第三。在我国，随着经济的发展，居民生活方式日益倾向于高脂肪和高热量的饮食，肠癌的发病率和死亡率逐年上升。2008年的肿瘤登记数据显示：大肠癌的发病率已达到26.89/105，居所有恶性肿瘤发病的第4位；大肠癌的死亡率为12.83/105居恶性肿瘤死亡的第5位。城市地区的大肠癌发病率已达31.55/105，居第2位；死亡率为14.50/105，居第4位。大肠癌发生的具体机制至今尚未完全明确，但目前公认的学说即为经典的“腺瘤一癌变”学说，系指正常上皮，经历了异常增生，发展为腺瘤，逐步进展为癌，继而发生转移与浸润。通常认为腺瘤至癌变约需要3-17年，这就为早期筛查发现病变提供了最佳时间窗。据统计，如果病变早期作出正确诊治可以...
【技术保护点】
1.一种用于结直肠癌早期诊的引物及探针，其特征在于，所述引物序列如下：TFPI2正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；所述荧光探针序列为SEQ ID NO.3，探针5′端标记FAM，3′端标记MGB。
【技术特征摘要】
1.一种用于结直肠癌早期诊的引物及探针，其特征在于，所述引物序列如下：TFPI2正向引物序列如SEQIDNO.1所示，反向引物序列如SEQIDNO.2所示；所述荧光探针序列为SEQIDNO.3，探针5′端标记FAM，3′端标记MGB。2.一种如权利要求1所述的引物及探针在制备用于结直肠癌早期诊的试剂盒的应用。3.一种试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物及探针。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括检测GAPDH的正向引物及探针，PCRMasterMix，裂解液，蛋白酶K，漂洗液，亚硫酸氢盐溶液和ddH2O。5.根据权利要求3所述试剂盒的使用方法，其特征在于，步骤如下：(1)样本中基因组DNA的提取：取患者粪便脱落细胞，...
【专利技术属性】
技术研发人员：邵琦，
申请(专利权)人：安徽达健医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34
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