The present invention discloses a cell penetrating peptide and its preparation method and application. The cell penetrating peptide comprises a first sequence RRRRRKQARRPRRRRAR or a second sequence RSSRRRRRRRKQRKVKR. The cell penetrating peptides are safe and the effect of penetrating is remarkable.
【技术实现步骤摘要】
一种细胞穿膜肽及其制备方法、应用
本专利技术涉及生物医学领域,尤其涉及一种人源性细胞穿膜肽及其制备方法、应用。
技术介绍
由于细胞膜的屏障作用,多种具有治疗功效的蛋白质、多肽和寡聚核苷酸难以进入细胞发挥药效。因而如何把有生物活性的物质直接从细胞外导入细胞内,是一个很有意义的研究课题。近年来,一些具有细胞膜穿透能力的小分子多肽(其长度一般不超过30个氨基酸)相继被发现,可有效携带比其分子质量大100倍的外源性疏水大分子进入细胞,并对宿主细胞没有显著毒副作用。这些具有细胞穿透功能的多肽,被称为细胞穿膜肽(cellpenetratingpeptide,CPPs)。细胞穿膜肽(CellPenetratingPeptide,CPPs)是一类能够穿膜的小分子多肽,如TAT,transportan,HIV-1等,能作为一个载体高效运送多种不同大小和性质的生物活性物质(包括蛋白、多肽、核酸分子、脂质体、小分子有机化合物等)进入几乎所有的哺乳动物细胞,并对宿主细胞没有显著毒副作用。CPPs的种类繁多,其分类依据有物理化学特性、来源、摄入机制、生物医学应用等,目前尚没有统一的定论。根 ...
【技术保护点】
1.一种细胞穿膜肽,其特征在于:所述细胞穿膜肽包括第一序列RRRRRKQARRPRRRRAR,或包含第二序列RSSRRRRRRRRRKQRKVKR。
【技术特征摘要】
1.一种细胞穿膜肽,其特征在于:所述细胞穿膜肽包括第一序列RRRRRKQARRPRRRRAR,或包含第二序列RSSRRRRRRRRRKQRKVKR。2.一种如权利要求1所述的细胞穿膜肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1、提供树脂,且将所述树脂在第一溶剂中浸泡至所述树脂溶胀;S2、将缩合剂、精氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸、脯氨酸或缩合剂、精氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酰胺、缬氨酸溶于第二溶剂中,形成混合物;S3、在所述混合物中加入溶胀的树脂已形成反应体系,反应时间为1-4h;S4、去除反应后所述反应体系中的溶液,对残留物洗涤1-5次,气体鼓动,抽干;S5、在所述残留物中加入脱帽液,气体鼓动,抽干;S6、去除经由步骤S5后的反应体系中的溶液,洗涤1-10次,气体鼓动,抽干,由此获得合成的多肽链;S7、在所述多肽链中加入切割液,在4-30℃下搅拌1-4h,过滤得滤液,且洗涤所述滤液;S8、对经洗涤过的滤液进行萃取,离心得到细胞穿膜肽粗品;以及S9、对所述细胞穿膜肽粗品进行鉴定和纯化。3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述树脂包括Fmoc-Wang树脂。4.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,在步骤S2中,所述缩合剂包括苯并三唑鎓盐型缩合剂;在步骤S1中,所述第一溶剂包括:二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二氯甲烷及四氢呋喃中的一种或几种;在步骤S5中,所述脱帽液包括:二甲基甲酰胺溶液,以及溶解于二甲基甲酰胺溶液中的6%W/V的哌嗪和0.1MHOBT;在步骤S7中,所述切割液包括:以重量百分数计,95...
【专利技术属性】
技术研发人员:唐伟,郭晓霞,刘岩松,段茹,许力,柳项,
申请(专利权)人:肽泽武汉生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:湖北,42
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