一种基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针、引物、检测试剂盒及检测方法技术方案

本发明专利技术公开了一种基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针、引物、检测试剂盒及检测方法。本发明专利技术通过将检测虫媒介病毒的探针分别与不同的编码微珠进行偶联，混合后得到悬浮微珠阵列，然后用本发明专利技术的特异性引物对待测样本进行多重RT‑PCR扩增，PCR产物与悬浮微珠阵列进行杂交，再用链霉亲和素R‑藻红蛋白进行显色，通过悬浮微珠阵列读取仪读取检测结果，判断待测样本中是否含有所检测的虫媒介病毒。本发明专利技术的基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针和引物，能同时检测7种虫媒介病毒，可极大地缩短检测时间，提高检测效率和准确性。

【技术实现步骤摘要】
一种基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针、引物、检测试剂盒及检测方法
：本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一种基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针、引物、检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
：虫媒介病毒是指一类以吸血昆虫为媒介，在脊椎动物和人、畜间传播多种严重疾病的病毒。近几年在世界热带丛林地区，和我国南方流行的登革热病毒、寨卡病毒感染，都属于虫媒介传播的病毒。感染了虫媒介病毒的患者在临床症状上有相同之处，包括发热、肌肉关节疼痛、皮疹、淋巴肿大，等等。目前临床上主要是通过酶联免疫法或者荧光定量PCR方法，单种病毒进行诊断，因此存在漏诊的风险。有一些报道已经就虫媒介病毒的高通量诊断上做了一些尝试，这些技术多没有包括最新发生的寨卡病毒，并且在实际应用上只是用实验室感染了病毒的细胞株和少数的临床样本做了测试，不能真实反应其技术的可用性。悬浮微珠阵列技术是属于生物芯片技术的一种，它是以一种可以在液体中悬浮流动的微珠为介质来固定支持探针，探针就能随着微珠的流动方式和样本进行杂交；而固定在玻璃平面或者尼龙膜平面上的探针则是不能流动的，这样悬浮微珠阵列技术中核酸分子的杂交动力学就会优于固本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针，其特征在于，所述的探针序列如下所示：GAPDH‑P：5’‑TGGGGAGTCCCTGCCACAC‑3’；DENV1‑P：5’‑TCAGTRTGGAATAGGGTTT‑3’；DENV2‑P：5’‑TCAACATAGAAGCAGAACC‑3’；DENV3‑P：5’‑TATGGCTGAAACTCCGAG‑3’；DENV4‑P：5’‑TCAATATGCTGAAACGC‑3’；WNV‑P：5’‑AGCCAAGATCAGCATGCCAGC‑3’；JEV‑P：5’‑TGACNATTCCTGCGGTTTTGGGG‑3’；TBE‑P：5’‑CCCATYACYCC...

【技术特征摘要】
1.一种基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针，其特征在于，所述的探针序列如下所示：GAPDH-P：5’-TGGGGAGTCCCTGCCACAC-3’；DENV1-P：5’-TCAGTRTGGAATAGGGTTT-3’；DENV2-P：5’-TCAACATAGAAGCAGAACC-3’；DENV3-P：5’-TATGGCTGAAACTCCGAG-3’；DENV4-P：5’-TCAATATGCTGAAACGC-3’；WNV-P：5’-AGCCAAGATCAGCATGCCAGC-3’；JEV-P：5’-TGACNATTCCTGCGGTTTTGGGG-3’；TBE-P：5’-CCCATYACYCCWgTgTCAC-3’；YFV-P1：5’-CTGGATGATCAAGGAAACAGCYTGCCTC-3’；YFV-P2：5’-CTGGATGATCAAAGAAACGGCYTGCCTC-3’；Chikv-P：5’-CTGCAACGTCACACAGATGAGGGA-3’；Zika-P：5’-TGCTGGTGTATGGGCACARCAC-3’；所述的探针的5’端带有连接臂。2.根据权利要求1所述的基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针，其特征在于，所述的连接臂为烷基胺连接臂。3.根据权利要求2所述的基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的探针，其特征在于，所述的烷基胺连接臂为C18-NH2连接臂。4.一种基于悬浮微珠阵列系统检测虫媒介病毒的引物，其特征在于，所述的引物序列如下所示：GAPDH-F：5’-CAAGCTCATTTCCTGGTATGACA-3’，GAPDH-R：5’-GGGAGATTCAGTGTGGTGGG-3’；DENV1-F：5’-CAATGGATGACAACAGAAGAYATG-3’，DENV1-R：5’-TCCATCCATGGGTTTTCCTCTAT-3’；DENV2-F：5’-GCAGARACACAACATGGAACRATAGT-3’，DENV2-R：5’-TGATGTARCTGTCYCCRAATGG-3’；DENV3-F：5’-ATGGAATGTGTGGGAGGTGG-3’，DENV3-R：5’-GGCTTTCTATCCARTAGCCCATG-3’；DENV4-F：5’-GCAGATCTCTGGAAAAATGAACCA-3’，DENV4-R：5’-GAGAATCTCTTCACCAACCCYTG-3’；NS2A-F：5’-CCTTTTCAGYTGGGCCTTCTG-3’，NS2A-R：5’-CAGTGTAVGTVATRCCCCCAA-3’；TBE-F：5’-TGGAYTTYAGACAGGAANCRACACA-3’，TBE-R：5’-TCCAGAG...

【专利技术属性】
技术研发人员：张亮，黄汉林，吕莉娟，穆小萍，周伟平，华立栋，伦妙栩，
申请(专利权)人：广东省妇幼保健院广东省妇产医院，广东省儿童医院，
类型：发明
国别省市：广东,44