具有镇痛作用的多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开一种具有镇痛作用的多肽，其氨基酸序列为Phe‑Cys‑Ser‑Trp‑Lys‑Cys‑Thr，且2个Cys之间由二硫键连接。本发明专利技术的多肽可以用于制备预防和/或治疗疼痛的产品。本发明专利技术的多肽具有强效的镇痛作用；能够抑制神经性炎症及阻断神经痛；具有很高的安全性，具有广阔的发展前景。

Peptides with analgesic effect and their applications

The present invention discloses a polypeptide with analgesic effect. Its amino acid sequence is Phe_Cys_Ser_Trp_Lys_Cys_Thr, and the two Cys are connected by disulfide bonds. The polypeptide of the invention can be used for preparing products for preventing and / or treating pain. The polypeptide of the invention has strong analgesic effect, can inhibit nerve inflammation and block neuralgia, has high safety and has broad development prospect.

【技术实现步骤摘要】
具有镇痛作用的多肽及其应用
本专利技术涉及一种多肽，具体涉及一种具有镇痛作用的多肽及其应用。
技术介绍
疼痛是一种由组织损伤或疾病引起的不愉快的感觉及情感体验。据统计，大约30％的成年人患有疼痛，每3个门诊病人中就有2个是伴有各种疼痛病症或症状的病人，我国至少有1亿以上疼痛患者。疼痛不仅给患者带来痛苦，还给其带来严重的心理及生理损伤，增加并发症的发生率，延长恢复时间，增加医疗费用。基于不同的发病机理，疼痛在各种疾病中有迥异的表现，给临床的疼痛治疗带来一定难度。镇痛药主要是作用于中枢或外周神经系统，选择性抑制和缓解各种疼痛，减轻疼痛而致恐惧紧张和不安情绪疼痛的药物，包括以吗啡、哌替啶等为代表的麻醉性镇痛药和以阿司匹林、双氯芬酸钠等为代表的解热镇痛抗炎药。麻醉性镇痛药作用部位在丘脑和大脑皮层，可以缓解锐痛、钝痛和内脏绞痛，但对神经性疼痛无疗效，且反复使用时易产生成瘾性，戒断针状严重，病人必须不断增加剂量才能位置镇痛效果；而且麻醉性镇痛药均被列入管制药物，在药政管理上列为“麻醉药品”，国家颁布《麻醉药品管理条例》，对生产供应和使用都严格加以管理和限制。解热镇痛药是一类具有解热、镇痛作用的药物，通过抑制内环氧化酶，使前列腺素生成减少，减少神经末梢对致痛物质的敏感性，达到抗炎镇痛，但其作用部位主要在外周，主要用于接触炎症性疼痛或其他钝痛，对治疗神经性炎症及神经痛是无效的。因此，研究一种能够克服上述缺陷的新的镇痛药物是本领域研究的热点和趋势。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种多肽，其具有强效的镇痛作用，能够抑制神经性炎症及阻断神经痛，且不具有麻醉性镇痛药的成瘾性。为解决上述技术问题，本专利技术所提供的具有镇痛作用的多肽(简称TLN-7)，其氨基酸序列为Phe-Cys-Ser-Trp-Lys-Cys-Thr，且2个Cys之间由二硫键连接。本专利技术开发的多肽TLN-7的2个Cys之间由二硫键连接呈环状，它是生长抑制素的类似物。生长抑制素是一种影响细胞代谢的人体内源性激素，它没有抑制胰岛素分泌(导致糖尿病)等广泛的内分泌副作用。本专利技术的多肽TLN-7是首个以SST4受体为靶点治疗疼痛的药物。研究表明，生长抑素在神经系统及外周组织均有着广泛的作用，作为神经调质，它参与对于神经内分泌、运动以及认知功能的调控。通过细胞表面的G蛋白偶联受体直接发挥其生理功能。本专利技术的多肽TLN-7能够高亲和力地与SSTR-1和SSTR-4结合，从而其介导抗炎和镇痛效果。在动物模型中，TLN-7能够抑制神经性炎症及阻断神经痛，而传统解热镇痛药如双氯芬酸或美洛昔康等对治疗神经性炎症及神经痛是无效的。经研究，本专利技术的多肽TLN-7发挥镇痛效果的机制可能包括以下几个途径：1.通过与G1或者G0偶联抑制AC或PLC活性，抑制Ca2+通道和络氨酸磷酸酶等对神经元活动产生抑制性影响；2.通过抑制辣椒素敏感型神经末端释放诸如P物质、降钙素相关基因肽等感觉神经肽，进而抑制前列腺素的释放；3.通过激动5-HT下行抑制系统，使释放到脊髓背侧角的5-HT会与初级传入神经的终末及背角神经元的5-HT受体结合，通过突触前或突触后抑制，调节疼痛信息的传递；4.通过抑制谷氨酸水平，减少对神经元的兴奋从而达到镇痛作用；5.选择性抑制脊髓I、II、V层中受痛觉刺激而兴奋的背角神经元放电，阻断疼痛信号向高级中枢的传递。本专利技术的多肽TLN-7用于作用于外周感觉神经元能发挥强烈的镇痛效果，在动物试验中，低剂量的TLN-7表现出的镇痛效果要明显强于经典的解热镇痛药(如双氯芬酸钠)。本专利技术的多肽TLN-7在制备预防和/或治疗疼痛的产品中的应用。所述应用包括预防和/或治疗烧烫伤、外力损伤、冻伤、炎症性疼痛、神经病理性损伤以及其他原因导致的疼痛。以本专利技术的多肽TLN-7为主要活性成分的预防和/或治疗疼痛的产品。所述产品可以是含有多肽TLN-7的药物，或者是含有多肽TLN-7的具有预防和/或治疗疼痛功效的医疗辅助产品。当产品为药物时，在需要的时候，上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接受的辅料，所述辅料包括药学领域常规的稀释剂、稳定剂、填充剂、赋形剂、粘合剂、湿润剂、吸收促进剂、表面活性剂和润滑剂等。本专利技术所述的药物，可以制成注射剂、冻干制剂、埋植剂、片剂或粒剂等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。所述的注射剂可以是使用注射用水、生理盐水、枸椽酸溶液、醋酸溶液或磷酸盐缓冲液溶解本专利技术的多肽TLN-7或还加入稳定剂所得到的多肽溶液。所述冻干制剂可以是将本专利技术的多肽TLN-7经溶解后冻干或溶解并加入稳定剂后冻干所得到的冻干粉针剂。所述的稳定剂可以是本领域常用的稳定剂，具体可以选用EDTA、蔗糖和甘露醇中的至少一种。与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：1.本专利技术的多肽TLN-7具有强效的镇痛作用，给药剂量仅为双氯芬酸钠给药剂量的1％时即可发挥出与双氯芬酸钠相当或更强的镇痛效果。2.本专利技术的多肽TLN-7能够抑制神经性炎症及阻断神经痛，而传统的麻醉性镇痛药和解热镇痛抗炎药对治疗神经性炎症及神经痛是无效的。3.本专利技术的多肽TLN-7在发挥镇痛作用时能够避免非甾体类抗炎镇痛药的的胃肠道毒性、特异性COX-2抑制剂的心血管毒性、阿片类药物的成瘾性等。4.本专利技术的多肽TLN-7是生长抑制素的的类似物，生长抑素及其类似物在临床使用中尚未发现严重的副作用，具有很高的安全性，具有广阔的发展前景。附图说明图1为实施例一制得多肽TLN-7的质谱图。图2为实施例一制得多肽TLN-7的氨基酸比值图谱。具体实施方式下面将结合附图对本专利技术的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1通过化学固相合成的方法合成本专利技术的环状多肽TLN-7。按以下步骤进行：1、树脂溶胀：将RinkAmideAMResin树脂用二氯甲烷浸泡，待树脂膨胀后抽去二氯甲烷。2、去除氨基保护：加入六氢吡啶/DMF溶液，使用氮气鼓动反应，待反应结束后用DMF洗涤树脂。取少量树脂加入验色剂A、B、C各2-3滴(A：茚三酮/无水乙醇溶液；B：吡啶；C：苯酚/无水乙醇溶液)，然后在100℃下共热3分钟，溶液及树脂颜色应为蓝色，即可认定反应完成。3、缩合反应：加入Fmoc-Thr(tBu)-OH和HBTU(O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯)，用适量DMF溶解，加入DIEA，氮气鼓动，反应结束后用DMF洗涤树脂。取少量树脂加入验色剂A、B、C各2-3滴(A：茚三酮/无水乙醇溶液；B：吡啶；C：苯酚/无水乙醇溶液)，在100℃下共热3分钟，溶液及树脂颜色应为无色，即可认定反应完成。4、重复步骤：依次加入各氨基酸原料，重复步骤2-3，完成序列中的合成后，将树脂用二氯甲烷和乙醚浸泡后抽干。5、将多肽从树脂上分离：加入TFA裂解液，在恒温摇床中反应。6、析出粗品：滤去树脂，向滤液中加入无水乙醚，用离心机离心后获得固体，加入无水乙醚洗涤，再离心，重复数次后烘干即可获得线性粗品多肽。7、形成二硫键：将线性多肽粗品用纯水溶解，用稀氨水调节PH值，搅拌反应24小时本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有镇痛作用的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列为Phe‑Cys‑Ser‑Trp‑Lys‑Cys‑Thr，且2个Cys之间由二硫键连接。

【技术特征摘要】
1.一种具有镇痛作用的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列为Phe-Cys-Ser-Trp-Lys-Cys-Thr，且2个Cys之间由二硫键连接。2.权利要求1所述的多肽在制备预防和/或治疗疼痛的产品中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述应用包括用于预防和/或治疗烧烫伤、外力损伤、冻伤、炎症性疼痛、神经病理性损伤所导致的疼痛。4.一种预防和/或治疗疼痛的产品，其活性成分包括权利要求1所述的多肽。5.如权利要求4所述的产品，其特征在于，所述产品为含有所述多肽的药物。6.如权利要求4所述的产品，其特征在于，所述药物中还可以加入一种或多种药学上可接受的辅料...

【专利技术属性】
技术研发人员：游磊，祁园鑫，唐泽紫，袁胜峰，曲站红，吴海玲，
申请(专利权)人：上海新生源医药集团有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31