阿加曲班中间体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种阿加曲班中间体的制备方法，包括以下步骤：(R)‑4甲基二氢呋喃‑2(3H)‑酮开环再与甲醇钠或甲醇钾反应，生成R‑3‑甲基‑4‑羟基丁酸甲酯，再氧化，生成(3R)‑3‑甲基‑4‑醛基丁酸甲酯，再与海因反应，生成亚‑(3R)‑3‑甲基‑丁酸甲酯基海因，纯化后加热回流反应，再纯化，得到(4S)‑4‑甲基‑2‑氧代己二酸，其与氨基供体在催化剂作用下反应，再纯化，得到(2R,4S)‑2‑氨基‑4‑甲基己二酸，再与甲醇反应，提纯，得到(2R，4S)‑2‑氨基‑6‑甲氧基‑4‑甲基‑6‑氧代己酸，再与还原剂反应，纯化，得到阿加曲班中间体。本发明专利技术反应条件温和，成本低，适合工业化生产。

Preparation of agagtran intermediate

The present invention discloses a preparation method of agatroban intermediate, which comprises the following steps: (R) 4 methyldihydrofuran 2 (3H) 8209 (4S)4_methyl_2_oxo-adipic acid was obtained by refluxing reaction after purification and then purifying. It reacted with amino donors in the presence of catalyst and then purified to obtain (2R, 4S)2_amino_4_methylhexanedioic acid. 4S) 2_amino_6_methoxy_4_methyl_6_oxo-hexanoic acid was reacted with reducing agent and purified to obtain the intermediate of agatroban. The invention has mild reaction conditions and low cost, and is suitable for industrial production.

【技术实现步骤摘要】
阿加曲班中间体的制备方法
本专利技术涉及药物中间体的制备方法，具体地指一种阿加曲班中间体的制备方法。
技术介绍
阿加曲班是日本三菱化学研究所最早研制合成的抗血栓药，首先被应用于临床治疗周围动脉闭塞性疾病，然后开始将其用于治疗急性脑血栓形成。美国食品与药品管理局在2000年批准了史克必成和德克萨斯生物技术公司的可注射抗血栓小分子药物阿加曲班应用于治疗和预防血栓形成及肝素诱导的免疫性疾病、血小板减少症以及用于对需要进行精皮冠脉介入术病人的治疗。2005年，治疗急性脑血栓的一种新药“达贝.阿加曲班”已获得国家食品药品监督管理局批准上市，而且被列入国家863项目并由国家科技部颁发了国家重点新产品证书。目前此药在临床上备受青睐，但此药物合成路线较长，造价高，现有技术中，反应过程中均涉及还原反应，其方法中氢化压力为4-10MPa，对生产场所和生产设备都有严格要求，不利于工业化大规模生产，而且氢气易燃易爆，不利于安全生产，所以其合成方法仍需进一步研究改善。在新设计的路线中阿加曲班的合成方法涉及阿加曲班中间体(R)-4甲基二氢呋喃-2(3H)-酮，其在阿加曲班的合成中尤为重要因此，研发一种高效的阿加曲班中间体(R)-4甲基二氢呋喃-2(3H)-酮的制备方法显得十分必要。
技术实现思路
本专利技术所要解决的问题就是要提供一种阿加曲班中间体的制备方法，该方法在保证高转化率的基础上，简化生产工艺和降低生产成本。为解决上述技术问题，本专利技术所提供的阿加曲班中间体的合成方法，包括以下步骤：步骤1：式Ⅱ化合物(R)-4甲基二氢呋喃-2(3H)-酮开环再与甲醇钠或甲醇钾反应，生成式Ⅲ化合物R-3-甲基-4-羟基丁酸甲酯；步骤2：式Ⅲ化合物R-3-甲基-4-羟基丁酸甲酯添加活化剂、溶剂，在碱性条件下氧化，生成式Ⅳ化合物(3R)-3-甲基-4-醛基丁酸甲酯；步骤3：式Ⅳ化合物(3R)-3-甲基-4-醛基丁酸甲酯与海因在催化剂作用下，生成式Ⅴ化合物亚-(3R)-3-甲基-丁酸甲酯基海因；步骤4：式Ⅴ化合物亚-(3R)-3-甲基-丁酸甲酯基海因在碱性条件下加热回流反应，纯化，得到式Ⅵ化合物(4S)-4-甲基-2-氧代己二酸；步骤5：式Ⅵ化合物(4S)-4-甲基-2-氧代己二酸、氨基供体在催化剂作用下反应，再纯化，得到式Ⅶ化合物(2R,4S)-2-氨基-4-甲基己二酸；步骤6：式Ⅶ化合物(2R,4S)-2-氨基-4-甲基己二酸与甲醇反应，提纯，得到式Ⅷ化合物(2R，4S)-2-氨基-6-甲氧基-4-甲基-6-氧代己酸；步骤7：式Ⅷ化合物(2R，4S)-2-氨基-6-甲氧基-4-甲基-6-氧代己酸与还原剂反应，纯化，得到式Ⅰ化合物(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸，即为阿加曲班中间体；反应式如下：优选地，步骤2中，反应温度控制为-78℃～-60℃；活化剂选自草酰氯、三氟乙酸酐、二环己基碳化二亚胺、乙酸酐、三氧化硫-吡啶络合物中的一种。进一步地，步骤2中，添加的碱为三乙胺或二异丙基乙胺；进一步地，步骤2中，溶剂选自二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃中的一种。进一步地，步骤3中，所述催化剂为乙醇胺或乙醇胺和三乙胺的混合物；反应温度控制为80-90℃；控制反应时间为5-6h。进一步地，步骤4中，所添加的碱为NaOH溶液或KOH溶液，所述碱溶液的浓度控制为20-40％。再进一步地，步骤5中，氨基供体为天冬氨酸或谷氨酸；催化剂包括转氨酶、磷酸吡咯醛。再进一步地，步骤5中，催化剂由来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因工程菌全细胞和磷酸吡咯醛组成，来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因工程菌中外源转氨酶的编码基因是序列表中SEQIDNO：1所示的核苷酸序列。再更进一步地，步骤5中，控制来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因工程菌全细胞的浓度为60-80g/L，控制磷酸吡咯醛的浓度为0.08-0.15g/L。再更进一步地，步骤7中，还原剂为硼氢化钠或硼氢化钾。生物催化剂为来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因工程菌，具体制备方法是：选择来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因序列，进行人工设计，设计后的基因序列如序列表中SEQIDNO：1所示的核苷酸序列所示；将该序列通过全基因合成，克隆入表达载体pET28a的NdeI和XhoI酶切位点，转化宿主菌E.coliBL21(DE3)感受态细胞；挑取阳性转化子并测序鉴定后，得到重组表达载体；将重组表达载体转入E.coliBL21(DE3)菌株中，获得可以诱导表达重组转氨酶的重组转氨酶基因工程菌。将重组转氨酶基因工程菌接种到含有卡那霉素的LB培养基中，于37℃过夜培养，得到种子培养液；将种子培养液接种到含卡那霉素的TB培养基中，接种量为含卡那霉素的TB培养基体积的1％；然后置于37℃下培养2-5h，加入无菌的IPTG诱导，使IPTG终浓度达到0.1mM，置于25℃下继续培养20h。最后通过高速离心得到来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因工程菌全细胞。本专利技术的优点主要体现在如下几方面：其一，本专利技术原料供应充足，价格低廉，不需另行制备，试剂价格低廉，产物易重结晶纯化，从而降低了成本；其二，本专利技术合成工艺合理，采用酶法和化学合成法相结合，反应条件温和，适合工业化生产；其三，本专利技术反应条件易控制，操作简便，工艺流程简单，对设备无特殊要求，适于大规模生产。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术作进一步的详细描述，但该实施例不应该理解为对本专利技术的限制，仅作举例而已。同时通过说明本专利技术的优点将变得更加清楚和容易理解。实施例1生物催化剂为来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因工程菌，具体制备方法是：选择来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因序列，进行人工设计，设计后的基因序列如序列表中SEQIDNO：1所示的核苷酸序列所示；将该序列通过全基因合成，克隆入表达载体pET28a的NdeI和XhoI酶切位点，转化宿主菌E.coliBL21(DE3)感受态细胞；挑取阳性转化子并测序鉴定后，得到重组表达载体；将重组表达载体转入E.coliBL21(DE3)菌株中，获得可以诱导表达重组转氨酶的重组转氨酶基因工程菌。将重组转氨酶基因工程菌接种到含有卡那霉素的LB培养基中，于37℃过夜培养，得到种子培养液；将种子培养液接种到含卡那霉素的TB培养基中，接种量为含卡那霉素的TB培养基体积的1％；然后置于37℃下培养2-5h，加入无菌的IPTG诱导，使IPTG终浓度达到0.1mM，置于25℃下继续培养20h。最后通过高速离心得到来源于Vibriofluvialis的转氨酶的基因工程菌全细胞。实施例2式Ⅱ化合物(R)-4甲基二氢呋喃-2(3H)-酮开环再与甲醇钠反应，生成式Ⅲ化合物R-3-甲基-4-羟基丁酸甲酯。具体反应过程如下：将式Ⅱ化合物(R)-4甲基二氢呋喃-2(3H)-酮(30g，0.3mol)溶于甲醇中(300ml)，搅拌下加入甲醇钠(19.44g，0.36mol)，然后升温至80℃反应5h。反应完后冷却，浓缩掉甲醇，用氯化铵溶液调pH＝7左右，乙醚萃取。干燥，浓缩后得到式Ⅲ化合物R-3-甲基-4-羟基丁酸甲酯(36.8g，0.279mol)。反应式如下：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种阿加曲班中间体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：式Ⅱ化合物(R)‑4甲基二氢呋喃‑2(3H)‑酮开环再与甲醇钠或甲醇钾反应，生成式Ⅲ化合物R‑3‑甲基‑4‑羟基丁酸甲酯；步骤2：式Ⅲ化合物R‑3‑甲基‑4‑羟基丁酸甲酯添加活化剂、溶剂，在碱性条件下氧化，生成式Ⅳ化合物(3R)‑3‑甲基‑4‑醛基丁酸甲酯；步骤3：式Ⅳ化合物(3R)‑3‑甲基‑4‑醛基丁酸甲酯与海因在催化剂作用下，生成式Ⅴ化合物亚‑(3R)‑3‑甲基‑丁酸甲酯基海因；步骤4：式Ⅴ化合物亚‑(3R)‑3‑甲基‑丁酸甲酯基海因在碱性条件下加热回流反应，纯化，得到式Ⅵ化合物(4S)‑4‑甲基‑2‑氧代己二酸；步骤5：式Ⅵ化合物(4S)‑4‑甲基‑2‑氧代己二酸、氨基供体在催化剂作用下反应，再纯化，得到式Ⅶ化合物(2R,4S)‑2‑氨基‑4‑甲基己二酸；步骤6：式Ⅶ化合物(2R,4S)‑2‑氨基‑4‑甲基己二酸与甲醇反应，提纯，得到式Ⅷ化合物(2R，4S)‑2‑氨基‑6‑甲氧基‑4‑甲基‑6‑氧代己酸；步骤7：式Ⅷ化合物(2R，4S)‑2‑氨基‑6‑甲氧基‑4‑甲基‑6‑氧代己酸与还原剂反应，纯化，得到式Ⅰ化合物(2R，4R)‑4‑甲基‑2‑哌啶甲酸，即为阿加曲班中间体；反应式如下：...

【技术特征摘要】
1.一种阿加曲班中间体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：式Ⅱ化合物(R)-4甲基二氢呋喃-2(3H)-酮开环再与甲醇钠或甲醇钾反应，生成式Ⅲ化合物R-3-甲基-4-羟基丁酸甲酯；步骤2：式Ⅲ化合物R-3-甲基-4-羟基丁酸甲酯添加活化剂、溶剂，在碱性条件下氧化，生成式Ⅳ化合物(3R)-3-甲基-4-醛基丁酸甲酯；步骤3：式Ⅳ化合物(3R)-3-甲基-4-醛基丁酸甲酯与海因在催化剂作用下，生成式Ⅴ化合物亚-(3R)-3-甲基-丁酸甲酯基海因；步骤4：式Ⅴ化合物亚-(3R)-3-甲基-丁酸甲酯基海因在碱性条件下加热回流反应，纯化，得到式Ⅵ化合物(4S)-4-甲基-2-氧代己二酸；步骤5：式Ⅵ化合物(4S)-4-甲基-2-氧代己二酸、氨基供体在催化剂作用下反应，再纯化，得到式Ⅶ化合物(2R,4S)-2-氨基-4-甲基己二酸；步骤6：式Ⅶ化合物(2R,4S)-2-氨基-4-甲基己二酸与甲醇反应，提纯，得到式Ⅷ化合物(2R，4S)-2-氨基-6-甲氧基-4-甲基-6-氧代己酸；步骤7：式Ⅷ化合物(2R，4S)-2-氨基-6-甲氧基-4-甲基-6-氧代己酸与还原剂反应，纯化，得到式Ⅰ化合物(2R，4R)-4-甲基-2-哌啶甲酸，即为阿加曲班中间体；反应式如下：2.根据权利要求1所述的阿加曲班中间体的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，反应温度控制为-78℃～-60℃；活化剂选自草酰氯、三氟乙酸酐、二环己基碳化二亚胺、乙酸酐、三氧化硫-吡啶络合物中的一种。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡磊，吴克婕，黄小明，
申请(专利权)人：天津同华生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：天津,12