一种快速准确鉴定越橘属植物的检测方法技术

技术编号:19159766 阅读:54 留言:0更新日期:2018-10-13 12:39
本发明专利技术提出一种快速准确鉴定越橘属植物的检测方法,使用如下引物对进行检测,所述引物对的核苷酸序列如下:VcSSR11‑F和VcSSR11‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1、2所示;VcSSR14‑F和VcSSR14‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:3、4所示;VcSSR19‑F和VcSSR19‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:5、6所示;VcSSR28‑F和VcSSR28‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:7、8所示;VcSSR33‑F和VcSSR33‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:9、10所示。此外本发明专利技术还提出一种越橘属植物等位基因图谱的构建方法。参照本方法扩充等位基因图谱,丰富可用的等位基因图谱数量。

【技术实现步骤摘要】
一种快速准确鉴定越橘属植物的检测方法
本专利技术涉及分子生物学DNA标记技术与应用领域,具体涉及一种是通过DNA标记技术构建等位基因图谱来快速准确鉴定蓝莓品种及其近缘种。
技术介绍
蓝莓(blueberry)原产于北美洲,是杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium)植物。由于其果实具有很高的营养价值,自20世纪初期被驯化栽培以来,已在世界范围内被广泛种植。我国从1983年开始蓝莓的引种栽培,随着栽培技术不断提高,蓝莓产业发展迅猛,形成了东北地区、山东半岛、长江流域和云贵高原等4个主产区。蓝莓分为栽培种和野生种,根据树体大小和需冷量的多少,蓝莓栽培种又可划分为北高丛蓝莓、南高丛蓝莓、半高丛蓝莓、矮丛蓝莓和兔眼蓝莓5个类型,每一种类型又包括了大量育成品种。目前全世界已报道的蓝莓品种有数百个,中国主栽的蓝莓品种几乎全部引自国外,且当前中国蓝莓产业中利用的品种主要有10余个。蓝莓的野生种广泛分布在我国西南和东北地区,野生种是选育蓝莓新品种的重要种质资源。蓝莓品种的正确识别和亲缘关系分析是蓝莓产业健康发展、科学开发及合理利用的重要前提,但我国蓝莓引种途径多,品种信息管理混乱;在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速准确鉴定越橘属植物的检测方法,其特征在于,使用如下引物对进行检测,所述引物对的核苷酸序列如下:VcSSR11‑F和VcSSR11‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1、2所示;VcSSR14‑F和VcSSR14‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:3、4所示;VcSSR19‑F和VcSSR19‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:5、6所示;VcSSR28‑F和VcSSR28‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:7、8所示;VcSSR33‑F和VcSSR33‑R的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:9、10所示。

【技术特征摘要】
1.一种快速准确鉴定越橘属植物的检测方法,其特征在于,使用如下引物对进行检测,所述引物对的核苷酸序列如下:VcSSR11-F和VcSSR11-R的核苷酸序列分别如SEQIDNO:1、2所示;VcSSR14-F和VcSSR14-R的核苷酸序列分别如SEQIDNO:3、4所示;VcSSR19-F和VcSSR19-R的核苷酸序列分别如SEQIDNO:5、6所示;VcSSR28-F和VcSSR28-R的核苷酸序列分别如SEQIDNO:7、8所示;VcSSR33-F和VcSSR33-R的核苷酸序列分别如SEQIDNO:9、10所示。2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述越橘属植物来自如下:伯克利、蓝丰、布里吉塔、艾克塔、埃利奥特、泽西、瑞卡、安娜、比洛克西、蓝雨、绿宝石、奥尼尔、薄雾、盛世、莱格西、珍珠、海岸、杜克、奥扎克蓝、夏普蓝、明星、蓝美人、蓝宝石、贵蓝、霍利斯特、麦克法林、贝恩、史蒂文森、苍山越橘、乌鸦果、江南越橘、云南越橘1、云南越橘2、云南越橘3、无梗越橘1、无梗越橘2、乌饭树1和乌饭树2。3.越橘属植物等位基因图谱的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1:越橘属植物DNA的提取;步骤2:基因组中简单重复序列位点分析,包括如下步骤:步骤2.1PCR扩增:以步骤1提取的DNA为模板,使用权利要求1所述的引物对进行PCR扩增;步骤2.2电泳检测:取上述扩增产物电泳,紫外灯下拍照记录结果;步骤2.3SSR基因分型和GeneMapper软件统计:选取上述PCR产物与变性剂和内参混匀,使用PCR仪在95℃下变性5min,取出立即放置冰上,然后放入遗传分析仪进行分析,同时使用GeneMapper软件读取片段长度;步骤3,遗传多样性分析和等位基因图谱构建将GeneMapper统计得到的等位基因长度数据输入Excel,根据特异等位基因长度构建其等位基因图谱。4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述越橘属植物来自如下:伯克利、蓝丰、布里吉塔、艾克塔、埃利奥特、泽西、瑞卡、安娜、比洛克西、蓝雨、绿宝石、奥尼尔、薄雾、盛世、莱格西、珍珠、海岸、杜克、奥扎克蓝、夏普蓝、明星、蓝美人、蓝宝石、贵蓝、霍利斯特、麦克法林、贝恩、史蒂文森、苍山越橘、乌鸦果、江南越橘、云南越橘1、云南越橘2、云南越橘3、无梗越橘1、无梗越橘2、乌饭树1和乌饭树2。5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述步骤2.1PCR扩增具体为:以步骤1提取的DNA为模板进行PCR扩增;20μL反应体系包含:TaKaRaPremixrTaqTM10μL、正向引物0.1μL,反向...

【专利技术属性】
技术研发人员:宗宇郭卫东方茜陈心怡陈文荣李永强
申请(专利权)人:浙江师范大学
类型:发明
国别省市:浙江,33

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