稻瘟病菌孢子实时定量环介导等温扩增检测法及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于稻瘟病菌的q‑LAMP快速检测方法的LAMP特异性引物组合物以及包含该LAMP特异性引物组合物的用于定量检测稻瘟病菌的环介导等温扩增试剂盒；本发明专利技术还同时公开了一种用于定量检测稻瘟病菌的环介导等温扩增方法，包括以下步骤：一、进行LAMP反应；二、判断：以荧光信号作为结果判定依据，当荧光值大于50时，判定结果为阳性，即待测样品中含稻瘟病菌DNA；反之，当荧光信号小于50时，判定结果为阴性，即待测样品中无稻瘟病菌DNA。本发明专利技术具有特异性强、鉴定快速的技术优势。

【技术实现步骤摘要】
稻瘟病菌孢子实时定量环介导等温扩增检测法及试剂盒
本专利技术涉及一种稻瘟病的实时定量环介导等温扩增(q-LAMP)检测方法及试剂盒，属于植物病害检测、鉴定及防治的早期预警

技术介绍
稻瘟病(riceblast)是由稻瘟病菌[Magnaporthegrisea(Hebert)Barr.]引起的真菌性病害。稻瘟病是目前对水稻生产危害最大的流行性真菌病害，给水稻产量带来巨大的损失。稻瘟病在水稻的不同组织部位和不同生育期均能发生，可侵染水稻叶片、茎节、穗颈和谷粒，其中穗颈瘟对稻谷产量的影响最大。在稻瘟病流行年份，田间损失轻则减产10～20％，重则减产40～50％，甚至颗粒无收。近些年，我国东北、西南及长江中下游等重要水稻种植地区连续发生，全国发病总面积高达330～570万hm2，稻米减产数亿吨，在稻瘟病流行的年份甚至失去收获价值，己给我国水稻的安全生产及提高粮食作物产量带来了巨大的压力。稻瘟病菌的初侵染主要主要来自病谷和病稻草。在自然界，稻瘟病菌主要依靠无性态的分生孢子进行侵染。翌年当气温上升到20℃左右并且遇到降雨时，就能不断产生分生孢子。夜间12时至次日凌晨6时产生的孢子最多。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于稻瘟病菌的q‑LAMP快速检测方法的LAMP特异性引物组合物，其特征在于：所述LAMP特异性引物组合物由上下游外引物、上下游内引物这四条引物组成；上游外引物(F3)：5’—GGAACTTGTAGCACTCGGC—3’；下游外引物(B3)：5’—TGGTGGCGGTTATGAGAGG—3’；上游内引物(FIP)：5’—TGGGGTTGTTGCTGCTGCTGCAAGAGAAACCCACCGCATC—3’；下游内引物(BIP)：5’—CACAACCAGCCCAAAAGCCCGGGGTTTGGTGAGGAACTC—3’。

【技术特征摘要】
1.用于稻瘟病菌的q-LAMP快速检测方法的LAMP特异性引物组合物，其特征在于：所述LAMP特异性引物组合物由上下游外引物、上下游内引物这四条引物组成；上游外引物(F3)：5’—GGAACTTGTAGCACTCGGC—3’；下游外引物(B3)：5’—TGGTGGCGGTTATGAGAGG—3’；上游内引物(FIP)：5’—TGGGGTTGTTGCTGCTGCTGCAAGAGAAACCCACCGCATC—3’；下游内引物(BIP)：5’—CACAACCAGCCCAAAAGCCCGGGGTTTGGTGAGGAACTC—3’。2.用于定量检测稻瘟病菌的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于：包含如权利要求1所述的LAMP特异性引物组合物。3.根据权利要求2所述的用于定量检测稻瘟病菌的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含10×ThermoPolBuffer、1mmol/LdNTPs、4mmol/LMgCl2、0.6mmol/L甜菜碱、10×SYBRGreenI、8U/μLBstDNA聚合酶、ddH2O。4.用于定量检...

【专利技术属性】
技术研发人员：张传清，张书亚，李玲，吴鉴艳，张宇，朱国念，
申请(专利权)人：浙江农林大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33