一种用于糖尿病患者种植体骨整合的药物靶标制造技术

本发明专利技术公开了一种用于糖尿病患者种植体骨整合的药物靶标，所述药物靶标为ZNF774。本发明专利技术公开了一种药物组合物，该药物组合物包括ZNF774的促进剂。本发明专利技术还公开了一种利用ZNF774筛选促进糖尿病患者种植体骨整合的候选药物的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种用于糖尿病患者种植体骨整合的药物靶标
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种用于糖尿病患者种植体骨整合的药物靶标，具体的所述靶标为ZNF774。
技术介绍
随着人民生活水平的提高以及生活方式的改变，糖尿病患病率逐年增加，中老年人患有糖尿病时又多同时伴有牙列缺损或缺失，渴望受惠于牙种植技术。人工高种植牙技术在我国已经开展了十余年，已经成为牙列缺损或缺失常用的修复方法之一，尤其是牙列远中游离端的缺失牙修复时更是首选。种植体骨结合是种植牙成功的基础，然而诸多研究证实糖尿病导致骨愈合延迟，影响了牙种植体植入的成功率，甚至将糖尿病列为种植牙手术的禁忌症之一。胰岛素被认为是体内能量代谢的主要调控者，其主要作用在肝脏、肌肉及脂肪组织，控制着蛋白质、糖、脂肪三大营养物质的代谢和贮存。糖尿病患者血糖控制不佳或胰岛素抵抗易引起种植体植入后创口愈合延迟，牙种植体骨结合不良(TatarakisN,KinneyJS,InglehartM,BraunTM,ShelburneC,LangNP,GiannobileWV,andOhTJ.Clinical,microbiological,andsalivarybiomarkerprofilesofdentalimplantpatientswithtype2diabetes.ClinOralImplantsRes.2014；25(7):803-812)。动物研究已经证实糖尿病大鼠通过胰岛素治疗后，种植体骨结合较未进行胰岛素治疗的糖尿病大鼠而言要更为正常但明显低于正常大鼠(HanY,ZhangX,LinglingE,WangD,andLiuH.Sustainedlocaldeliveryofinsulinforpotentialimprovementofperi-implantboneformationindiabetes.SciChinaLifeSci.2012；55(11):948-957)，提示糖尿病如果控制不佳会影响种植体骨整合界面形成。还有一些学者发现胰岛素治疗能够提高骨形成和矿化的正常水平(LiuEY,Wactawski-WendeJ,DonahueRP,DmochowskiJ,HoveyKM,andQuattrinT.Doeslowbonemineraldensitystartinpost-teenageyearsinwomenwithtype1diabetes？DiabetesCare.2003；26(8):2365-2369)。本课题组前期研究已经证实将生理浓度的胰岛素局部应用于糖尿病大鼠拔牙窝处能促进新骨形成，加速拔牙窝愈合(CN201010274107.7)。但是目前对于胰岛素的作用机制尚不清楚。本申请基于胰岛素促进骨整合的特征，研究在其中起重要作用的分子，为进一步阐明胰岛素调控骨稳态影响的信号通路研究奠定理论基础，为日益增多的糖尿病患者牙种植体骨结合不良的研究提供理论依据，同时为促进种植体的骨愈合提供新的思路。
技术实现思路
为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种与糖尿病患者种植体骨整合相关的基因标志物，通过改变基因的表达水平，可以影响种植体骨愈合。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术ZNF774在制备促进糖尿病患者种植体骨整合中的药物组合物中的应用。进一步，所述药物组合物包括ZNF774的促进剂。进一步，促进剂为增加ZNF774基因表达、增强ZNF774表达功能、和/或增强ZNF774表达产物活性的试剂。进一步，所述试剂为含有能编码功能性ZNF774蛋白的核酸的试剂、ZNF774蛋白的激活剂、含有ZNF774蛋白质的试剂。进一步，所述糖尿病是II型糖尿病。本专利技术提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括ZNF774功能性表达的促进剂，和/或药学上可接受的载体。进一步，促进剂为增加ZNF774基因表达、增强ZNF774表达功能、和/或增强ZNF774表达产物活性的试剂。本专利技术提供了一种筛选促进糖尿病患者种植体骨整合的候选药物的方法，步骤包括：用待筛选物质处理表达或含有ZNF774基因或其编码的蛋白的体系；和检测所述体系中ZNF774基因或其编码的蛋白的表达或活性。其中，若所述待筛选物质可增加ZNF774基因或其编码的蛋白的表达或活性，优选显著降低，(如高20％及以上，较佳的高50％及以上；更佳的高80％及以上)，则表明该待筛选物质是促进糖尿病患者种植体骨整合的候选药物。在本专利技术中，所述体系包括(但不限于)：细胞体系、亚细胞体系、溶液体系、组织体系、器官体系或动物体系。在本专利技术中，所述的步骤还包括：对获得的候选药物进行进一步的细胞实验和/或动物试验，以从候选药物中进一步选择促进糖尿病患者种植体骨整合的物质。本专利技术提供了如上所述的方法在筛选促进糖尿病患者种植体骨整合的候选药物中的应用。本专利技术的优点和有益效果：本专利技术首次发现了ZNF774基因与糖尿病患者种植体骨整合相关，通过增加ZNF774的表达水平，可以促进种植体骨整合，为糖尿病患者牙种植骨结合提供新的促进方法。附图说明图1是QPCR检测ZNF774基因的过表达。具体的实施方式本专利技术经过广泛而深入的研究，通过高通量方法，检测施用和未施用胰岛素的基因的表达水平，发现其中具有明显差异的基因，探讨其与种植体骨整合之间的关系。通过测序及分析，本专利技术首次发现了胰岛素组ZNF774显著性上调。实验证明，促进ZNF774的表达水平，能够有效的促进巨噬细胞的杀菌效果，为牙种植的骨结合提供了新的促进方法。在本专利技术中，ZNF774包括野生型、突变型或其片段。在本专利技术的具体实施例中，一种代表性ZNF774基因的的核苷酸序列如目前国际公共核酸数据库GeneBank中ZNF774(NM_001004309.2)所示。本专利技术的ZNF774核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。促进剂和药物组合物基于本专利技术的发现，本专利技术提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含ZNF774的促进剂。所述的ZNF774的促进剂是指任何可提高ZNF774基因或表达产物稳定性、上调ZNF774的表达、增加ZNF774的有效作用时间或促进ZNF774基因的转录的物质，这些物质均可用于本专利技术，作为对于上调ZNF774基因的表达有用的物质，从而可用于促进骨整合。作为本专利技术的一种优选方式，所述的ZNF774的促进剂是一种含有ZNF774的表达载体。所述的表达载体通常还含有启动子、复制起点和/或标记基因等。本领域的技术人员熟知的方法能用于构建本专利技术所需的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等。所述的表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如卡拉霉素、庆大霉素、潮霉素、氨苄青霉素抗性。在本专利技术中，是本领域已知的各种载体，如市售的载体、包括质粒、粘粒、噬菌体、病毒等。表达载体向宿主细胞中的导入可以使用电穿孔法、磷酸钙法、脂质体法、DEAE葡聚糖法、显微注射、病毒感染、脂质体转染、与细胞膜透过性肽的结合等周知的方法。术语“宿主细胞”包括原核细胞和真核细胞。常用的原核宿主细胞的例子包括大肠杆菌、枯草杆菌等。常用的真核宿主细胞包括酵母细胞、昆虫细胞和哺乳本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.ZNF774在制备促进糖尿病患者种植体骨整合中的药物组合物中的应用。

【技术特征摘要】
1.ZNF774在制备促进糖尿病患者种植体骨整合中的药物组合物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物组合物包括ZNF774的促进剂。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，促进剂为增加ZNF774基因表达、增强ZNF774表达功能、和/或增强ZNF774表达产物活性的试剂。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂为含有能编码功能性ZNF774蛋白的核酸的试剂、ZNF774蛋白的激活剂、含有ZNF774蛋白质的试剂。5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述糖尿病是II型糖尿病。6.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括ZNF774功能性表达的促进剂，和/或药学上可接受的载体...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪林，刘洪臣，白阳，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院，
类型：发明
国别省市：北京,11