The invention relates to a method for preparing tissue engineering oral mucosal epithelial cell slices. Specifically, the present invention provides a preparation method of oral mucosal epithelial cell sheet, which comprises the following steps: (a) oral mucosal tissue collection step; (b) oral mucosal epithelial cell extraction step; (c) oral mucosal fibroblasts extraction step; (d) epithelial cell culture matrix and culture scaffold preparation step; (e) oral mucosa preparation step. The steps of co-culture of dermal cells and oral mucosal fibroblasts, and the steps of isolation of (f) prepared epithelial cells and co-culture materials.
【技术实现步骤摘要】
一种用于角膜疾病治疗的上皮细胞片的制备方法及其应用
本专利技术涉及组织工程与生物制品领域，具体地，本专利技术涉及一种用于角膜疾病(尤其是角膜眼表疾病)治疗的上皮细胞片的制备方法及其应用。
技术介绍
人的眼角膜共分5层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层和内皮细胞层。上皮细胞层是最外面的一层，厚度约为50微米，占整个角膜厚度的10％，由5-6层细胞所组成。角膜周边部上皮增厚，细胞层数增加到8-10层。角膜上皮共有3种类型的细胞：基底细胞、翼状细胞、扁平细胞。上皮细胞间以桥小体相接，构成致密的质膜，这层致密坚固的屏障可阻止大部分微生物的侵入，阻止泪液中液体和电解质进入基质层，使得角膜处于相对脱水状态。由于外界原因和/或自身原因角膜上皮层会发生各种损伤和/或病变，情况严重导致失明。化学伤、热灼伤或其他疾病(例如，Steven-Johnson、眼天疱疮等)可导致眼表损伤，破坏角膜上皮的结构和功能。目前，目前临床治疗主要依赖于异体角膜移植，但供体材料来源有限等困难严重制约了这一治疗方法的应用。而且，异体角膜移植仍然存在术后免疫反应，甚至出现供体排斥而致手...
【技术保护点】
1.一种用于角膜疾病治疗的上皮细胞片的制备方法，包括以下步骤：(a)口腔黏膜组织采集步骤；(b)口腔黏膜上皮细胞提取步骤；(c)口腔黏膜成纤维细胞提取步骤；(d)上皮细胞培养基质和培养支架制备步骤；(e)口腔黏膜上皮细胞与口腔黏膜成纤维细胞共培养步骤；以及(f)制备得到的上皮细胞片与同培养材料的分离步骤。
【技术特征摘要】
1.一种用于角膜疾病治疗的上皮细胞片的制备方法，包括以下步骤：(a)口腔黏膜组织采集步骤；(b)口腔黏膜上皮细胞提取步骤；(c)口腔黏膜成纤维细胞提取步骤；(d)上皮细胞培养基质和培养支架制备步骤；(e)口腔黏膜上皮细胞与口腔黏膜成纤维细胞共培养步骤；以及(f)制备得到的上皮细胞片与同培养材料的分离步骤。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(b)中口腔黏膜上皮细胞采用Ⅰ型中性蛋白酶联合胰蛋白酶进行消化。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(c)中口腔黏膜成纤维细胞采用经Ⅰ型中性蛋白酶消化后的结缔组织块贴附培养法培养提取。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(d)中的上皮细胞培养基质包含1IU/ml的凝血酶以及1-1.6mg/ml的纤维蛋白原。5.如权利要求1所述的方法，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：薛琦，石躍由佳，吴复跃，何振东，
申请(专利权)人：上海睿泰生物科技股份有限公司，合肥欣睿生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31
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