一种具有抗氧化活性的鲜切山药黄色素及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种具有抗氧化活性的鲜切山药黄色素及其制备方法。该制备方法包括如下步骤：采用乙醇水溶液提取鲜切黄色山药片得色素粗提液；采用大孔树脂分离色素粗提液，依次采用水和乙醇洗脱，收集在波长为410nm处存在紫外可见吸收的洗脱液，即为色素洗脱液；采用凝胶树脂分离色素洗脱液，采用水与有机溶剂的混合液作为洗脱液进行洗脱，收集在波长为410nm处存在紫外可见吸收的洗脱液，即为山药黄色素粗提取物；采用固相微萃取纯化山药黄色素粗提取物，采用水洗脱至洗脱液呈无色，然后采用乙醇进行洗脱，收集黄色洗脱液；HPLC分离纯化黄色洗脱液，检测波长为410nm，收集第一个吸收峰得到。本发明专利技术鲜切山药黄色素具有抗氧化性，可用于制备高性能的抗氧化产品。

Fresh cut yam yellow pigment with antioxidant activity and preparation method thereof

The invention discloses a fresh cut yam yellow pigment with antioxidant activity and a preparation method thereof. The preparation method comprises the following steps: extracting the crude pigment extract from fresh cut yam slices by ethanol water solution; separating the pigment crude extract with macroporous resin, then washing by water and ethanol, and collecting the eluent with UV visible absorption at 410nm wavelength, namely the eluent eluent; separating the pigment with gel resin. The eluent was prepared by mixing water with organic solvent as eluent. The eluent with ultraviolet-visible absorption at 410 nm was collected as crude extract of yam yellow pigment. The yellow eluent was separated and purified by HPLC. The detection wavelength was 410 nm and the first absorption peak was obtained. The fresh yam yellow pigment has antioxidant property and can be used for preparing high performance antioxidant products.

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗氧化活性的鲜切山药黄色素及其制备方法
本专利技术涉及一种天然黄色素及其制备方法，具体涉及一种鲜切山药黄色素及其制备方法，属于农产品加工领域
技术介绍
鲜切山药新鲜、方便且含有蛋白、黏质多糖、黄酮等营养成分，越来越受消费者的喜爱。鲜切山药片进行加工时，将山药清洗、去皮、切片、包装后冷藏销售。但在切分过程中，山药的组织受到损伤，从而引起一系列复杂的生理生化反应，非常容易发生褐变，导致产品质量破坏。然而，前期研究表明鲜切山药在特定条件下贮藏会发生黄变和褐变，黄色山药颜色亮泽，相比于褐变后的山药，黄色山药更具有研究价值与发展前景。使其呈色的黄色素，作为天然色素，安全、无毒，在食品、化妆品、医药等领域有着巨大应用潜力。直至目前为止，未有鲜切山药黄色素的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是以鲜切黄色山药为原料提供一种鲜切山药黄色素，所制备的黄色素具有抗氧化活性。本专利技术以鲜切黄色山药片为原料制备所述鲜切山药黄色素。具体地，所述鲜切黄色山药片按照下述方法进行制备：1)山药经清洗后去皮；2)经步骤1)处理的所述山药切片得到山药片，将所述山药片浸泡于NaC1O水溶液中；3)经步骤2)处理的所述山药片装入包装袋中，并于22～28℃的条件下贮藏至所述山药片变成黄色，即得到所述鲜切黄色山药片。步骤1)中，需要选择无腐烂、无损伤的完整山药；所述清洗之前，还包括预冷所述山药的步骤；所述预冷的条件如下：温度可为4～10℃；时间可为20～24小时。步骤1)中，采用自来水洗净所述山药表面泥土，将其清洗干净；所述山药清洗干净后，去除其头、尾部分，削去皮经漂洗。步骤2)之前，所述方法还包括将所述山药进入冷水中的步骤；所述冷水的温度可为4～8℃。步骤2)中，所述山药片的厚度可为3～5mm，如3mm；所述NaC1O水溶液中NaC1O的质量浓度可为80～100mg/kg，如100mg/kg；所述浸泡的时间可为1～3min，如3min；所述山药片与所述NaC1O水溶液的配比可为：1g：4～6mL，如1g：5mL。步骤3)之前，所述方法还包括经所述浸泡后的所述山药片用清水漂洗并取出沥干的步骤。步骤3)中，所述包装袋的材质可为聚乙烯(PE)、聚丙烯(PP)和聚酯中任一种；所述聚酯具体可为聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)；所述包装袋的厚度为6～9丝(100丝＝1毫米)所述包装袋的O2透过率可为1000～1200cm3/m2·24h·0.1MP，如1114cm3/m2·24h·0.1MP，CO2透过率为3400～3800cm3/m2·24h·0.1MP，如3669cm3/m2·24h·0.1MP；所述包装袋内的气体组成为氮气和氧气，所述氮气的体积含量为70～85％，如80％。步骤3)中，所述贮藏的时间可为9～20小时，如11小时；所述方法还包括将所述鲜切黄色山药片于4℃下冷藏的步骤。本专利技术所提供的鲜切山药黄色素的制备方法包括如下步骤：(1)采用乙醇水溶液提取鲜切黄色山药片得色素粗提液；(2)采用大孔树脂分离所述色素粗提液，依次采用水和乙醇进行洗脱，收集在波长为410nm处存在紫外可见吸收的洗脱液，即为色素洗脱液；(3)采用凝胶树脂分离所述色素洗脱液，采用水与有机溶剂的混合液作为洗脱液进行洗脱，收集在波长为410nm处存在紫外可见吸收的洗脱液，即为山药黄色素粗提取物；(4)采用固相微萃取纯化所述山药黄色素粗提取物，采用水洗脱至洗脱液呈无色，然后采用乙醇进行洗脱，收集黄色洗脱液；(5)采用HPLC分离纯化所述黄色洗脱液，检测波长为410nm，共分离出三个主要吸收峰，收集第一个吸收峰，经浓缩、冷冻干燥即得到鲜切山药黄色素。上述的制备方法中，步骤(1)中，所述乙醇水溶液的体积分数为80～100％；所述提取的条件如下：所述鲜切黄色山药片与所述乙醇水溶液的质量体积比为1g：1～4mL；提取的温度为18℃～25℃；提取的时间为2～6h；提取的次数为1～3次；还需要在35～40℃条件下旋转蒸发所述色素粗提液。上述的制备方法中，步骤(2)中，所述大孔树脂可为XAD-7大孔树脂、AB-8大孔树脂或YWD-01大孔树脂；采用2～4个柱体积的所述水以4～8mL/min的流速进行洗脱；所述乙醇的流速为5～10mL/min；采用所述大孔树脂以去除所述色素粗提液中的糖、氨基酸、蛋白质等成分：黄色素等吸附到所述大孔树脂上，而糖、氨基酸、蛋白质等与所述大孔树脂不亲和，被所述水冲洗除去，而后采用所述乙醇洗脱色素组分，收集410nm色素洗脱液，并在温度35℃下，旋转蒸发浓缩。上述的制备方法中，步骤(3)中，所述凝胶树脂可为SephadexG-25凝胶树脂、SephadexLH-20凝胶树脂或SephadexG-20；所述有机溶剂为乙醇或甲醇；所述水与所述有机溶剂的体积比为1：1.5～4；所述洗脱液的流速为1.5～3.5mL/min；采用凝胶树脂以去除所述色素洗脱液中的除其他酚酸类物质；具体是将所述色素洗脱液按照重量体积比(g/mL)1：0.5～3的比例溶于无水乙醇，然后进行洗脱。上述的制备方法中，步骤(4)中，先采用5倍柱体积的乙醇和5倍体积的水活化固相微萃取小柱；上样1～2mL；然后采用水洗脱，洗脱至洗脱溶液无颜色，再采用乙醇洗脱并收集黄色洗脱液至洗脱液无颜色。上述的制备方法中，步骤(5)中，所述HPLC的检测条件如下：色谱柱为C18色谱柱，如XBridgeC18(250×9.4mm内径)、ZORBAXSB-C18(250×9.4mm内径)等；进样量为1～3mL；柱温22～28℃；流动相A为水，流动相B为乙腈溶液，梯度洗脱，流速为4～9mL/min；检测器为DAD检测器；检测波长为410nm；其中，梯度洗脱的条件为：0～10min，所述流动相B的体积百分含量为50％，10～35min，所述流动相B的体积百分含量由50％调至100％。还需要在35℃下进一步浓缩去除有机溶剂，而后在压力0.22MPa，冷冻干燥10～12h，得到黄色素固体样品。本专利技术上述方法制备的鲜切山药黄色素也属于本专利技术的保护范围。本专利技术提供的鲜切山药黄色素具有抗氧化性，可用于制备高性能的抗氧化产品。所述抗氧化产品表现为氧自由基吸收能力(Oxygenradicalabsorbancecapacity，ORAC)、DPPH自由基清除能力或ABTS自由基清除能力。本专利技术通过大孔树脂、凝胶树脂层析及制备型液相得到了天然鲜切山药黄色素，不仅应用潜力巨大，而且是单一鲜切山药黄色素的性质、功能研究的前提，具有很好的科研价值。此外，制备的黄色素具有抗氧化的能力，能够提高鲜切山药的附加值，因此分离制备一种天然鲜切山药黄色素并评价其抗氧化活性具有重要的意义。附图说明图1为本专利技术实施例1制备的鲜切黄色山药片的实物图。图2为本专利技术实施例1制备的鲜切山药黄色素的液相图谱。图3为本专利技术实施例1制备的鲜切山药黄色素的氧自由基吸收能力。图4为本专利技术实施例1制备的鲜切山药黄色素的清除DPPH自由基能力。图5为本专利技术实施例1制备的鲜切山药黄色素的清除ABTS自由基能力。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1、鲜切山药黄色素的制备(1)鲜切黄色本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鲜切山药黄色素的制备方法，包括如下步骤：(1)采用乙醇水溶液提取鲜切黄色山药片得色素粗提液；(2)采用大孔树脂分离所述色素粗提液，依次采用水和乙醇进行洗脱，收集在波长为410nm处存在紫外可见吸收的洗脱液，即为色素洗脱液；(3)采用凝胶树脂分离所述色素洗脱液，采用水与有机溶剂的混合液作为洗脱液进行洗脱，收集在波长为410nm处存在紫外可见吸收的洗脱液，即为山药黄色素粗提取物；(4)采用固相微萃取纯化所述山药黄色素粗提取物，采用水洗脱至洗脱液呈无色，然后采用乙醇进行洗脱，收集黄色洗脱液；(5)采用HPLC分离纯化所述黄色洗脱液，检测波长为410nm，收集第一个吸收峰，经浓缩、冷冻干燥即得到鲜切山药黄色素。

【技术特征摘要】
1.一种鲜切山药黄色素的制备方法，包括如下步骤：(1)采用乙醇水溶液提取鲜切黄色山药片得色素粗提液；(2)采用大孔树脂分离所述色素粗提液，依次采用水和乙醇进行洗脱，收集在波长为410nm处存在紫外可见吸收的洗脱液，即为色素洗脱液；(3)采用凝胶树脂分离所述色素洗脱液，采用水与有机溶剂的混合液作为洗脱液进行洗脱，收集在波长为410nm处存在紫外可见吸收的洗脱液，即为山药黄色素粗提取物；(4)采用固相微萃取纯化所述山药黄色素粗提取物，采用水洗脱至洗脱液呈无色，然后采用乙醇进行洗脱，收集黄色洗脱液；(5)采用HPLC分离纯化所述黄色洗脱液，检测波长为410nm，收集第一个吸收峰，经浓缩、冷冻干燥即得到鲜切山药黄色素。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述鲜切黄色山药片按照下述方法进行制备：1)山药经清洗后去皮；2)经步骤1)处理的所述山药切片得到山药片，将所述山药片浸泡于NaC1O水溶液中；3)经步骤2)处理的所述山药片装入包装袋中，并于22～28℃的条件下贮藏至所述山药片变成黄色，即得到所述鲜切黄色山药片。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤2)中，所述山药片的厚度为3～5mm，所述NaC1O水溶液中NaC1O的质量浓度为80～100mg/kg；所述浸泡的时间为1～3min；所述山药片与所述NaC1O水溶液的配比为：1g：4～6mL；步骤3)中，所述包装袋的材质为聚乙烯、聚丙烯和聚酯中任一种；所述包装袋的厚度为6～9丝；所述包装袋的O2透过率为1000～1200cm3/m2·24h·0.1MP，CO2透过率为3400～3800cm3/m2·24h·0.1MP；所述包装袋内的气体组成...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丹，赵晓燕，马越，赵磊，张超，王宇滨，赵文婷，
申请(专利权)人：北京市农林科学院，
类型：发明
国别省市：北京,11