一种间接抗人球蛋白加速配血的试验方法技术

本发明专利技术公开了一种间接抗人球蛋白加速配血的试验方法：将红细胞中加入生理盐水清洗后混合均匀，离心分离去除上清液，加入生理盐水配置成红细胞悬液，然后加入血浆或血清混合均匀，最后加入间接抗人球蛋白试验加速增强剂混合均匀，孵育，加入生理盐水离心分离，轻摇试管观察结果，根据红细胞凝集或分散的状况判断结果。本发明专利技术的方法利用间接抗人球蛋白试验加速增强剂，加速增强输血前交叉配合试验和/或红细胞不规则抗体筛查试验，该试剂的反应孵育时间短、灵敏度高、准确性强，可以快速检出各种较弱的红细胞不规则抗体，适用于急诊快速交叉配血和红细胞不规则抗体筛查。

An indirect anti human globulin accelerated blood matching test method

The invention discloses an indirect anti-human globulin accelerated blood matching test method: adding normal saline to the red blood cells after washing and mixing evenly, centrifuging and separating to remove the supernatant, adding normal saline to prepare red blood cells suspension, then adding plasma or serum to mix evenly, and finally adding indirect anti-human globulin test to accelerate the increase. The strong agent was mixed evenly, incubated, centrifuged and separated by adding normal saline. The results were judged by the agglutination or dispersion of red blood cells. The method of the invention utilizes an indirect anti-human globulin test accelerating enhancer to accelerate the pre-transfusion cross-matching test and/or red blood cell irregular antibody screening test. The reagent has the advantages of short incubation time, high sensitivity and high accuracy, and can quickly detect various weak red blood cell irregular antibodies, and is suitable for emergency treatment. Rapid cross matching and irregular antibody screening.

【技术实现步骤摘要】
一种间接抗人球蛋白加速配血的试验方法
本专利技术涉及生物医药
，具体的说，涉及一种间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，可以加快配血或抗体筛查的速度。
技术介绍
ABO血型系统是Landsteiner于1900年发现的人类第一个血型系统，随着人类对血型的进一步研究，至今发现人类血型系统已有36种，血型抗原有300多个。不相容的输血可能会导致严重溶血反应，甚至休克以致死亡。目前，临床常规检测的ABO血型和Rh血型是2种最重要的血型系统，但是其余34种血型系统如果不匹配，仍有可能发生抗原抗体引起的输血不良反应。因此，交叉配血在输血前显得尤为重要，可以减少输血不良反应的发生。目前，传统的抗球蛋白试管交叉配血法中，主侧是加入患者的血浆和献血员的红细胞，次侧是加入献血员的血浆和患者的红细胞，在37℃水浴中用生理盐水洗涤三次，最后加入抗球蛋白试剂，离心后观察结果。该方法的弱点是孵育时间长、反应灵敏度低，需要37℃环境下孵育30至60分钟不等，而且可能会漏检效价较弱的抗体，从而导致严重的输血不良反应。当患者急需用血时，这个方法长时间的操作可能会产生较大的危险。因此，有必要开发一种加速增强剂添加到该试验中，使得反应孵育时间缩短，检测灵敏度提升，从而在较短时间内检出红细胞不完全抗体，保障患者输血安全。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种反应孵育时间短、检测灵敏度高、患者输血安全的间接抗人球蛋白试验加速增强剂。本专利技术的另一个目的是提供一种反应孵育时间短、检测灵敏度高、患者输血安全、间接抗人球蛋白加速配血的试验方法。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：本专利技术的一个方面提供了一种间接抗人球蛋白试验加速增强剂，包括浓度为1～60％的聚乙二醇(PEG)溶液和浓度为0.1～5％的凝聚胺(polybrene)溶液，所述聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(10～20):1。优选的，所述聚乙二醇(PEG)溶液的浓度为1～10％，所述凝聚胺(polybrene)溶液的浓度为0.1～3％，更优选的，所述聚乙二醇(PEG)溶液的浓度为3～5％，所述凝聚胺(polybrene)溶液的浓度为1～3％。优选的，所述聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(12～15):1。所述聚乙二醇的分子量为2000～8000，优选4000～6000。当聚乙二醇的分子量小于2000时，经过研究表明无法增强间接抗人球蛋白试验；当聚乙二醇的分子量大于8000时，经过研究表明会造成红细胞的假聚集，造成间接抗人球蛋白试验的假阳性。所述聚乙二醇(PEG)溶液是将聚乙二醇粉剂溶于蒸馏水中配成。所述凝聚胺(polybrene)溶液是将凝聚胺(polybrene)粉剂溶于蒸馏水中配成。本专利技术在前期试验中，也选择现有技术中的低离子强度溶液(LISS)、牛血清白蛋白、聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶、交联葡聚糖G50等，与本专利技术所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂相比，效果明显较差，无法明显增强间接抗人球蛋白试验。优选的，本专利技术的间接抗人球蛋白试验加速增强剂中，再加入LISS溶液和/或牛血清白蛋白。所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂中，所述LISS溶液与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1；所述牛血清白蛋白与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1。本专利技术的间接抗人球蛋白试验加速增强剂，pH值为6.5-7。本专利技术的另一个方面提供了一种所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂的制备方法，包括以下步骤：将聚乙二醇粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为1～60％的聚乙二醇(PEG)溶液，将凝聚胺(polybrene)粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为0.1～5％的凝聚胺(polybrene)溶液，然后将凝聚胺溶液加入到聚乙二醇溶液中，聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(10～20):1，调节溶液的pH值为6.5-7，获得所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂。所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂溶于蒸馏水中的结果明显优于磷酸盐缓冲溶液(PBS)及生理盐水。本专利技术的另一个方面提供了一种所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂的制备方法，包括以下步骤：将聚乙二醇粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为1～60％的聚乙二醇(PEG)溶液，将凝聚胺(polybrene)粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为0.1～5％的凝聚胺(polybrene)溶液，然后将凝聚胺溶液加入到聚乙二醇溶液中，聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(10～20):1，再加入LISS溶液，LISS溶液与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1；或再加入牛血清白蛋白，牛血清白蛋白与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1；或同时加入LISS溶液和牛血清白蛋白，LISS溶液与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1，牛血清白蛋白与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1；调节溶液的pH值为6.5-7，获得所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂。本专利技术的第三方面是提供了上述间接抗人球蛋白试验加速增强剂的具体应用。其一是在传统试管法间接抗人球蛋白试验中的应用。具体的，本专利技术提供了一种间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，在该试验方法中加入上述的间接抗人球蛋白试验加速增强剂，该试验方法包括以下步骤：将红细胞中加入生理盐水清洗后混合均匀，离心分离去除上清液，加入生理盐水配置成红细胞悬液，然后加入血浆或血清混合均匀，最后加入间接抗人球蛋白试验加速增强剂混合均匀，孵育，加入生理盐水离心分离，轻摇试管观察结果，根据红细胞凝集或分散的状况判断结果。所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂，包括浓度为1～60％的聚乙二醇(PEG)溶液和浓度为0.1～5％的凝聚胺(polybrene)溶液，所述聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(10～20):1。所述聚乙二醇的分子量为2000～8000，优选4000～6000。所述聚乙二醇(PEG)溶液是将聚乙二醇粉剂溶于蒸馏水中配成。所述凝聚胺(polybrene)溶液是将凝聚胺(polybrene)粉剂溶于蒸馏水中配成。优选的，所述聚乙二醇(PEG)溶液的浓度为1～10％，所述凝聚胺(polybrene)溶液的浓度为0.1～3％，更优选的，所述聚乙二醇(PEG)溶液的浓度为3～5％，所述凝聚胺(polybrene)溶液的浓度为1～3％。优选的，所述聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(12～15):1。优选的，本专利技术的间接抗人球蛋白试验加速增强剂中，再加入LISS溶液和/或牛血清白蛋白。所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂中，所述LISS溶液与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1；所述牛血清白蛋白与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1。本专利技术的间接抗人球蛋白试验加速增强剂，pH值为6.5-7。所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂的制备方法，包括以下步骤：将聚乙二醇粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为1～60％的聚乙二醇(PEG)溶液，将凝聚胺(polybrene)粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为0.1～5％的凝聚胺(polybrene)溶液，然后将凝聚胺溶液加入到聚乙二醇溶液中，聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(10～20):1，调节溶液的pH值为6.5-7，获得所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂；或者，将聚乙二醇粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为1～60％的聚乙二醇(PEG)溶液，将凝聚胺(polybrene)粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为0.1～5％的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，其特征在于：包括以下步骤：将红细胞中加入生理盐水清洗后混合均匀，离心分离去除上清液，加入生理盐水配置成红细胞悬液，然后加入血浆或血清混合均匀，最后加入间接抗人球蛋白试验加速增强剂混合均匀，孵育，加入生理盐水离心分离，轻摇试管观察结果，根据红细胞凝集或分散的状况判断结果；所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂，包括浓度为1～60％的聚乙二醇溶液和浓度为0.1～5％的凝聚胺溶液，所述聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(10～20):1。

【技术特征摘要】
1.一种间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，其特征在于：包括以下步骤：将红细胞中加入生理盐水清洗后混合均匀，离心分离去除上清液，加入生理盐水配置成红细胞悬液，然后加入血浆或血清混合均匀，最后加入间接抗人球蛋白试验加速增强剂混合均匀，孵育，加入生理盐水离心分离，轻摇试管观察结果，根据红细胞凝集或分散的状况判断结果；所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂，包括浓度为1～60％的聚乙二醇溶液和浓度为0.1～5％的凝聚胺溶液，所述聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(10～20):1。2.根据权利要求1所述的间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，其特征在于：所述聚乙二醇的分子量为2000～8000；优选的，所述聚乙二醇的分子量为4000～6000。3.根据权利要求1所述的间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，其特征在于：所述聚乙二醇溶液是将聚乙二醇粉剂溶于蒸馏水中配成；所述凝聚胺溶液是将凝聚胺粉剂溶于蒸馏水中配成。4.根据权利要求1所述的间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，其特征在于：所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂中，再加入LISS溶液和/或牛血清白蛋白。5.根据权利要求4所述的间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，其特征在于：所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂中，所述LISS溶液与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1；所述牛血清白蛋白与凝聚胺溶液的体积比为(5～10):1。6.根据权利要求1至3任一项所述的间接抗人球蛋白加速配血的试验方法，其特征在于：所述间接抗人球蛋白试验加速增强剂的制备方法，包括以下步骤：将聚乙二醇粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为1～60％的聚乙二醇溶液，将凝聚胺粉剂溶于蒸馏水中配成浓度为0.1～5％的凝聚胺溶液，然后将凝聚胺溶液加入到聚乙二醇溶液中，聚乙二醇溶液和凝聚胺溶液的体积比为(10～20):1，调节溶液的pH值为6.5-7，获得所述的间接抗人球...

【专利技术属性】
技术研发人员：周晔，唐晓峰，王雪琦，蒋天舒，沈磊，黄斐，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学第二附属医院，
类型：发明
国别省市：上海,31