5-氨基乙酰丙酸高产菌株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种构建5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的方法，即在所述5‑氨基乙酰丙酸生产菌株表达ALA合成酶(ALAS)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PPC)的基础上使得所述5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的乙醛酸循环途径弱化。本发明专利技术还公开了利用所述方法构建的ALA高产菌株和利用所述菌株制备ALA的方法。利用本发明专利技术的菌株可显著提高ALA的产量。

5- aminolevulinic acid high producing strain and its preparation method and Application

The invention discloses a method for constructing a 5_aminolevulinic acid producing strain, which weakens the glyoxylic acid cycling pathway of the 5_aminolevulinic acid producing strain on the basis of the expression of ALA synthase (ALAS) and phosphoenolpyruvate carboxylase (PPC). The invention also discloses an ALA high-yield strain constructed by the method and a method for preparing ALA by the strain. The strain of the invention can significantly increase the yield of ALA.

【技术实现步骤摘要】
5-氨基乙酰丙酸高产菌株及其制备方法和应用
本专利技术涉及基因工程和微生物发酵
具体地说，本专利技术涉及5-氨基乙酰丙酸的高产菌株及其制备方法和应用。
技术介绍
5-氨基乙酰丙酸(ALA)是一种重要的高附加值生物基化工产品，在农业、医药等领域应用广泛。目前ALA主要通过化学合成法合成，成本高污染重，限制了其在各领域的推广应用。由于具备低成本和无污染的优势，利用微生物发酵法合成ALA逐渐成为研究的热点。生物体内ALA主要有两种合成途径(C4途径和C5途径)，强化途径中关键酶的表达作为常规途径已被广泛用于ALA高产菌株的构建(CN101063104A、CN102206606A等)。现有技术针对ALA合成的代谢途径改造主要是通过增加底物琥珀酰辅酶A的供给或降低产物ALA的消耗来提高ALA产量，例如增强四碳回补途径(CN103981203B)、强化辅酶A供给途径(CN103710374A)、弱化ALA下游代谢途径(CN103695364A/CN104830748A)等。另有研究发现增强转运蛋白的表达可以提高ALA产量(CN106047916A、CN106434513A等)。此外，目前本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法，所述方法包括：使得所述5‑氨基乙酰丙酸生产菌株的乙醛酸循环弱化。

【技术特征摘要】
1.一种5-氨基乙酰丙酸生产菌株的构建方法，所述方法包括：使得所述5-氨基乙酰丙酸生产菌株的乙醛酸循环弱化。2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述乙醛酸循环弱化是指乙醛酸循环所涉及的异柠檬酸裂解酶和/或苹果酸合酶的活性部分或完全缺失。3.如权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述构建方法还包括使得所述5-氨基乙酰丙酸生产菌株表达ALA外排蛋白或增强所述5-氨基乙酰丙酸生产菌株中ALA外排蛋白的活性。4.一种5-氨基乙酰丙酸生产菌株，所述菌株中乙醛酸循环弱化。5.如权利要求4所述的5-氨基乙酰丙酸生产菌株，其特征在于，所述乙醛酸循环弱化是指乙醛酸循环所涉及的异柠檬酸裂解酶和/或苹果酸合酶的活性弱化。6.如权利要求4或5所述的5-氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑平，陈久洲，孙际宾，周文娟，孙村民，郭轩，马延和，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：天津,12