一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂制造技术

本发明专利技术公开了一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，包括以下原料：甘油4.8‑8.7ml、维生素C 6‑6.9ug、黄原胶0.75‑1g、聚甘油脂肪酸酯0.3‑0.68g、卡拉胶0.45‑0.6g、海藻糖0.5‑0.86g、甘露醇0.06‑0.18g、氨基酸0.4‑0.7g、高分子纤维素0.01‑0.013g以及山梨醇1.2‑1.8g。本发明专利技术原料来源广泛，本发明专利技术的成品可以保持蛋白质复合物在常温下的活性及稳定性，有效解决低温存储限制、冻融及保存期限短等问题，满足了人们的使用需求。

A stabilizer for secreting protein from stem cell culture supernatant

The invention discloses a protein stabilizer secreted from stem cell culture supernatant, which comprises the following raw materials: glycerol 4.8_8.7 ml, vitamin C 6_6.9 ug, xanthan gum 0.75_1 g, polyglyceride fatty acid ester 0.3_0.68 g, carrageenan 0.45_0.6 g, trehalose 0.5_0.86 g, mannitol 0.06_0.18 g, amino acid 0.4_0.7 g, high molecular fiber fatty acid 0.4_0.7 g, etc. Vitamin 0.013g 0.01 and sorbitol 1.2 1.8g. The finished product of the invention can maintain the activity and stability of the protein complex at room temperature, effectively solve the problems of low temperature storage limitation, freeze-thaw and short shelf life, and meet the needs of people.

【技术实现步骤摘要】
一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂
本专利技术涉及干细胞培养分泌蛋白领域，具体是一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂。
技术介绍
干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。干细胞近年来被广泛应用于医学，美容研究等领域，如人脐带间充质干细胞治疗糖尿病的临床研究，脂肪间充质干细胞用于美容整形领域等等，另有研究表明，干细胞在生长过程中分泌多种蛋白，小分子多肽及生长调节因子，长期使用可以促进皮肤新陈代谢，抗皱及抗光老化，效果较明显。但由于其存在于液体中，但须保存在-20℃，保存期限较短，且不能反复冻融。蛋白质的保存通常采用冻干粉低温长期存储的方法，保持蛋白质的活性及稳定性，也就是要保证蛋白质空间结构的稳定性，影响其稳定性的因素通常有溶液的PH值、盐分和糖分的浓度、微生物的作用及空气的氧化等。一方面，氨基酸是很好的抗氧化剂；各种糖能起到保护蛋白质活性的作用；离子螯合剂有多重功效，如抗氧化，亦可防止一些离子沉积；甘油、山梨醇可以保持蛋白质表面的滋润，使其不至于因失水而失活。另外一些水溶性杂蛋白或化学惰性的高分子物质的聚合物(如PEG等)因其分子量大，能够在抗原抗体表面形成一种保护膜，使蛋白结构免遭破坏，但是这些都是在低温下才能实现，而且保存期限短。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，包括以下原料：甘油4.8-8.7ml、维生素C6-6.9ug、黄原胶0.75-1g、聚甘油脂肪酸酯0.3-0.68g、卡拉胶0.45-0.6g、海藻糖0.5-0.86g、甘露醇0.06-0.18g、氨基酸0.4-0.7g、高分子纤维素0.01-0.013g以及山梨醇1.2-1.8g。作为本专利技术进一步的方案：甘油采用医用级甘油，维生素C、黄原胶、高分子纤维素以及山梨醇均采用无菌产品。作为本专利技术进一步的方案：甘油、维生素C、黄原胶、高分子纤维素以及山梨醇的纯度均不低于98％。作为本专利技术进一步的方案：氨基酸包括赖氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、精氨酸和络氨酸中的至少一种。作为本专利技术进一步的方案：卡拉胶采用K-型或者I-型卡拉胶，甘露醇采用海带中提取的甘露醇。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术原料来源广泛，本专利技术的成品可以保持蛋白质复合物在常温下的活性及稳定性，有效解决低温存储限制、冻融及保存期限短等问题，满足了人们的使用需求。附图说明图1为干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂使用时的PH测定图。图2为干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂使用时的摩尔渗透压图。图3为干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂使用时的降解速率图。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。实施例1一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，包括以下原料：甘油4.8ml、维生素C6ug、黄原胶0.75g、聚甘油脂肪酸酯0.3g、卡拉胶0.45g、海藻糖0.5g、甘露醇0.06g、氨基酸0.4g、高分子纤维素0.01g以及山梨醇1.2g。甘油采用医用级甘油，维生素C、黄原胶、高分子纤维素以及山梨醇均采用无菌产品。氨基酸包括赖氨酸、天冬氨酸和精氨酸的混合物。将干细胞培养上清蛋白复合物分为两组，实验组添加实施例1的产品，对照组不添加实施例1的产品，添加于稳定剂等量生理盐水，无菌分装成各30支，5ml/支，在常温状态下(20-25℃)密封保存，定期检测其PH。测定的PH曲线图见图1。图1表明添加实施例1产品的蛋白复合液在常温(20-25℃)下，波动范围较小，明显优于不添加实施例1产品的对照组。实施例2一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，包括以下原料：甘油6.6ml、维生素C6.5ug、黄原胶0.88g、聚甘油脂肪酸酯0.49g、卡拉胶0.54g、海藻糖0.75g、甘露醇0.12g、氨基酸0.55g、高分子纤维素0.012g以及山梨醇1.6g。甘油、维生素C、黄原胶、高分子纤维素以及山梨醇的纯度均不低于98％。卡拉胶采用K-型卡拉胶，甘露醇采用海带中提取的甘露醇。将干细胞培养上清蛋白复合物分为两组，实验组添加实施例2的产品，对照组不添加实施例2的产品，添加与稳定剂等量生理盐水，无菌分装成各30支，5ml/支，在常温状态下(20-25℃)密封保存，定期检测其摩尔渗透压。测定的摩尔渗透压曲线图见图2。图2表明添加实施例2的产品对摩尔渗透压无影响，两组结果均在正常波动范围内。实施例3一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，包括以下原料：甘油8.7ml、维生素C6.9ug、黄原胶1g、聚甘油脂肪酸酯0.68g、卡拉胶0.6g、海藻糖0.86g、甘露醇0.18g、氨基酸0.7g、高分子纤维素0.013g以及山梨醇1.8g。甘油采用医用级甘油，维生素C、黄原胶、高分子纤维素以及山梨醇均采用无菌产品。甘油、维生素C、黄原胶、高分子纤维素以及山梨醇的纯度均不低于98％。卡拉胶采用I-型卡拉胶，甘露醇采用海带中提取的甘露醇。氨基酸包括赖氨酸、丝氨酸、天冬氨酸、精氨酸和络氨酸的混合物。将脐带间充质干细胞上清分泌蛋白液分为两组，一组添加实施例3的产品，一组为空白对照，每组无菌分装30支，1.0ml/支，置于常温下，定期检测其总蛋白含量。总蛋白降解速率图见图3。图3表明，添加实施例3产品的脐带间充质干细胞上清液可以明显改善蛋白的降解速率。对于本领域技术人员而言，显然本专利技术不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本专利技术的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本专利技术。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本专利技术的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本专利技术内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，其特征在于，包括以下原料：甘油4.8‑8.7ml、维生素C 6‑6.9ug、黄原胶0.75‑1g、聚甘油脂肪酸酯0.3‑0.68g、卡拉胶0.45‑0.6g、海藻糖0.5‑0.86g、甘露醇0.06‑0.18g、氨基酸0.4‑0.7g、高分子纤维素0.01‑0.013g以及山梨醇1.2‑1.8g。

【技术特征摘要】
1.一种干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，其特征在于，包括以下原料：甘油4.8-8.7ml、维生素C6-6.9ug、黄原胶0.75-1g、聚甘油脂肪酸酯0.3-0.68g、卡拉胶0.45-0.6g、海藻糖0.5-0.86g、甘露醇0.06-0.18g、氨基酸0.4-0.7g、高分子纤维素0.01-0.013g以及山梨醇1.2-1.8g。2.根据权利要求1所述的干细胞培养上清分泌蛋白的稳定剂，其特征在于，所述甘油采用医用级甘油，维生素C、黄原胶、高分...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘谋元，解光永，
申请(专利权)人：命之本源医疗科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11