一种制备肌肽的新工艺方法技术

本发明专利技术涉及一种制备肌肽的新工艺方法，包括以下步骤：A.β‑丙氨酸甲酯盐酸盐合成；1.1向反应釜中加入甲醇，控温0‑20℃，将氯化亚砜滴入其中，滴加完毕，加入β‑丙氨酸，30‑60℃保温搅拌1‑5h；1.230‑50℃减压，真空度≤‑0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β‑丙氨酸甲酯盐酸盐。本发明专利技术适用于肌肽的制备。

A new process for preparing Carnosine

The invention relates to a new process for preparing carnosine, which comprises the following steps: synthesis of A. beta alanine methyl ester hydrochloride; 1.1 addition of methanol to the reactor, temperature control 0 20 C, dropping sulfoxide chloride into it, adding beta alanine, 30 60 C heat preservation stirring for 1_5h; and 1. The concentration of 0.09MPa was concentrated and concentrated to no fractions. The invention is suitable for the preparation of carnosine.

【技术实现步骤摘要】
一种制备肌肽的新工艺方法
本专利技术技术涉及医药和化工

技术介绍
肌肽是一种天然的活性二肽，研究证明L-肌肽有抗氧化作用，有抗衰老功能，对高血压、心脏病、老年性白内障、溃疡等都有治疗效果，还有抗肿瘤等生物活性，可延缓皮肤衰老。与其他抗氧化剂相比，L-肌肽具有抗氧化能力强、无毒副作用的优点，并有多种生理活性，在医药、保健、卫生、美容等领域有广泛的应用前景。
技术实现思路
专利技术目的：为了解决上述技术问题，本专利技术公开一种制备肌肽的新工艺方法，本申请人之前已申请了申请号为2017105545126，专利技术名称为一种催化合成肌肽的氨肽酶及其制备方法和应用的专利技术，其中公开了酶的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。技术方案:一种制备肌肽的新工艺方法，包括以下步骤：A.β-丙氨酸甲酯盐酸盐合成；1.1向反应釜中加入甲醇，控温0-20℃，将氯化亚砜滴入其中，滴加完毕，加入β-丙氨酸，30-60℃保温搅拌1-5h；1.230-50℃减压，真空度≤-0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β-丙氨酸甲酯盐酸盐；B.酶反应；2.1向反应釜中加入L-组氨酸、去离子水、β-丙氨酸甲酯盐酸盐；2.2在15-45℃，用碱性溶液调节pH值至7.0-9.0；2.3加入酶，加酶的量为反应液总量的1%-3%，该酶的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示；25-45℃搅拌反应，反应过程中用碱性溶液控制反应体系pH值在7.0-9.0；C.肌肽粗品制备；3.1反应完毕，放料，料液离心除去不溶物，收集滤液；3.2将得到的滤液通过超滤机进行超滤，收集超滤透析液；3.3将得到的超滤透析液通过纳滤机进行纳滤，收集纳滤浓缩液；3.4将纳滤浓缩液上树脂柱，树脂柱的径高比为0.05-0.2，上样pH值为5.0-7.0，上样流速为0.5-2.0bv/h；3.5用纯化水冲洗树脂柱；3.6用1%-5%的氨水洗脱解吸附树脂柱，收集茚三酮显色部分洗脱液；3.7将收集的洗脱液50-80℃减压，真空度≤-0.09MPa，浓缩至肌肽含量20-40%；3.8加入浓缩液的2-8倍量的有机溶剂，0-25℃搅拌析晶10-24h。3.9析晶完毕，放料离心，30-50℃减压，真空度≤-0.09MPa，干燥6-8h，得肌肽粗品；D.肌肽粗品精制；4.1肌肽粗品加入水溶解；4.2往滤液中加入析晶溶剂，0-25℃搅拌析晶10-24h；4.3析晶完毕，放料离心，30-50℃减压，真空度≤-0.09MPa，干燥6-8h，得肌肽精品。作为优选，所述步骤B中，所述碱性溶液为氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸氢钾、氨水中的一种。作为优选，步骤C中所述上样的流速为0.5-2.0bv/h。作为优选，所述的树脂柱为001×7型阳离子树脂柱。作为优选，所述步骤C中析晶溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇或丙酮中的一种。作为优选，所述步骤D中析晶溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇或丙酮中的一种。有益的效果：本专利技术采作酶催化合成肌肽，该酶的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，该酶反应生成率高，可到达95%以上，与传统化学法相比，其污染小、反应周期短，更利于产业化，能耗低。本专利技术采用超滤设备，有效除去多余大分子酶，用纳滤设备有效去除小分子盐，提高了产品的纯度，污染小、成本低；利用001×7型阳离子树脂对反应液进行提纯，树脂对产品吸附量大、对杂质吸附小，除杂效果好。具体实施方式下面结合具体实例对本专利技术技术作进一步说明，但本专利技术的保护范围不限于下述的实例。β-丙氨酸甲酯盐酸盐合成实施例：实施例1：1、准确称取甲醇400g、氯化亚砜220g，控温0-5℃、将氯化亚砜缓慢滴加到甲醇中，滴加完毕，加入β-丙氨酸160g，30-35℃保温搅拌2h；2、保温结束，35-40℃减压，真空度≤-0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β-丙氨酸甲酯盐酸盐245g，收率为97.6%。实施例2：1、准确称取甲醇500g、氯化亚砜280g，控温10-15℃、将氯化亚砜缓慢滴加到甲醇中，滴加完毕，加入β-丙氨酸200g，35-40℃保温搅拌4h；2、保温结束，45-50℃减压，真空度≤-0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β-丙氨酸甲酯盐酸盐307g，收率为97.9%。实施例3：1、准确称取甲醇600g、氯化亚砜340g，控温15-20℃、将氯化亚砜缓慢滴加到甲醇中，滴加完毕，加入β-丙氨酸250g，45-50℃保温搅拌1h；保温结束，45-50℃减压，真空度≤-0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β-丙氨酸甲酯盐酸盐373g，收率为95.8%。酶反应实施例，其中酶的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示。实施例4：1、向反应瓶中加入L-组氨酸20g、去离子水400g、β-丙氨酸甲酯盐酸盐25g，搅拌均匀；2、在25-30℃，用30%氢氧化钠调节pH至7.0-7.5；3、加入2%酶液9g，25-30℃搅拌反应4.0h，反应过程中用5%NaOH溶液控制反应体系pH值在7.0-7.5；4、反应完毕，反应液中肌肽含量为6.19%，生成率为96.1%。实施例5：1、向反应瓶中加入L-组氨酸30g、去离子水600g、β-丙氨酸甲酯盐酸盐37.5g，搅拌均匀；2、在20-25℃，用20%氨水调节pH至7.5-8.0；3、加入2%酶液13g，20-25℃搅拌反应3.0h，反应过程中用20%氨水溶液控制反应体系pH值在7.5-8.0；4、反应完毕，反应液中肌肽含量为6.39%，生成率为98.0%。实施例6：1、向反应瓶中加入L-组氨酸40g、去离子水800g、β-丙氨酸甲酯盐酸盐50g，搅拌均匀；2、在35-40℃，用20%碳酸钠调节pH至8.5-9.0；3、加入1%酶液9g，35-40℃搅拌反应2.0h，反应过程中用5%碳酸钠溶液控制反应体系pH值在8.5-9.0；4、反应完毕，反应液中肌肽含量为6.29%，生成率为97.1%。肌肽粗品制备实施例：实施例7：1、将肌肽纳滤浓缩液300g，其中肌肽含量6.29%，上300ml001×7型阳离子树脂柱，上样速度：0.5bv/h，上样完毕，用500ml纯化水洗涤，水洗速度：1.0bv/h，，水洗完后用2%氨水解吸，解吸速度：1.5bv/h，收集茚三酮明显显色部分，得解吸液826g，解吸液含量为2.17%，解析率约为95.0%，将解析液控温50-55℃减压，真空度≤-0.09MPa，浓缩至肌肽含量25%，得肌肽浓缩液；2、加入肌肽浓缩液的3倍量的甲醇，0-5℃搅拌析晶10h；3、析晶完毕，过滤，30-35℃减压，真空度≤-0.09MPa干燥6-8h，得肌肽粗品16.0g，析晶收率为89.3%。实施例8：1、将肌肽纳滤浓缩液250g，其中肌肽含量为6.38%，上250ml001×7型阳离子树脂柱，上样速度：1.0bv/h，上样完毕，用400ml纯化水洗涤，水洗速度：1.5bv/h，水洗完后用3%氨水解吸，解吸速度：1.5bv/h，收集茚三酮明显显色部分，得解吸液650g，解吸液含量为2.36%，解析率约为96.0%。将解析液控温60-65℃减压，真空度≤-0.09MPa，浓缩至肌肽含量30%，得肌肽浓缩液；2、加入浓缩液的4倍量的乙醇10-15℃搅拌析晶18h。3、析晶完毕，过滤，35-40℃减压，真本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备肌肽的新工艺方法，其特征在于：包括以下步骤：A.β‑丙氨酸甲酯盐酸盐合成；1） 向反应釜中加入甲醇，控温0‑20℃，将氯化亚砜滴入其中，滴加完毕，加入β‑丙氨酸，30‑60℃保温搅拌1‑5h；2） 30‑50℃减压，真空度≤‑0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β‑丙氨酸甲酯盐酸盐；B.酶反应；1）向反应釜中加入L‑组氨酸、去离子水、β‑丙氨酸甲酯盐酸盐；2） 在15‑45℃，用碱性溶液调节pH值至7.0‑9.0；3） 加入酶，加酶的量为反应液总量的1%‑3%，该酶的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；25‑45℃搅拌反应，反应过程中用碱性溶液控制反应体系pH值在7.0‑9.0；C.肌肽粗品制备；1）反应完毕，放料，料液离心除去不溶物，收集滤液；2）将得到的滤液通过超滤机进行超滤，收集超滤透析液；3）将得到的超滤透析液通过纳滤机进行纳滤，收集纳滤浓缩液；4）将纳滤浓缩液上树脂柱，树脂柱的径高比为0.05‑0.2，上样pH值为5.0‑7.0；5）用纯化水冲洗树脂柱；6）用1%‑5%的氨水洗脱解吸附树脂柱，收集茚三酮显色部分洗脱液；7）将收集的洗脱液50‑80℃减压，真空度≤‑0.09MPa，浓缩至肌肽含量20‑40%；8）加入浓缩液的2‑8倍量的析晶溶剂，0‑25℃搅拌析晶10‑24h；9）析晶完毕，放料离心，30‑50℃减压，真空度≤‑0.09MPa，干燥6‑8h，得肌肽粗品；D.肌肽粗品精制；1）肌肽粗品加入水溶解；2）往滤液中加入有机溶剂，0‑25℃搅拌析晶10‑24h；3）析晶完毕，放料离心，30‑50℃减压，真空度≤‑0.09MPa，干燥6‑8h，得肌肽精品。...

【技术特征摘要】
1.一种制备肌肽的新工艺方法，其特征在于：包括以下步骤：A.β-丙氨酸甲酯盐酸盐合成；1）向反应釜中加入甲醇，控温0-20℃，将氯化亚砜滴入其中，滴加完毕，加入β-丙氨酸，30-60℃保温搅拌1-5h；2）30-50℃减压，真空度≤-0.09MPa，浓缩，浓缩至无馏分流出，得β-丙氨酸甲酯盐酸盐；B.酶反应；1）向反应釜中加入L-组氨酸、去离子水、β-丙氨酸甲酯盐酸盐；2）在15-45℃，用碱性溶液调节pH值至7.0-9.0；3）加入酶，加酶的量为反应液总量的1%-3%，该酶的核苷酸序列如SEQIDNO：1所示；25-45℃搅拌反应，反应过程中用碱性溶液控制反应体系pH值在7.0-9.0；C.肌肽粗品制备；1）反应完毕，放料，料液离心除去不溶物，收集滤液；2）将得到的滤液通过超滤机进行超滤，收集超滤透析液；3）将得到的超滤透析液通过纳滤机进行纳滤，收集纳滤浓缩液；4）将纳滤浓缩液上树脂柱，树脂柱的径高比为0.05-0.2，上样pH值为5.0-7.0；5）用纯化水冲洗树脂柱；6）用1%-5%的氨水洗脱解吸附树脂柱，收集茚三酮显色部分洗脱液；7）将收集的洗脱液50-80℃减压，真空度...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄科学，祝俊，赵士魁，刘双喜，王峰峰，余玉奎，徐飞，李斌，余允东，
申请(专利权)人：江苏诚信药业有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32