毛蕊花糖苷在治疗和预防II型糖尿病肾病中的应用制造技术

本发明专利技术涉及毛蕊花糖苷的新用途与新作用机制，具体涉及毛蕊花糖苷在制备预防和治疗II型糖尿病肾病药物中的应用，并对毛蕊花糖苷对II型糖尿病肾病的保护作用及其作用机制进行了研究。结果显示：毛蕊花糖苷可改善高糖引起的肝脏损伤，降低自发型糖尿病db/db小鼠的血肌酐、尿素氮、尿微量白蛋白水平以及血脂水平(总胆固醇和甘油三酯)、空腹血糖与血胰岛素水平；显著降低肾脏组织中TGF‑β1及其信号转导蛋白Smad3和Smad4与α‑SMA蛋白表达；同时，毛蕊花糖苷可改善高糖引起的肝脏损伤；抑制HK‑2增殖和EMT形成。综上，毛蕊花糖苷对2型糖尿病肾病具有显著的保护作用，其作用机制是通过调控氧化应激反应、抑制TGF‑β/smad信号通路及改善肾脏纤维化而发挥其肾脏保护作用。

【技术实现步骤摘要】
毛蕊花糖苷在治疗和预防II型糖尿病肾病中的应用
本专利技术属于医药
，具体涉及毛蕊花糖苷在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物或保健品中的应用。
技术介绍
毛蕊花糖苷是苯乙醇苷类的代表性成分，广泛分布于多种植物科属如马鞭草科，唇形科，玄参科，木犀科，和车前科等。一般来说，毛蕊花糖苷是由咖啡酸和羟基酪醇通过酯和糖苷键结合的，其糖部分为鼠李糖和葡萄糖组成。有实验表明，毛蕊花糖苷在吸收入血前经胃肠道多部水解过程，然后经过进一步的I期(氧化还原)和/或II期(葡萄糖醛酸、硫酸、甲基化)的代谢，因此毛蕊花糖苷在大鼠体内口服生物利用度较低。据文献报道，毛蕊花糖苷具有广泛的药理活性，如肾脏保护，抗菌，抗氧化，降压，神经保护，保肝，抗炎等。地黄中毛蕊花糖苷具有抗氧化、抗炎杀菌等多种生物学活性，并能保护肝肺组织和皮肤，拮抗神经系统损伤，其不仅被用于人类的医疗保健，还可用于动物的生产领域。随着人们对于毛蕊花糖苷的研究逐步深入，其将在日后发挥其更大的潜力。地黄叶总苷(TotalsaponinsfromleavesofRehmannia,TLR)为地黄叶中提取的苯乙醇苷类成分，其中毛蕊花糖苷为其主要成分。临床上主要用于用于慢性肾小球肾炎轻症等多种肾脏疾病的治疗。文献报道毛蕊花糖苷具有增强记忆及保护神经、抗氧化、抗肿瘤等药理作用，由于其生物活性强、毒副作用小且来源广泛，受到国内外众多研究者的重视。沈欣等研究表明毛蕊花糖苷具有一定的免疫调节活性，前期研究中发现其对肾毒性肾炎模型大鼠具有改善其肾功能损伤的作用，且无明显不良反应。文献研究表明毛蕊花糖苷对腹腔注射氧化可的松建立的小鼠肾阳虚模型具有补肾壮阳的作用。此外，毛蕊花糖苷已被证明可能通过抗氧化、清除活性氧和对谷胱甘肽转移酶(GST)活性诱导的作用，促进皮肤修复和改善皮肤炎症。综上所述，随着对地黄研究的不断深入，对地黄叶的研究也逐渐深入，并已从地黄叶中分离出了多种化合物，尤其是环烯醚萜苷类及苯乙醇苷类成分，为地黄叶这一资源得到合理开发和利用奠定基础。地黄叶中含有的毛蕊花糖苷药理作用广泛，其具有多种生物活性且安全性好，显示出潜在的开发价值。目前还没有毛蕊花糖苷在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物或保健品中的应用报道。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术提供了毛蕊花糖苷在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物或保健品中的应用。本专利技术以自发型糖尿病db/db小鼠为实验动物模型，应用地黄叶总苷进行干预治疗，通过对其各项生化指标，肾脏病理切片分析以及利用Westernblotting法分析TGF-β/smad信号通路，进一步研究揭示地黄叶总苷对糖尿病引起的早期肾脏损伤的改善作用研究。本专利技术实验选择人肾小管上皮(HK-2)细胞，建立高糖诱导的HK-2细胞损伤模型，用地黄叶总苷胶囊、地黄叶总苷提取物及其中主要活性成分毛蕊花糖苷与梓醇进行干预，Weaternblotting法及Realtime-PCR检测各细胞中相关蛋白及mRNA的表达量；ELISA法检测细胞上清液中相关因子的分泌情况。进一步探索地黄叶总苷对HK-2细胞氧化应激反应及TGF-β/smad信号通路的调节作用研究。
技术实现思路
：毛蕊花糖苷在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物或保健品中的应用。毛蕊花糖苷作为唯一成分在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物或保健品中的应用。毛蕊花糖苷在制备降低TGF-β1/Smad信号通路与α-SMA蛋白表达的药物或保健品中的应用。毛蕊花糖苷在制备降低NOX1、NOX2、NoX4、α-SMA、NF-κBp65、TGF-β1、Smad2、Smad3及Smad4的蛋白表达量的药物或保健品中的应用。毛蕊花糖苷在制备升高E-cadherin及Smad7的蛋白表达量的药物或保健品中的应用。毛蕊花糖苷在制备降低HK-2细胞上清液中MCP-1、IL-1β、TNF-α、IL-6表达量的药物或保健品中的应用。毛蕊花糖苷在制备抑制EMT形成的药物或保健品中的应用。毛蕊花糖苷在制备降低细胞内活性氧(ROS)水平的药物或保健品中的应用。毛蕊花糖苷在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物同时，可用于制备改善高糖引起的肝脏损伤药物或保健品中的应用。所述糖尿病肾损伤疾病包括肾小管间质纤维化、肾小球高滤过和肾脏肥大期、肾小球硬化早期。所述药物或保健品为口服给药剂型、注射给药剂型、粘膜给药剂型或者经皮给药剂型等。所述药物或保健品剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、贴剂或者凝胶剂等。有益效果：1、PAS结果表明，与空白组相比，模型组db/db小鼠肾小球面积增大，基底膜增厚，平均光密度值显著增大(P<0.05)；HE结果表明皮质大量肾小囊上皮增厚，皮髓质交界处可见较多肾小管上皮细胞水肿变性，细胞肿胀，胞浆疏松淡染，并可见极少量管型；皮质一处小范围内可见肾小管上皮细胞胞浆嗜酸性减弱，间质可见少量结缔组织增生。组织学检查的结果与生化分析相一致(见图2)，即：厄贝沙坦组、毛蕊花糖苷组结果趋于空白组。2、与空白对照组相比，高糖诱导损伤的HK-2细胞中，NOX1、NOX2、NoX4、α-SMA、NF-κBp65、TGF-β1、Smad2、Smad3及Smad4的蛋白表达量明显升高(P<0.05)，且E-cadherin及Smad7的蛋白表达量显著降低(P<0.05)。50μmol·L-1的毛蕊花糖苷干预后，NOX1、NOX2、NoX4、α-SMA、E-cadherin、NF-κBp65、TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4和Smad7的表达向正常水平回归。3、与空白对照组相比，高糖诱导损伤的HK-2细胞中NOX1、NOX2、NoX4、α-SMA、E-cadherin、NF-κBp65、TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4和Smad7mRNA的表达情况与其蛋白表达相一致。50μmol·L-1的毛蕊花糖苷干预后，NOX1、NOX2、NoX4、α-SMA、E-cadherin、NF-κBp65、TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4和Smad7的mRNA表达向正常水平回归。4、与空白对照组相比，高糖诱导损伤的HK-2细胞上清液中MCP-1、IL-1β、TNF-α、IL-6的表达量明显升高(P<0.05)。50μmol·L-1的毛蕊花糖苷干预后，MCP-1、IL-1β、TNF-α、IL-6的表达向正常水平回归。5、生化指标分析结果表明，与db/db模型组比较，血肌酐、尿素氮、尿微量白蛋白水平在治疗组明显改善，且血脂水平(总胆固醇和甘油三酯)及血糖水平(空腹血糖与血胰岛素水平)在给药组中也有不同程度的改善。另外，肝脏指标(谷草转氨酶和谷丙转氨酶)含量在模型组显著增加，可见高糖引起了肝脏损伤，且地黄叶总苷可改善高糖引起的肝脏损伤。Westernbloting结果显示，肾脏组织中TGF-β1及其信号转导蛋白Smad3和Smad4与α-SMA蛋白表达显著下降，尤其是地黄叶总苷提取物给药后。总之，地黄叶总苷可降低尿微量白蛋白、血肌酐和尿素氮含量，改善空腹血糖、血胰岛素水平及血脂代谢紊乱，降低TGF-β1/Smad信号通路与α-SMA蛋白的表达，改善肾间质纤维化程度，从而发挥改善肾脏损伤的作用。附图说明本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.毛蕊花糖苷在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物或保健品中的应用。

【技术特征摘要】
1.毛蕊花糖苷在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物或保健品中的应用。2.毛蕊花糖苷作为唯一成分在制备预防或治疗糖尿病肾损伤的药物或保健品中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，毛蕊花糖苷在制备降低TGF-β1/Smad信号通路与α-SMA蛋白表达的药物或保健品中的应用。4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，毛蕊花糖苷在制备抑制EMT形成的药物或保健品中的应用。5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，毛蕊花糖苷在制备降低细胞内活性氧(ROS)水平的药物或保健品中的应用。6.根据权利要求1或2所述的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：宿树兰，段金廒，钱大玮，朱悦，严辉，戴新新，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32