一种赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法技术

本发明专利技术公开了一种赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，以乙腈和磷酸的混合溶液为流动相，检测波长为UV361nm，采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测。并对本发明专利技术测定方法进行了方法学验证，相比较现有检测技术对本品含量的测定方法，本发明专利技术的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，能够精准测定赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药的含量，具有高效、快捷、准确的等优点，提高了检测的准确性，减少了人为操作的误差。

【技术实现步骤摘要】
一种赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法
本专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法。
技术介绍
赖氨酸维B12颗粒制剂，适应症为本品能加速儿童生长发育、增进食欲。消除异食癖。有助于大脑发育和提高智力。具有有抗贫血、增强体质和抗病的功效。其中，赖氨酸可是维持机体平衡的8种必须氨基酸之一，能促进蛋白质的合成与代谢，有促进人体生长发育及智力发育的作用；肌醇能促进肝中脂肪的代谢：维生素B12参与体内甲基四氢叶酸转变为四氢叶酸的过程；维生素B12缺乏与叶酸缺乏所致贫血的血细胞形态学异常基本相似，二药可相互纠正血象的异常。但过量的维生素B12会产生毒副作用，可能会出现哮喘、荨麻疹、湿疹、面部浮肿、寒颤等过敏反应，还可导致叶酸的缺乏。因此，有必要对赖氨酸维B12颗粒制剂中维生素B12的含量进行精准测定。目前对于维生素B12主药含量测定2015年版药典采用的是紫外-可见分光光度法，颗粒剂含量测定WS-10001-(HD-1392)-2003采用的是电化学法。但这两种检测方法原料和颗粒剂并不统一可能造成同一批原料做到颗粒剂可能会存在一定的含量误差，且此方法人为因素较大。
技术实现思路
本专利技术为解决现有技术中的上述问题，提出一种赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法。本专利技术提供了一种测定主药维生素B12颗粒制剂含量测定的分析方法，相比较2015年版中国药典与WS-10001-(HD-1392)-2003对本品含量的测定方法,该方法具有高效，便捷，准确等优点。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术提供了一种赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，其特征在于，以乙腈和磷酸的混合溶液为流动相，检测波长为UV361nm，采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测。进一步地，在所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法中，所述乙腈和磷酸的混合溶液由乙腈和质量百分比浓度为0.3％的磷酸水溶液按体积比(20-30)：(70-80)配置而成。进一步地，在所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法中，所述HPLC的检测条件如下：色谱柱：C18柱250×4.6mm依利特E1617886；流动相：乙腈和磷酸的混合溶液；流速：0.8-1.5ml/min；检测波长：361nm；进样量：10μl；柱温：20-30℃；系统适用性：理论板数按维生素B12峰计算不低于2000。进一步优选地，在所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法中，所述HPLC的检测方法如下：(1)对照液的制备：取维生素B12对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照溶液(10ug/ml)；(2)供试液的制备：取维生素B12颗粒剂0.4g，精密称定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；(3)精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，计算得维生素B12含量。进一步优选地，在所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法中，HPLC的检测条件中所述的乙腈和磷酸的混合溶液由乙腈和质量百分比浓度为0.3％的磷酸水溶液按体积比(20-30)：(70-80)配置而成。进一步较为优选地，在所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法中，HPLC的检测条件中所述的乙腈和磷酸的混合溶液由乙腈和质量百分比浓度为0.3％的磷酸水溶液按体积比25：75配置而成。进一步优选地，在所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法中，HPLC的检测条件中所述的流速为1.0ml/min，柱温为30℃。本专利技术采用上述技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：本专利技术提供的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，以乙腈和磷酸的混合溶液为流动相，检测波长为UV361nm，采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测；系统适用性：理论板数按维生素B12计算不低于2000；本专利技术测定分析方法包括高效，快捷，准确，更减少了人为操作的误差；且经方法学验证，相比较现有检测技术对本品含量的测定方法，具有经济、高效、快捷、准确的等优点。附图说明图1为对照品溶液的HPLC图谱；图2为维生素B12线性关系图和线性曲线图。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本专利技术，但是下述实施例并不限制本专利技术范围。实施例维生素B12颗粒剂中主药含量的测定(一)试药，见表1：表1试药来源名称生产厂家备注维生素B12对照品国家食品药品检定研究院批号：100367-201305维生素B12华北制药威可达有限公司批号：C150602C维生素B12颗粒剂上海信谊万象药业股份有限公司批号：56170101磷酸上海凌峰化学试剂有限公司分析纯乙腈Merck公司色谱级(二)HPLC的检测条件：色谱柱：C18柱250×4.6mm依利特E1617886；流动相：乙腈和磷酸的混合溶液；流速：1.0ml/min；检测波长：361nm；进样量：10μl；柱温：30℃；系统适用性：理论板数按维生素B12峰计算不低于2000。(三)HPLC的检测方法：(1)对照液的制备：取维生素B12对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为对照溶液(10ug/ml)；(2)供试液的制备：取维生素B12颗粒剂0.4g，精密称定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀；(3)精密量取上述对照品溶液和供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，计算得维生素B12含量。方法验证为确保本专利技术含量测定方法的科学、合理、可行，专利技术人进行了一系列的试验研究和考察。以下为本专利技术维生素B12中主药含量的测定方法的色谱条件确定后，验证其测定效果的实验。1、定量限试验1.1评价标准定量限评价标准：信噪比约10:1，相对标准偏差不大于2.0％。1.2配制定量限供试液储备液：避光操作，取维生素B12对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。再取5ml，置50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为储备液。定量限供试液：避光操作，取储备液1ml至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度。再取5.5ml至100ml容量瓶中，加水稀释至刻度。1.3测定方法避光操作，精密量取上述定量限供试液各10ug，以信噪比10:1时注入高效液相色谱仪，确定该浓度为最低检测浓度，将最低检测浓度连续进样6次，按实施例色谱条件进行测定，记录色谱图中维生素B12的峰面积，结果表明：峰面积的RSD值为1.6％(见表2)，符合限量性评价标准。表2定量限结果2、线性试验2.1供试液的制备供试液储备液：避光操作，精密称取维生素B12对照品约10mg，置100ml量瓶中，加水使维生素B12溶解，加水稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，浓度为50ug/ml，作为供试液储备液。A：避光操作，精密量取储备液1ml，置200ml容量瓶中，加水稀释至刻度。再取1ml，置200ml容量瓶中，加水稀释本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，其特征在于，以乙腈和磷酸的混合溶液为流动相，检测波长为UV361nm，采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测。

【技术特征摘要】
1.一种赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，其特征在于，以乙腈和磷酸的混合溶液为流动相，检测波长为UV361nm，采用高效液相色谱法(HPLC)进行检测。2.根据权利要求1所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，其特征在于，所述乙腈和磷酸的混合溶液由乙腈和质量百分比浓度为0.3％的磷酸水溶液按体积比(20-30)：(70-80)配置而成。3.根据权利要求1所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，其特征在于，所述HPLC的检测条件如下：色谱柱：C18柱250×4.6mm依利特E1617886；流动相：乙腈和磷酸的混合溶液；流速：0.8-1.5ml/min；检测波长：361nm；进样量：10μl；柱温：20-30℃；系统适用性：理论板数按维生素B12峰计算不低于2000。4.根据权利要求3所述的赖氨酸维生素B12颗粒剂中主药含量测定的分析方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈洁，倪晓兰，
申请(专利权)人：上海信谊万象药业股份有限公司，上海信谊延安药业有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31