基于CRISPR/Cas9技术构建的LMNA基因敲除的细胞系制造技术

本发明专利技术公开了LMNA基因敲除的细胞系，所述细胞系为293T细胞系或HePG2肿瘤细胞系。所述细胞系是基于crispr‑cas9技术利用SEQ ID NO.1‑4所示的两对gRNA或SEQ ID NO.7‑10所示的两对gRNA构建的质粒载体转染待敲除细胞，经抗性筛选得到。所述LMNA基因敲除的细胞系可以用于扩心病、脂肪代谢障碍综合征、早衰综合征等疾病干预药物筛选细胞模型。

Construction of LMNA knockout cell lines based on CRISPR/Cas9 Technology

The present invention discloses a LMNA knockout cell line, which is 293T cell line or HePG2 tumor cell line. The cell line is based on crispr_cas9 technique and transfected into knockout cells by two pairs of gRNA or two pairs of gRNA as shown in SEQ ID NO.1_4 or SEQ ID NO.7_10. The LMNA knockout cell line can be used for screening cell models of disease intervention drugs such as dilated heart disease, fat metabolism disorder syndrome, premature aging syndrome, etc.

【技术实现步骤摘要】
基于CRISPR/Cas9技术构建的LMNA基因敲除的细胞系
本专利技术涉及生物
，具体涉及基于CRISPR/Cas9技术构建的LMNA基因敲除的细胞系及其构建方法。
技术介绍
近几年发展起来的CRISPR/Cas9基因组定向编辑技术能够实现对基因组的特异性和精确敲除。基因组定向编辑技术可以导致目标位点的缺失、插入或替换。继ZFN和TALEN技术之后，CRISPR/Cas9系统已经迅速发展为第3代基因组编辑技术。CRISPR/Cas9系统是CRISPR/Cas系统Ⅱ经过改造而成。与ZFN和TALEN技术相比，CRISPR/Cas9系统在设计、合成和筛选上都非常简便，而且易于操作、成本低、构建周期短并且可以实现同时对多个基因的编辑，成倍的提高对基因编辑的效率。LMNA基因位于染色体的1q21.2-q21.3，基因组序列全长56.7kb，含有12个外显子，在10号外显子上选择性剪接产生2种mRNA，分别编码laminA和laminC蛋白。这两种蛋白与LMNB基因编码的LaminB蛋白共同组成细胞的核纤层（nuclearlamin）。核纤层紧贴于内层核膜（innernuclearme本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种LMNA基因敲除的细胞系，所述细胞系为293T细胞系或HePG2肿瘤细胞系。

【技术特征摘要】
1.一种LMNA基因敲除的细胞系，所述细胞系为293T细胞系或HePG2肿瘤细胞系。2.一种构建LMNA基因敲除的细胞系的方法，所述方法基于crispr-cas9技术利用SEQIDNO.1-4所示的两对gRNA或SEQIDNO.7-10所示的两对gRNA构建的质粒载体转染待敲除细胞，经抗性筛选得到所述LMNA基因敲除的细胞系。3.根据权利要求2所述的方法，其中当细胞系为293T细胞系时，使用SEQIDNO.1-4...

【专利技术属性】
技术研发人员：舒伟，刘恒，杨晓波，李东明，李福记，朱兰玉，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：广西,45