一种黑曲霉麸曲培养基及其配制方法技术

本发明专利技术涉及柠檬酸发酵领域，具体涉及一种黑曲霉麸曲培养基及其配制方法。该培养基含有小麦麦糠，添加黑曲霉生长所需的营养液，该营养液包含葡萄糖，牛肉浸粉，硫酸铵，磷酸氢二钾等营养成分，该培养基的pH值为5.0‑7.0。本发明专利技术所公布的培养基在培养基灭菌过程中不结块，灭菌效率高，能够很好的将生长产生的热量及时散出；同时添加菌种生长所需营养成分使在黑曲霉生长过程当中，能够提高黑曲霉麸曲生长的质量、孢子量，能够保证生长的稳定性。

Aspergillus niger bran koji culture medium and preparation method thereof

The invention relates to the field of citric acid fermentation, in particular to an Aspergillus Niger bran medium and a preparation method thereof. The medium contains wheat bran and nutrient solution for Aspergillus Niger growth. The nutrient solution contains glucose, beef extract, ammonium sulfate, potassium hydrogen phosphate and other nutrients. The pH value of the medium is 5.0_7.0. The medium disclosed in the present invention does not agglomerate during the sterilization process of the medium, has high sterilization efficiency, and can well disperse the heat generated by the growth in time; at the same time, adding the nutrient components needed for the growth of the strain can improve the quality and spore quantity of the growth of Aspergillus Niger bran, and ensure the growth of Aspergillus Niger bran. Stability.

【技术实现步骤摘要】
一种黑曲霉麸曲培养基及其配制方法
本专利技术涉及柠檬酸发酵领域，具体涉及一种黑曲霉麸曲培养基及其配制方法。
技术介绍
目前在柠檬酸行业当中，黑曲霉麸曲的制备多采用小麦麸皮，水分含量在50-70％。因小麦麸皮的特征，在灭菌过程中，麸皮培养基容易结块，影响灭菌效果，同时对后期黑曲霉麸曲培养过程中热量的散失不及时，麸皮营养成分缺乏导致黑曲霉培养产孢子量少生长质量差，异常菌批较多，增大劳动量，浪费了生产成本和劳动成本，生产效率低下。
技术实现思路
针对以上问题，本专利技术提供了一种黑曲霉麸曲培养基及其配制方法，该培养基采用小麦麦糠作为基质，添加营养液组成，解决了以往黑曲霉麸曲培养基在灭菌及培养过程易结块，灭菌效果不够理想，热量散失不及时，营养成分缺失，产孢子量少等问题。首先一种黑曲霉麸曲培养基，由小麦麦糠与营养液组成，小麦麦糠与营养液的质量比为8-12:1；以上营养液中包含葡萄糖，牛肉浸粉，硫酸铵，磷酸氢二钾，硫酸亚铁，硫酸锰，硫酸镁等营养成分，具体原料按重量份配比为：葡萄糖10-15份，牛肉浸粉5-10份，硫酸铵3-6份，磷酸二氢钾0.5-1份，硫酸亚铁0.5-1份，硫酸锰0.2-0.5份，硫酸镁0.2-0.5份，水75份；pH值为5.0-7.0。专利技术人进一步给出了以上黑曲霉麸曲培养基的配制方法，具体步骤如下：1)按照营养液各原料重量份组成准备原料，葡萄糖10-15份，牛肉浸粉5-10份，硫酸铵3-6份，磷酸二氢钾0.5-1份，硫酸亚铁0.5-1份，硫酸锰0.2-0.5份，硫酸镁0.2-0.5份，水75份；2)将步骤1)各组分混合，搅拌使各组分在水中充分溶解；3)调节营养液pH值为5.0-7.0；4)将小麦麦糠与营养液按照质量比例8-12:1混合均匀，调节pH值到5.0-7.0，进行灭菌，使用的灭菌条件一般为压力0.12-0.16Mpa，温度105-126℃，时间30-60min。本专利技术中所用的pH调节剂可以是盐酸，硫酸，柠檬酸等的一种或多种。本专利技术中对于使用的小麦麦糠没有特别要求，小麦去除麦粒之后的外壳即可，优选的小麦麦糠粒径一般为5-10mm，含水量在60％左右。根据本专利技术所提供的黑曲霉麸曲培养基，使用时接入本领域常规接种量的黑曲霉菌种，进行麸曲培养的条件可以为本领域在培养黑曲霉麸曲时常用的条件，该培养条件包括：温度为31-37℃，湿度50-70％，培养时间为8-11天。本专利技术的有益效果主要体现在以下两大方面：1.本专利技术培养基采用小麦麦糠作为基质，主要根据小麦麦糠的形态特征，其表面积要比现有的麦麸表面积要大，能够提供更多的生长空间来生长以达到增大孢子量的目的，同时麦糠的不规则的形态特征使其内部有更多的空隙，更加有利于生长期间自身产生热量的快速散失，而且麦糠之间互相支撑也能更好地防止培养基在灭菌过程中的结块；本专利技术中对于使用的小麦麦糠没有特别要求，但粒径在5-10mm能够保证培养基具有更好的均一性、透气性以及灭菌效果。2.营养液提供了黑曲霉生长所需的各种营养物质，其中葡萄糖作为培养基的碳源，牛肉浸粉作为培养基的有机氮源，硫酸铵作为培养基中的无机氮源，磷酸氢二钾，硫酸亚铁，硫酸锰，硫酸镁作为补充菌体生长所需微量类无机营养物，与常规麸皮培养基相比，能够更好地为菌种所吸收利用；调节pH值5.0-7.0能够保证灭菌后的培养基的微酸性环境更适合黑曲霉生长。综上所述，经实验证明本专利技术所述的培养基与普通麸曲培养基(麸皮培养基)相比，灭菌后结块率明显降低，甚至本专利技术的培养基无结块，染菌率低，灭菌效果更好；相同培养模式下，产孢量明显增加。具体实施方式以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容做进一步的详细说明，但不以任何方式限制本专利技术。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围，除特殊说明外，下述实施例中均采用常规现有技术完成。以下实施例和对比例营养液没有特别明示的，均由以下重量份组成：葡萄糖12份，牛肉浸粉6份，硫酸铵4份，磷酸二氢钾0.5份，硫酸亚铁0.5份，硫酸锰0.3份，硫酸镁0.2份，水75份；将上述组分按照份数要求混合，搅拌使组分在水中充分溶解；调节营养液pH值为6.0。以下实施例及对比例的无菌检测方式为：将消毒灭菌后的培养基在无菌环境下将50ml无菌水添加到培养基内，充分摇匀后，添加到LB培养基内，35℃恒温培养2天，然后通过显微镜镜检的方式检测无菌情况。计算公式：染菌率(％)＝染菌瓶数/检测总瓶数*100。以下实施例及对比例的孢子计数检测方式:每瓶做3组，取培养好的黑曲霉麸曲0.5g，加入到含0.1％吐温的无菌水中，用磁力搅拌器将孢子完全打散，在显微镜下用血球计数板进行计数，取三组平均值作为参考数值。实施例1将小麦麦糠(颗粒大小5-10mm，水分含量60％)按照小麦麦糠与营养液重量比10:1进行混合，将其搅拌均匀后，加入盐酸调节pH值到6.0.将上述混合好的培养基分装为13瓶(每瓶含量培养基100g)，然后在压力0.14MPa，温度121℃，恒温60min灭菌，即得到灭菌后的培养基。取其中10瓶观察结块情况，并检测无菌情况；然后剩余3瓶以每克培养基为标准，接入黑曲霉孢子数量为2×105个/克。在本领域通用的培养环境下(环境温度30-38℃，湿度50-70％，每间隔8小时一次翻拍，培养10天)进行培养后，进行孢子计数，详细检测情况见表1。实施例2将小麦麦糠按照小麦麦糠与营养液重量比12:1进行混合，将其搅拌均匀后，加入盐酸调节pH值到6.0.将上述混合好的培养基分装为13瓶(每瓶含量培养基100g)，然后在压力0.14MPa，温度121℃，恒温60min灭菌，即得到灭菌后的培养基。取其中10瓶观察结块情况，并检测无菌情况；然后剩余3瓶以每克培养基为标准，接入黑曲霉孢子数量为2×105个/克。在本领域通用的培养环境下(环境温度30-38℃，湿度50-70％，每间隔8小时一次翻拍，培养10天)进行培养后，进行孢子计数，详细检测情况见表1。实施例3将小麦麦糠(颗粒大小5-10mm，水分含量60％)按照小麦麦糠与营养液(本营养液中未添加磷酸二氢钾0.5份，硫酸亚铁0.5份，硫酸锰0.3份，硫酸镁0.2份)重量比重10:1进行混合，将其搅拌均匀后，加入盐酸调节pH值到6.0.将上述混合好的培养基分装为13瓶(每瓶含量培养基100g)，然后在压力0.14MPa，温度121℃，恒温60min灭菌，即得到灭菌后的培养基。取其中10瓶观察结块情况，并检测无菌情况；然后剩余3瓶以每克培养基为标准，接入黑曲霉孢子数量为2×105个/克。在本领域通用的培养环境下(环境温度30-38℃，湿度50-70％，每间隔8小时一次翻拍，培养10天)进行培养后，进行孢子计数，详细检测情况见表1。实施例4将小麦麦糠(颗粒大小5-10mm，水分含量60％)按照小麦麦糠与营养液(本营养液中未添加磷酸二氢钾0.5份，硫酸亚铁0.5份，硫酸锰0.3份，硫酸镁0.2份)重量比12:1进行混合，将其搅拌均匀后，加入盐酸调节pH值到6.0.将上述混合好的培养基分装为13瓶(每瓶含量培养基100g)，然后在压力0.14MPa，温度121℃，恒温60min灭菌，即得到灭菌后的培养基。取其中10瓶观察结块情况，并检测无菌情况；然后剩余3瓶以每克培养本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种黑曲霉麸曲培养基，其特征在于：由小麦麦糠与营养液组成，小麦麦糠与营养液的质量比为8‑12:1。

【技术特征摘要】
1.一种黑曲霉麸曲培养基，其特征在于：由小麦麦糠与营养液组成，小麦麦糠与营养液的质量比为8-12:1。2.根据权利要求1所述的黑曲霉麸曲培养基，其特征在于：所述的营养液具体原料按重量份配比为：葡萄糖10-15份，牛肉浸粉5-10份，硫酸铵3-6份，磷酸二氢钾0.5-1份，硫酸亚铁0.5-1份，硫酸锰0.2-0.5份，硫酸镁0.2-0.5份，水75份。3.如权利要求1所述的黑曲霉麸曲培养基的配制方法，其特征在于，具体步骤如下：1)按照营养液各原料重量份组成准备原料，葡萄糖10...

【专利技术属性】
技术研发人员：寇光智，李昌涛，刘春山，孔玉，王有旭，梁培森，
申请(专利权)人：日照金禾博源生化有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37