The invention belongs to the technical field of compound specificity detection, in particular to a method for specific detection of target small molecule compounds by using a microcavity biosensor. The invention firstly utilizes the principle that the hydroxyl groups on the surface of the microcavity of silica material treated by silane coupling agent and alkaline environment can be adsorbed and reacted, and fixes the active amino group or epoxy group on the surface of the microcavity; the amino group or epoxy group, protein and DNA are coupled, and the substrate is fixed in the microcavity by amino group or epoxy group. The surface of the cavity is used as a probe for specific detection; the surface of the cavity is passivated to block the unoccupied amino or epoxy binding sites on the surface of the cavity; and the target molecule is introduced for specific detection. When the target molecule and substrate combine, the effective refractive index of the optical cavity mode is changed, resulting in a red shift of the mode. And achieve high sensitivity detection. The method has the advantages of low cost, simple operation and saving material consumption.
【技术实现步骤摘要】
利用光学微腔生物传感器对化合物进行特异性检测的方法
本专利技术属于化合物特异性检测
,具体涉及利用光学微腔生物传感器对目标小分子化合物进行特异性检测的方法。
技术介绍
随着现代科学技术的发展,特别是生命科学、临床医学等新兴科学的发展,生物大分子分析、药物分析、生物活性物质分析等大量新课题不断涌现,对于分析结果的要求也越来越高,不再局限与简简单单的有什么,而是要在较短的时间内在检测物低使用量的前提下提供物质更多更全面的信息。生物传感器就是在此基础上发展的一种新型测试分析装置,它可以固定生物成分或生物活性物质作为敏感元件,能够感受特定的靶分子并且按照一定规律将这种感知转换为可识别信号。以不同种被测目标与分子识别的相互作用方式可以将生物传感器分为多个种类,其中以待分析物与识别元件特异性结合能力为基础的生物传感器已经成为当下的研究热点。光学微腔传感器作为一种新型的生物传感器,具高灵敏度、低探测极限、检测速度快等优点,已经广泛的应用于生物样品的检测,如细胞、DNA、病毒以及蛋白质。光学微腔,它们拥有独特的结构,可以形成微流通道,由于采用微流技术,在操控pL~μL量级的流体方面有独特的优势。并且当被测目标和分子识别原件特异性结合时,改变了微腔模式的有效折射率,谐振光波的中心频率发生移动,从而可以观测到被测目标和分子识别原件特异性结合信号。因此,本专利技术提出了一套完整的光学微腔生物传感器的表面修饰和特异性检测方法,该工艺可以利用不同种类的生物蛋白分子或化合物小分子作为探针,对大量的分子进行特异性的检测,并且可以利用微腔灵敏度高的优势,对低浓度的小分子进行特异性的 ...
【技术保护点】
1.一种利用光学微腔生物传感器对目标化合物进行特异性检测的方法,其特征在于,先对光学微腔生物传感器的微腔进行表面化学修饰,然后进行特异性检测;当检测探针和目标化合物发生特异性反应,使分布在微腔表面的模式有效折射率发生稳定性的变化,导致模式的中心波长发生红移,实现灵敏度高检测,具体步骤如下:(1)对光学微腔生物传感器的微腔通入碱性溶液,在微腔表面形成羟基吸附;(2)将偶联剂的酒精溶液通入微腔内,静置反应1.5‑2小时;所述偶联剂为氨丙基三甲氧基硅烷或3‑缩水甘油基氧基丙基三甲氧基硅烷;(3)将酒精、去离子水依次通入微腔内,去除未反应的偶联剂残留溶液;(4)将样品置于烘箱内,烘干;(5)取出经烘干处理后的微泡样品,通入作为检测探针的底物的溶液,孵化1.5‑2小时;(6)通入磷酸盐缓冲液溶液,冲去残留溶液;(7)通入高浓度与检测探针和目标小分子化合物都无反应的溶液,封闭残存的结合位点;(8)通入磷酸盐缓冲液溶液,冲去残留溶液;(9)通入用于特异性检测的目标小分子化合物;(10)通入磷酸盐缓冲液溶液,冲去残留溶液,观察脱附现象。
【技术特征摘要】
1.一种利用光学微腔生物传感器对目标化合物进行特异性检测的方法,其特征在于,先对光学微腔生物传感器的微腔进行表面化学修饰,然后进行特异性检测;当检测探针和目标化合物发生特异性反应,使分布在微腔表面的模式有效折射率发生稳定性的变化,导致模式的中心波长发生红移,实现灵敏度高检测,具体步骤如下:(1)对光学微腔生物传感器的微腔通入碱性溶液,在微腔表面形成羟基吸附;(2)将偶联剂的酒精溶液通入微腔内,静置反应1.5-2小时;所述偶联剂为氨丙基三甲氧基硅烷或3-缩水甘油基氧基丙基三甲氧基硅烷;(3)将酒精、去离子水依次通入微腔内,去除未反应的偶联剂残留溶液;(4)将样品置于烘箱内,烘干;(5)取出经烘干处理后的微泡样品,通入作为检测探针的底物的溶液,孵化1.5-2小时;(6)通入磷酸盐缓冲液溶液,冲去残留溶液;(7)通入高浓度与检测探针和目标小分子化合物都无反应的溶液,封闭残存的结合位点;(8)通入磷酸盐缓冲...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴翔,李子豪,王伯文,郭志和,
申请(专利权)人:复旦大学,
类型:发明
国别省市:上海,31
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