一种大黄质量评价体系的建立方法技术

一种当地大黄提取工艺和质量评价体系的建立方法，包括以下步骤：(1)超临界萃取法制备供试品：取大黄药材，粉碎后过筛，置于萃取釜内，输入夹带剂和超临界流体，萃取温度为41～49℃，压力为21～29MPa，维持70～180分钟，即得大黄提取物，(2)供试品溶液的制备：取步骤(1)所述的大黄提取物置于量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，既得供试品溶液，(3)对照品溶液的制备，(4)高效液相色谱法建立指纹图谱，(5)指纹图谱相似度评价，本发明专利技术有助于提高大黄有效成分的提取率及提取多种成分，并能健全质量评价体系，提高监测水平，提高大黄的准入质量。

A method of establishing rhubarb quality evaluation system

A method for the establishment of a local rhubarb extraction process and quality evaluation system consists of the following steps: (1) Supercritical extraction method is used to prepare rhubarb samples: extract rhubarb medicinal materials, grind them, sieve them, put them in an extraction kettle, input entrainer and supercritical fluid, the extraction temperature is 41-49 C, the pressure is 21-29 MPa, and maintain them for 70-180 minutes. Extract of Rhubarb, (2) Preparation of the test solution: Take the steps (1) The rhubarb extract is placed in a measuring bottle, add methanol to the scale, shake well, filter, take the filtrate, then get the test solution, (3) Preparation of reference solution, (4) Establishment of fingerprint by high performance liquid chromatography, (5) Evaluation of fingerprint similarity, origin. It is helpful to improve the extraction rate of effective components and extract various components of rhubarb, improve the quality evaluation system, improve the monitoring level, and improve the access quality of rhubarb.

【技术实现步骤摘要】
一种大黄质量评价体系的建立方法
专利技术涉及中药领域，具体涉及一种大黄质量评价体系的建立方法。
技术介绍
国家为了发展和改造传统中药产业，把中药产业作为国民经济发展的支柱产业，投入巨资推动中药现代化和产业化。但是中药在应用推广上受到多方面的限制，其中一个原因是中药有效成分的提取，中药化学成分十分复杂，含有多种有效成分，常用提取工艺是浸提技术，如煎煮法、浸渍法、渗漉法、回流法、水蒸气蒸馏法等，通过提取、分离、纯化，得到有效单体。这些传统的提取工艺都面对的是提取率低，而且多种有效成分提取不全的问题。另一个原因，就是缺乏公认的质量评价体系。中药具有产地来源多样、药用部位繁多、化学成分众多、基体复杂的特点。有的中药会因产地不同，效果不同。中药大黄被誉为将军，它不仅是传统中医临床处方常用的药物，而且广泛应用于保健营养食品中。全世界约有60种,我国大黄产地广，品种多，种类约占总数的2/3以上。《中国药典》现行版规定,中药正品大黄的原植物是寥科属植物掌叶大黄(RhuemPamlautmL)，唐古特大黄(RhuemRatngucticumMaxim.exRegel)和药用大黄(RhuemofficinaleBaill)的根状茎及根。大黄所含化学成分多达180种以上,其中化学结构清楚的有120多种,大黄的活性成分大体上分为蒽醌类，多糖类，鞣质。对不同道地产区大黄药材质量形成的土样因子分析得出：有机质含量、氮元素含量、速效钾含量高，微量元素齐全而含量较高，偏碱性的土壤中比较适宜大黄各类功效组分的形成和积累。但各类功效组分最佳的土壤条件又不尽一致，如全氮能够显著促进游离蒽醌类物质的形成和积累，但却对结合蒽醌类物质的形成和积累不利，对酚类物质及双蒽酮类物质的形成和积累影响不大。而有效镁对结合蒽醌类物质的形成和积累不利，却能极显著促进游离蒽醌类物质及酚类物质的形成和积累；土壤中的速效钾能够极显著促进游离蒽醌类物质的形成和积累，对结合蒽醌类物质及双蒽酮类物质影响不明显，但却抑制酚类物质的形成和积累。重庆奉节县中药材的种类和储量居重庆之首，奉节的中药材不仅种类多，种植历史长，而且是道地药材主产区，被称为“天然药库”。奉节是大黄的产地之一，以家种马蹄大黄为主，马蹄大黄是四川大黄的一种，当地大黄集中产新在10月，有些种植户甚至在8、9月也有采挖，造成药材质量参差不齐，对大黄药材的进一步有效利用形成阻碍。针对大黄的药用价值，经济价值以及产地困境，提出一种当地大黄有效成分的综合提取技术和建立质量评价体系，可有效改善目前的不利因素，通过针对大黄提取技术和质量评价方法的建立，构建可推广的中药研究思路，为进一步开发其他中药提供解决方案。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术提供了一种大黄质量评价体系的建立方法。有助于提高大黄有效成分的提取率及提取多种成分，并能健全质量评价体系，提高监测水平，提高这种当地大黄的准入质量。为实现上述目的，本专利技术采用了如下的技术方案：一种大黄质量评价体系的建立方法，包括以下步骤：(1)超临界萃取法提取大黄：取大黄药材，粉碎后过筛，置于萃取釜内，输入夹带剂和超临界流体，萃取温度为41～49℃，压力为21～29MPa，维持70～180分钟，即得大黄提取物，(2)供试品溶液的制备：取步骤(1)所述的大黄提取物置于量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，既得供试品溶液，(3)对照品溶液的制备：精密称取大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄酚对照品适量，用甲醇溶解，既得对照品溶液，(4)高效液相色谱法建立指纹图谱：将步骤(3)制备的对照品溶液、步骤(2)制备的供试品溶液，注入高效液相色谱仪进行梯度洗脱，(5)指纹图谱相似度对比：运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》确定大黄指纹图谱,利用相似度评价数据。上述质量评价体系的内容包括了提取工艺的优选和提取工艺质量评价。首先确定最佳的提取工艺，通过不断优化提取工艺，确定一种提取效率高的超临界萃取，采用超临界萃取技术综合提高大黄所含成分的提取效率，该技术具有可操作性和推广性。其次基于现在最有代表性的指纹图谱方法，通过优化过的高效液相色谱法的检查条件建立起这种当地大黄的指纹图谱，利用相似度来验证质量评价体系的可靠性。建立大黄高效液相指纹图谱，综合评价大黄提取物的整体质量，替代现在单一成分或几个成分作为质量评价的传统方法。相比于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：1、分离过程是利用超临界二氧化碳对特殊天然产物具有特殊溶解作用，利用溶解能力与其密度的关系，即利用压力和温度对超临界二氧化碳溶解能力的影响而进行的。在临界状态下，将超临界二氧化碳与待分离的物质接触，使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小不同的成分依次萃取出来。2、以高效液相色谱为分析手段，通过优化参数，建立起具有“整体性”、“模糊性”的大黄指纹图谱。3、本项目构建大黄的高效液相色谱指纹图谱就是为了从指纹图谱中获得全面的信息，对获得的信息进行科学的处理，以确保能够客观、准确、真实的反映这种当地大黄的整体质量，进而对大黄的复杂样品进行整体性的评价。附图说明图1为本专利技术的技术路线图。图2为本专利技术的对照品溶液、第一供试品、第二供试品等度洗脱的色谱图。图3为本专利技术10批当地大黄指纹图谱。具体实施方式下面对本专利技术做进一步的说明：一种大黄提取工艺和质量评价体系的建立方法，如图1所示,包括以下步骤：超临界萃取法制备供试品：取大黄药材，粉碎后过10目筛，置于萃取釜内，加入190～240ml的50％～95％乙醇为夹带剂，萃取温度为41～49℃，压力为21～29MPa，维持70～180分钟。取大黄药材，粉粹后，分别过5目筛、10目筛、15目筛，过10目筛、15目筛后的药材以提取物的干燥品计算，略高于过5目筛的药材；过10目筛和过15目筛的药材提取物的干燥品没有明显的差异，优选10目筛。根据所用萃取釜，称取过10目筛后大黄120g。大黄中最主要的成分为总蒽醌、多糖、鞣质，综合考虑各种成分的特点，超临界萃取法中的萃取温度优选41℃、45℃、49℃；萃取压力优选21MPa、25MPa、29MPa；维持时间优选70分钟、120分钟、180分钟。以总蒽醌作为评价，进一步超临界萃取法中的萃取温度最优选择为45℃；萃取压力最优选择为25MPa；维持时间最优选择为120分钟。夹带剂可选取丙酮、乙酸乙酯、正己烷、石油醚、正己烷、甲醇、乙醇等，用总蒽醌评价夹带剂的提取效果，选择甲醇、乙醇，综合考虑所有组分的提取效果，优选乙醇。夹带剂乙醇的浓度优选50％、75％、95％；乙醇的加入体积优选190ml、220ml、240ml。夹带剂乙醇的浓度最优选择75％，加入体积最优选择220ml。优化超临界萃取条件，以总蒽醌为跟踪指标，检测提取物中总蒽醌的含量，优选出的最佳提取条件。在肯定总蒽醌提取率提高的基础上，大黄所含其它成分数也相应提高，表示更多的成分被萃取出来。取大黄药材，粉碎后过10目筛，取120g，置于萃取釜内，夹带剂为220ml的75％乙醇，萃取温度为45℃，压力为25MPa，维持120分钟，即得大黄提取物。取上述大黄提取物约0.05g，至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得第一供试品溶液。溶剂提取法制备供试品：取大黄药材粉碎过65目筛，精密称定本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种大黄质量评价体系的建立方法，其特征在于包括以下步骤：(1)超临界萃取法提取大黄：取大黄药材，粉碎后过筛，置于萃取釜内，输入夹带剂和超临界流体，萃取温度为41～49℃，压力为21～29MPa，维持70～180分钟，即得大黄提取物，(2)供试品溶液的制备：取步骤(1)所述的大黄提取物置于量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，既得供试品溶液，(3)对照品溶液的制备：精密称取大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄酚对照品适量，用甲醇溶解，既得对照品溶液，(4)高效液相色谱法建立指纹图谱：将步骤(3)制备的对照品溶液、步骤(2)制备的供试品溶液，注入高效液相色谱仪进行梯度洗脱，(5)指纹图谱相似度对比：运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》确定大黄指纹图谱,利用相似度评价数据。

【技术特征摘要】
1.一种大黄质量评价体系的建立方法，其特征在于包括以下步骤：(1)超临界萃取法提取大黄：取大黄药材，粉碎后过筛，置于萃取釜内，输入夹带剂和超临界流体，萃取温度为41～49℃，压力为21～29MPa，维持70～180分钟，即得大黄提取物，(2)供试品溶液的制备：取步骤(1)所述的大黄提取物置于量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，既得供试品溶液，(3)对照品溶液的制备：精密称取大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄酚对照品适量，用甲醇溶解，既得对照品溶液，(4)高效液相色谱法建立指纹图谱：将步骤(3)制备的对照品溶液、步骤(2)制备的供试品溶液，注入高效液相色谱仪进行梯度洗脱，(5)指纹图谱相似度对比：运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》确定大黄指纹图谱,利用相似度评价数据。2.根据权利要求1所述的一种大黄质量评价体系的建立方法，其特征在于：所述步骤(1)中的超临界萃取法提取大黄，萃取温度为45℃，压力为25MPa，维持120分钟。3.根据权利要求1所述的一种大黄质量评价体系的建立方法，其特征在于：所述步骤(1)中的超临界萃取法...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾雪，杨元娟，徐颖倩，刘应杰，牛晓东，
申请(专利权)人：重庆医药高等专科学校，
类型：发明
国别省市：重庆,50