一种冬梨茶质量一致性评估的方法技术

本发明专利技术公开了一种冬梨茶质量一致性评估的方法，所述评估方法包括：制备液相供试品，分成两份，备用；将第一份液相供试品进行液相分析，得到原始色谱图A，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得第一份液相供试品的DPPH清除率Q1；在第二份液相供试品中加入DPPH醇溶液，反应后，经液相分析得到反应后色谱图B，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得加入DPPH醇溶液后的第二份液相供试品的DPPH清除率Q2；通过建立ΔX和ΔQ之间的相关性分析。利用新的分析方法能够更加准确地反映“活性物质”与其“抗氧化活性”之间的关系，完善中药质量评估体系。

A method for evaluating the quality consistency of winter pear tea

The invention discloses a method for evaluating the quality consistency of the winter pear tea, and the method includes: preparing the liquid phase supply, dividing into two parts, making the first liquid phase analysis, obtaining the original chromatogram A, calculating the peak area of the main peaks, and using the DPPH method to measure the first liquid phase supply. The DPPH clearance rate was Q1; DPPH alcohol solution was added to second liquid phase samples. After the reaction, the post reaction chromatogram B was obtained by liquid phase analysis, and the peak area of the main peaks was calculated. The DPPH clearance rate Q2 of second liquid phase samples after adding DPPH alcohol solution was obtained by DPPH method, and the correlation analysis between Delta X and delta Q was established. . The new analytical method can more accurately reflect the relationship between \active substances\ and their \antioxidant activities\, and improve the quality evaluation system of Chinese medicine.

【技术实现步骤摘要】
一种冬梨茶质量一致性评估的方法
本专利技术涉及中药材质量控制研究领域，具体地，涉及一种冬梨茶质量一致性评估的方法。
技术介绍
林檎是一种古植物，广泛分布于我国广西、湘南一带。林檎系蔷薇科、苹果属。目前国内分布的有尖嘴林檎和台湾林檎两品种。台湾林檎(Malusdoumeri(Bois)chev.)为乔木或大乔木，高可达15m，小枝圆柱形，紫褐色，幼时密被和疏被长柔毛，老时脱落，暗灰褐色，无毛；叶片长椭圆形至卵状披针形，长9-15cm，宽4-6cm，先端渐尖，基部宽楔形或近圆形，边缘有尖锐锯齿，幼时两面被毛，逐渐脱落。林檎亦称冬梨、野梨、糖栗、棠梨。林檎功效主要有止渴解暑、化滞去癖、治泻痢、下气、治霍乱肚痛、消痰、治一切冷积痞块、中气不足，似疟非疟，化一切风痰气滞。相关文献报道：台湾林檎中含有很多对人体有益的营养健康成分，例如氨基酸中的苏氨酸、蛋氨酸、和维生素中维生素E及维生素C等，以及黄酮类、多酚类、萜类、甾醇类、皂苷和有机酸等多种化学成分与及铁、铜、锌多种矿物质成分。林檎还具有防癌，抗衰老，降压，抗氧化，保肝，健齿等多种功效，同时，林檎还能提高免疫力，能对某些细菌、霉菌和酵母起到一定的抑制作用。目前，基于“谱-效”关系的中药材质量控制研究已经得到广泛认可，其从化学物质谱和生物活性检测的双重角度进行质量分析研究。而如何更加准确地体现“活性物质”和“活性”之间的关系依然值得深入研究，以开发出更加准确的评价体系。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种冬梨茶质量一致性评估的方法，解决了传统的中药指纹图谱方法的冬梨茶质量评估方法检测的成分较为单一，难以全面的对冬梨茶内的成分进行鉴别的问题。为了实现上述目的，本专利技术提供了一种冬梨茶质量一致性评估的方法，所述评估方法包括：(1)将冬梨茶和第一醇溶液混合，过滤后得到滤液，将滤液和第二醇溶液混合得到液相供试品，分成两份，备用；(2)将第一份液相供试品进行液相分析，得到原始色谱图A，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得第一份液相供试品的DPPH清除率Q1；(3)在第二份液相供试品中加入DPPH醇溶液，反应后，经液相分析得到反应后色谱图B，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得加入DPPH醇溶液后的第二份液相供试品的DPPH清除率Q2；(4)通过典型相关分析，建立ΔX和ΔQ之间的相关性；其中，ΔX表示步骤(2)中各主峰的峰面积和步骤(3)中各主峰的峰面积的差值，ΔQ表示Q1和Q2的差值。通过上述技术方案，本专利技术提供了一种冬梨茶质量一致性评估的方法，所述评估方法包括：将冬梨茶和第一醇溶液混合，过滤后得到滤液，将滤液和第二醇溶液混合得到液相供试品，分成两份，备用；将第一份液相供试品进行液相分析，得到原始色谱图A，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得第一份液相供试品的DPPH清除率Q1；在第二份液相供试品中加入DPPH醇溶液，反应后，经液相分析得到反应后色谱图B，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得加入DPPH醇溶液后的第二份液相供试品的DPPH清除率Q2；通过多元线性分析，建立ΔX和ΔQ之间的相关性；本方法通过液相供试品与DPPH反应前后的色谱峰面积变化差值与对DPPH清除率的差值进行建模分析，不仅能够发现冬梨茶中具体的活性物质，利用相关性分析能够更加准确地体现活性物质与抗氧化之间的关联，能够更加准确地定量描述活性物质与抗氧化活性之间的关系，为冬梨茶质量评估和一致性评价提供新的方法和依据。本专利技术的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。附图说明附图是用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本专利技术，但并不构成对本专利技术的限制。在附图中：图1是实施例1中反应后色谱图B；图2是实施例2中反应后色谱图B；图3是实施例3中反应后色谱图B；图4是实施例4中反应后色谱图B；图5是测试例中物质含量和活性相关性分析图；图6是测试例中活性物质对活性贡献度分析。具体实施方式以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。本专利技术提供了一种冬梨茶质量一致性评估的方法，所述评估方法包括：(1)将冬梨茶和第一醇溶液混合，过滤后得到滤液，将滤液和第二醇溶液混合得到液相供试品，分成两份，备用；(2)将第一份液相供试品进行液相分析，得到原始色谱图A，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得第一份液相供试品的DPPH清除率Q1；(3)在第二份液相供试品中加入DPPH醇溶液，反应后，经液相分析得到反应后色谱图B，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得加入DPPH醇溶液后的第二份液相供试品的DPPH清除率Q2；(4)通过典型相关分析，建立ΔX和ΔQ之间的相关性；其中，ΔX表示步骤(2)中各主峰的峰面积和步骤(3)中各主峰的峰面积的差值，ΔQ表示Q1和Q2的差值。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了准确辨别冬梨茶内相关活性物质的种类，ΔX变化显著的物质为相关活性物质，进而利用高效液相飞行时间质谱法鉴定相关活性物质的种类。这里的相关活性物质是指冬梨茶中的自由基清除剂成分，当DPPH与自由基清除剂共存时，DPPH自由基的孤电子被配对，颜色会减退，其褪色程度与自由基清除剂的清除能力及数量存在定量关系，因此，可以通过在此波长吸光度的测定来评价自由基的清除情况。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了准确测得冬梨茶样品中的相关活性物质，相对于1g冬梨茶，第一醇溶液的用量为9-11mL；相对于5mL的滤液，第二醇溶液的用量为19-21mL。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了有效提取冬梨茶中的有效成分，第一醇溶液的体积浓度为55-65％。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了有效提取冬梨茶中的有效成分，第二醇溶液的体积浓度为55-65％。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了准确测得冬梨茶样品中的相关活性物质，相对于0.1mL的第二份液相供试品，DPPH醇溶液的用量为0.18-0.22mL。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了准确测得冬梨茶样品中的相关活性物质，DPPH醇溶液由0.07-0.08mL浓度为3.75mg/mL的DPPH溶液和0.12-0.13mL醇溶液组成。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了准确测得冬梨茶样品中的相关活性物质，醇溶液选自乙醇溶液、乙二醇溶液和甲醇溶液中的一种或多种。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了使得在液相分析中出现较多的峰，使得基线相对稳定，在液相分析中，以0.1％甲酸(A)-乙腈(B)为流动相。在本专利技术的一种优选的实施方式中，为了使得在DPPH法中出现较多的峰，在DPPH法中，波长选用的范围为253-255nm。以下将通过实施例对本专利技术进行详细描述。实施例1液相供试品的配制：称取冬梨茶样品1g，加60％乙醇至10mL容量瓶中，超声30min，离心，滤过本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种冬梨茶质量一致性评估的方法，其特征在于，所述评估方法包括：(1)将冬梨茶和第一醇溶液混合，过滤后得到滤液，将滤液和第二醇溶液混合得到液相供试品，分成两份，备用；(2)将第一份液相供试品进行液相分析，得到原始色谱图A，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得第一份液相供试品的DPPH清除率Q1；(3)在第二份液相供试品中加入DPPH醇溶液，反应后，经液相分析得到反应后色谱图B，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得加入DPPH醇溶液后的第二份液相供试品的DPPH清除率Q2；(4)通过典型相关分析，建立ΔX和ΔQ之间的相关性；其中，ΔX表示步骤(2)中各主峰的峰面积和步骤(3)中各主峰的峰面积的差值，ΔQ表示Q1和Q2的差值。

【技术特征摘要】
1.一种冬梨茶质量一致性评估的方法，其特征在于，所述评估方法包括：(1)将冬梨茶和第一醇溶液混合，过滤后得到滤液，将滤液和第二醇溶液混合得到液相供试品，分成两份，备用；(2)将第一份液相供试品进行液相分析，得到原始色谱图A，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得第一份液相供试品的DPPH清除率Q1；(3)在第二份液相供试品中加入DPPH醇溶液，反应后，经液相分析得到反应后色谱图B，并计算得到各主峰的峰面积；利用DPPH法测得加入DPPH醇溶液后的第二份液相供试品的DPPH清除率Q2；(4)通过典型相关分析，建立ΔX和ΔQ之间的相关性；其中，ΔX表示步骤(2)中各主峰的峰面积和步骤(3)中各主峰的峰面积的差值，ΔQ表示Q1和Q2的差值。2.根据权利要求1所述的方法，其中，ΔX变化显著的物质为相关活性物质，利用高效液相飞行时间质谱法分析相关活性物质的种类。3.根据权利要求1或2...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄璐琦，张水寒，黄建华，周融融，
申请(专利权)人：中国中医科学院中药研究所，湖南省中医药研究院，
类型：发明
国别省市：北京,11