一种基于化学识别法的连花清瘟胶囊HPLC指纹图谱的建立方法技术

技术编号：40598040 阅读：5 留言：0更新日期：2024-03-12 22:01

本发明专利技术公开了一种基于化学识别法的连花清瘟胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，具体包括如下步骤：1)对照品溶液的制备：精密称取新绿原酸、槲皮苷、连翘苷、苦杏仁苷、大黄素、大黄酚、绿原酸、连翘酯苷A、大黄酸、甘草酸对照品，加入甲醇配制成对照品溶液；2)供试样品溶液的制备：3)色谱条件：流动相为0.1％磷酸水溶液(A)‑乙腈(B)，梯度洗脱；检测波长为207nm，柱温为30℃，流速为1.0mL·min<supgt;‑1</supgt;；4)测定：精密吸取供试样品溶液注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。本发明专利技术建立的HPLC指纹图谱有助于进一步完善连花清瘟胶囊的质量评价体系，可为连花清瘟胶囊的质量控制提供参考。

全部详细技术资料下载

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药质量控制领域，具体涉及一种基于化学识别法的连花清瘟胶囊hplc指纹图谱的建立方法。

技术介绍

1、连花清瘟胶囊处方由连翘、金银花、炒苦杏仁、鱼腥草、大黄、甘草、广藿香等十三味药材配伍组成，具有清瘟解毒，宣肺泄热的功效，临床用于治疗流行性感冒属热毒袭肺证，症见发热，恶寒等症。

2、连花清瘟胶囊的含量测定项下仅涉及君药连翘，以本品每粒含连翘以连翘苷(c27h34o11)计不得少于0.17mg作为质量评价的指标。由于连花清瘟胶囊含有多味药材，成分复杂，而连翘苷主要存在于君药连翘中，因此通过单一成分控制可能无法反应其整体质量特征。此外，在现有关于连花清瘟胶囊质量评价的文献报道中，通过应用网络药理学与分子对接技术，已证实其所含有的大黄酸、新绿原酸、绿原酸、苦杏仁苷和甘草酸等组分均具有药理作用，同时，君药连翘中所主要含有的化学组分，如连翘苷与连翘酯苷a等组分在治疗急性肺损伤等方面具有重要的药理作用。因此，需要通过多指标质量评价模式进一步优化现有的连花清瘟胶囊的质量评价方法，以期对连花清瘟胶囊进行更为全面、整体的质量评价。

3、多指标的整体质量评价模式与中药多成分、多靶点、多途径发挥疗效的特点相符，因此已成为中药质量评价方法发展的趋势。其中，中药指纹图谱在对中药多组分整体作用的充分认知基础上，通过提供具有质量代表性的特征共有峰图谱，可实现对产品质量一致性与稳定性的进一步评价。同时，借助于化学模式的识别分析方法，指纹图谱可找到引起不同批次产品间质量差异的主要标记物，可为产品的质量控制提供有价值的参考和指

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种基于化学识别法的连花清瘟胶囊hplc指纹图谱的建立方法，采用高效液相色谱-二级阵列检测器(high performanceliquid chromatography with the diode array detector,hplc-dad)法建立了连花清瘟胶囊的指纹图谱，为连花清瘟胶囊的质量评价的优化提供有益补充，并为制药厂商更好地控制连花清瘟胶囊质量均一性和稳定性提供依据，以保障患者用药的安全有效。

2、本专利技术的技术方案是这样实现的：一种基于化学识别法的连花清瘟胶囊hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，具体包括如下步骤：

3、1)对照品溶液的制备：精密称取新绿原酸、槲皮苷、连翘苷、苦杏仁苷、大黄素、大黄酚、绿原酸、连翘酯苷a、大黄酸、甘草酸对照品，加入甲醇配制成对照品溶液；

4、2)供试样品溶液的制备：取连花清瘟胶囊内容物适量，研细，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇，摇匀，称量，超声处理，冷却至室温，补足失重，摇匀，静置，过0.22μm有机相微孔滤膜，即得供试品溶液；

5、3)色谱条件：采用shimadzu lc-20at型高效液相色谱仪，色谱柱为agilentzorbax sb-c18(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为0.1％磷酸水溶液(a)-乙腈(b)，梯度洗脱为0～5min，5～7％ b；5～10min，7～8％ b；10～11min，8～9％ b；11～14min，9～12％ b；14～20min，12～20％ b；20～40min，20～32％ b；40～45min，32～45％ b；45～55min，45～60％b；55～56min，60～90％b；56～64min，90～90％ b；检测波长为207nm，柱温为30℃，流速为1.0ml·min-1；

6、4)测定：精密吸取供试样品溶液注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。

7、上述方案中：所述对照品溶液每1ml含连翘酯苷a 1.45mg、槲皮苷0.14mg、绿原酸0.13mg、连翘苷a 0.30mg、新绿原酸0.19mg、苦杏仁苷0.11mg、大黄酸0.02mg、大黄素0.03mg、大黄酚0.02mg、甘草酸0.19mg。

8、上述方案中：所述供试品溶液的含量为1g/10ml甲醇。

9、上述方案中：供试品溶液的进样量为10ul。

10、上述方案中：所得指纹图谱共有40个共有峰，其中峰12、15、16、21、26、30、35、36、38、39分别鉴定为新绿原酸、苦杏仁苷、绿原酸、连翘酯苷a、槲皮苷、连翘苷、甘草酸、大黄酸、大黄素、大黄酚，平均保留时间分别为17.7、23.2、23.4、29.8、34.8、40.7、52.9、56.6、61.8、63.9分钟。(以大黄酸为参照峰相对保留时间分别为0.312、0.410、0.413、0.527、0.615、0.720、0.935、1.000、1.092、1.129)。

11、有益效果：本专利技术结合化学模式识别法建立了连花清瘟胶囊样品的hplc指纹图谱，共确定40个共有峰，对其中10个共有峰进行了指认，样品的相似度大于0.947。相比于现有的连花清瘟胶囊指纹图谱研究，本专利技术所建立的方法确定的共有峰个数更多，所指认出的共有峰中均具有重要的药理活性，本专利技术建立的hplc指纹图谱有助于进一步完善连花清瘟胶囊的质量评价体系，可为连花清瘟胶囊的质量控制提供参考。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于化学识别法的连花清瘟胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，具体包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述基于化学识别法的连花清瘟胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述对照品溶液每1mL含连翘酯苷A1.45mg、槲皮苷0.14mg、绿原酸0.13mg、连翘苷A0.30mg、新绿原酸0.19mg、苦杏仁苷0.11mg、大黄酸0.02mg、大黄素0.03mg、大黄酚0.02mg、甘草酸0.19mg。

3.根据权利要求2所述基于化学识别法的连花清瘟胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述供试品溶液的含量为1g/10ml甲醇。

4.根据权利要求3所述基于化学识别法的连花清瘟胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：供试品溶液的进样量为10ul。

5.根据权利要求4所述基于化学识别法的连花清瘟胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：所得指纹图谱共有40个共有峰，其中峰12、15、16、21、26、30、35、36、38、39分别鉴定为新绿原酸、苦杏仁苷、绿原酸、连翘酯苷A、槲皮苷、连翘苷

...

【技术特征摘要】

1.一种基于化学识别法的连花清瘟胶囊hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，具体包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述基于化学识别法的连花清瘟胶囊hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述对照品溶液每1ml含连翘酯苷a1.45mg、槲皮苷0.14mg、绿原酸0.13mg、连翘苷a0.30mg、新绿原酸0.19mg、苦杏仁苷0.11mg、大黄酸0.02mg、大黄素0.03mg、大黄酚0.02mg、甘草酸0.19mg。

3.根据权利要求2所述基于化学识别法的连花清瘟胶囊hplc指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述供试品溶液的含量...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨林，李艳，侯媛芳，
申请(专利权)人：重庆医药高等专科学校，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载我是这个专利的主人