用于治疗癌症的具有抗趋除特性的组合物制造技术

本发明专利技术提供用于制备修饰的PBMC组合物的离体方法和组合物及其用途，所述修饰的PBMC组合物具有整体抗趋除特性，用于在用针对癌症抗原的基于抗原呈递细胞的疫苗治疗之后有效力且有效率地治疗患者中的肿瘤或癌症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗癌症的具有抗趋除特性的组合物对相关申请的交叉引用基于35U.S.C.§119(e)，本申请要求2015年9月18日提交的美国临时申请号62/220,928的优先权权益，其通过引用整体结合于此。专利技术背景在原核生物和真核生物中观察到应答于特定刺激的细胞运动。这些生物体中的细胞运动已被分为三种类型：趋化性(chemotaxis)，或细胞沿着化学品浓度增加的梯度运动；负趋化性(negativechemotaxis)，其被定义为沿着化学刺激的梯度下降的运动；和化动性(chemokinesis)，或由化学试剂诱导的细胞随机运动的增加。趋化性和化动性应答于称为趋化因子的一类蛋白质而发生在哺乳动物细胞中。另外，在哺乳动物细胞中已经观察到化学排斥物(chemorepellent)或趋除性(fugetactic)活性。例如，一些肿瘤细胞分泌足以从肿瘤部位排斥免疫细胞的趋化因子浓度，从而降低免疫系统靶向和根除肿瘤的能力。转移癌细胞可以使用类似的机制来逃避免疫系统。例如从表达高水平CXCL12或白细胞介素8(IL-8)的肿瘤排斥免疫细胞(诸如肿瘤抗原特异性T细胞)允许肿瘤细胞逃避免疫控制。CXCR4是在人类中由CXCR4基因编码的蛋白质。CXCR4由多种正常细胞表达以及在肿瘤上表达。CXCR4是对基质衍生因子-1(stromal-derived-factor-1，SDF-1，也称为CXCL12)具有特异性的α-趋化因子受体，该分子赋有对淋巴细胞有效的趋化活性。多达85％的实体瘤和白血病以足以具有趋除效应(例如，从肿瘤排斥免疫细胞)的水平表达CXCL12。经常以这种水平表达CXCL12的癌症包括但不限于前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌、胃癌、食道癌和白血病。抗趋除剂(anti-fugetacticagent)抑制肿瘤细胞的趋除活性并允许患者的免疫系统靶向肿瘤。抗趋除剂和抗趋除剂的全身递送是本领域中已知的(参见，例如，美国专利申请公开号2008/0300165，其通过引用整体结合于此)。然而，迄今为止所描述的抗趋除剂的递送将可能导致一部分抗趋除剂与肿瘤或其它部位上的CXCR4受体结合，从而使得与免疫细胞结合的抗趋除剂的有效浓度变得不可预测。前列腺癌是美国男性中最常见的非皮肤癌，并且是男性癌症死亡的第二大死因。局限性前列腺癌可以通过手术或放射疗法治愈，但是该疾病在大约30％的患者中复发。Sipuleucel-T(作为用于静脉内输注的悬浮液可商购)是由修饰的自体外周血单核细胞(PBMC)(包括抗原呈递细胞(APC))组成的活性细胞免疫疗法，所述细胞已经用重组体融合蛋白(PA2024)离体激活。PA2024由与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)(一种免疫细胞激活剂)相连的前列腺抗原前列腺酸性磷酸酶(PAP)组成。在与PAP-GM-CSF离体培养期间，APC吸收重组靶抗原并将其处理成小肽，然后将所述小肽呈现在APC表面上。在施用至患者后，修饰的细胞触发免疫系统以产生杀死任何具有PAP的细胞(即前列腺癌细胞)的T细胞。因此，仍然需要靶向肿瘤和癌症(特别是前列腺癌)的方法和组合物以有效地杀死肿瘤和/或转移癌细胞。专利技术概述令人惊讶地，目前已经发现至少一些抗趋除剂(诸如AMD3100)所赋予的抗趋除特性存在于其与T细胞上的细胞表面受体(例如CXCR4)的结合中。令人惊讶的是，已经发现这些抗趋除剂的抗趋除是浓度依赖性的。特别地，已经发现当免疫细胞遇到过高浓度的抗趋除剂时，抗趋除效应消失。因此，将阻止免疫细胞有效地穿透肿瘤或在转移性癌细胞中归巢。尽管不受理论束缚，但是已知CXCR4受体在人体内以及肿瘤上具有多个位点，并且还已知人体内的PBMC群接近或超过一万亿个细胞，在递送Sipuleucel-T后被激活的T细胞对于在不存在如本文所描述的抗趋除剂的情况下有效地根除患者中的肿瘤和/或癌细胞而言不太有效。至少部分地基于上述发现，已经发现抗趋除剂与PBMC(特别是T细胞)或任何其它具有CXCR4受体的免疫细胞的离体结合提供了改善的控制抗趋除剂与PBMC(例如经由CXCR4或结合趋除剂的其它细胞表面受体)的缔合量的能力，以提供修饰的PBMC群，该群在施用至患者时总体上保持所需的抗趋除特性。换言之，修饰的PBMC群能够克服肿瘤或癌细胞的抗趋除效应，以有效地靶向肿瘤或细胞。根据本专利技术，这种修饰的PBMC群可以通过任何合适的方法施用。在一些实施方案中，将修饰的PBMC局部施用至肿瘤或部位或癌细胞，或者施用至邻近于肿瘤或部位或癌细胞。备选地，可以全身施用修饰的PBMC群，例如通过静脉内输注。在施用修饰的PBMC之前或同时用未结合的抗趋除剂治疗患者提供了PBMC的抗趋除应答和肿瘤靶向的进一步改善。特别地，预期用未结合的抗趋除剂治疗将导致对结合输注的免疫细胞上的CXCR4的抗趋除剂的竞争更少。换言之，输注的细胞所遇到的内源性CXCR4受体的至少一部分将被抗趋除剂占据，并且因此将不可用于竞争掉与输注的细胞缔合的抗趋除剂。类似地，可以通过任何合适的方法(包括局部或全身地)施用未结合的抗趋除剂。在一个实施方案中，本专利技术涉及离体免疫细胞组合物，所述组合物包含应答于肿瘤抗原的免疫细胞(例如PBMC、T细胞等)和抗趋除剂，其中所述修饰的免疫细胞组合物具有抗趋除特性用于有效力且有效率地治疗患者中的肿瘤或癌症。优选地，免疫细胞是自体的(来源于待治疗的患者)。合适的抗趋除剂包括AMD3100(mozobil/普乐沙福(plerixafor))或其衍生物、KRH-1636、T-20、T-22、T-140、TE-14011、T-14012、TN14003、TAK-779、AK602、SCH-351125、丹宁酸、NSC651016、沙利度胺(thalidomide)、GF109230X、干扰趋除性趋化因子二聚化的抗体、或干扰趋除性趋化因子受体二聚化的抗体。在优选的实施方案中，抗趋除剂是AMD3100。在一些实施方案中，抗趋除剂与免疫细胞表面上的一种或多种受体缔合。在一个实施方案中，在一些实施方案中，细胞群或组合物包含不与细胞缔合的抗趋除剂。在一个实施方案中，免疫细胞是PBMC。在优选的实施方案中，癌症是前列腺癌。在相关实施方案中，在用诱导针对肿瘤抗原的免疫应答的疫苗或抗原呈递细胞(诸如Sipuleucel-T)治疗后，从患者获得应答于肿瘤抗原的患者免疫细胞。在优选的实施方案中，通过用融合蛋白离体温育来诱导免疫细胞应答于肿瘤抗原。在一些实施方案中，融合蛋白包含肿瘤抗原部分和免疫信号传导因子部分。肿瘤抗原部分可以包含任何肿瘤抗原或其部分，例如前列腺酸性磷酸酶(PAP)。免疫信号传导因子部分可以是激活或促进APC成熟的任何蛋白质或其部分，例如GM-CSF。在特别优选的实施方案中，融合蛋白是PA2024(Sipuleucel-T，商品名PROVENGETM)。美国专利号6,210,662中更详细地描述了PA2024，其通过引用整体结合于此。在一些实施方案中，向患者施用抗癌疫苗以在从患者移出PBMC之前促进免疫应答。相关实施方案包括药物组合物，所述组合物包含有效量的修饰的免疫细胞组合物和一种或多种药用赋形剂。在另外的实施方案中，本专利技术是治疗已经针对癌症抗原进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种离体免疫细胞组合物，所述组合物包含应答于肿瘤抗原的免疫细胞和抗趋除剂，其中所述修饰的免疫细胞组合物具有用于治疗患者中的肿瘤或癌症的抗趋除特性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.09.18 US 62/220,9281.一种离体免疫细胞组合物，所述组合物包含应答于肿瘤抗原的免疫细胞和抗趋除剂，其中所述修饰的免疫细胞组合物具有用于治疗患者中的肿瘤或癌症的抗趋除特性。2.权利要求1所述的免疫细胞组合物，其中所述免疫细胞来源于所述患者。3.根据权利要求1或2所述的免疫细胞组合物，其中所述抗趋除剂与细胞表面上的至少一种受体缔合。4.权利要求3所述的免疫细胞组合物，所述组合物还包含不与所述受体缔合的抗趋除剂。5.根据权利要求3或4所述的免疫细胞组合物，其中所述受体是CXCR4。6.根据权利要求1-5中任一项所述的免疫细胞组合物，其中所述抗趋除剂选自由以下组成的组：AMD3100或其衍生物、KRH-1636、T-20、T-22、T-140、TE-14011、T-14012、TN14003、TAK-779、AK602、SCH-351125、丹宁酸、NSC651016、沙利度胺、GF109230X、干扰趋除性趋化因子二聚化的抗体、和干扰趋除性趋化因子受体二聚化的抗体。7.根据权利要求6所述的免疫细胞组合物，其中所述抗趋除剂是AMD3100。8.根据权利要求1-7中任一项所述的免疫细胞组合物，其中所述免疫细胞是PBMC。9.根据权利要求1-8中任一项所述的免疫细胞组合物，其中所述肿瘤抗原与前列腺癌相关。10.根据权利要求1-9中任一项所述的免疫细胞组合物，其中在用诱导针对肿瘤抗原的免疫应答的疫苗或抗原呈递细胞治疗后，从所述患者获得应答于所述肿瘤抗原的患者免疫细胞。11.根据权利要求1-10中任一项所述的免疫细胞组合物，其中所述免疫细胞通过与融合蛋白温育激活。12.根据权利要求11所述的免疫细胞组合物，其中所述融合蛋白包含肿瘤抗原部分和免疫信号传导因子部分。13.根据权利要求12所述的免疫细胞组合物，其中所述融合蛋白是Sipuleucel-T。14.一种药物组合物，所述药物组合物包含有效量的修饰的免疫细胞组合物和一种或多种药用赋形剂，所述修饰的免疫细胞组合物包含从患有癌症的患者获得的自体免疫细胞和抗趋除剂，进一步其中所述免疫细胞识别肿瘤特异性抗原，其中所述修饰的自体免疫细胞组合物具有抗趋除特性，用于有效力且有效率地治疗所述患者中的肿瘤或癌症。15.根据权利要求14所述的药物组合物，其中所述抗趋除剂与所述免疫细胞表面上的一种或多种受体缔合。16.根据权利要求15所述的药物组合物，其中所述一种或多种受体包括CXCR4。17.权利要求15或16所述的药物组合物，所述组合物还包含不与所述受体缔合的抗趋除剂。18.根据权利要求14-17中任一项所述的药物组合物，其中所述抗趋除剂选自由以下组成的组：AMD3100或其衍生物、KRH-1636、T-20、T-22、T-140、TE-14011、T-14012、TN14003、TAK-779、AK602、SCH-351125、丹宁酸、NSC651016、沙利度胺、GF109230X、干扰趋除性趋化因子二聚化的抗体、和干扰趋除性趋化因子受体二聚化的抗体。19.根据权利要求18所述的药物组合物，其中所述抗趋除剂是AMD3100。20.根据权利要求14-19中任一项所述的药物组合物，其中所述免疫细胞是PBMC。21.根据权利要求14-20中任一项所述的药物组合物，其中所述癌症是前列腺癌。22.根据权利要求14-21中任一项所述的药物组合物，所述组合物还包含Sipuleucel-T。23.根据权利要求14-22中任一项所述的药物组合物，其中所述免疫细胞通过与融合蛋白温育激活。24.根据权利要求14-23中任一项所述的药物组合物，其中所述融合蛋白包含肿瘤抗原部分和免疫信号传导因子部分。25.根据权利要求24所述的药物组合物，其中所述融合蛋白是Sipuleucel-T。26.一种治疗已经针对癌症抗原进行免疫的患者中的癌症的方法，所述方法包括将有效量的抗趋除剂施用至所述患者。27.根据权利要求26所述的方法，其中所述抗趋除剂选自由以下组成的组：AMD3100或其衍生物、KRH-1636、T-20、T-22、T-140、TE-14011、T-14012、TN14003、TAK-779、AK602、SCH-351125、丹宁酸、NSC651016、沙利度胺、GF109230X、干扰趋除性趋化因子二聚化的抗体、和干扰趋除性趋化因子受体二聚化的抗体。28.根据权利要求26或27所述的方法，其中所述施用是施用至肿瘤。29.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：马克·C·波兹南斯凯，
申请(专利权)人：综合医院公司以麻省总医院名义经营，
类型：发明
国别省市：美国,US