抗肿瘤组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种药物组合物，其特征在于其包含至少一种痘病毒、编码癌细胞的至少一种特异性新抗原的裸核酸序列和抗CTLA4抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗肿瘤组合物
本专利技术涉及药物组合物，其特征在于其包含编码肿瘤的至少一种特异性新抗原的至少一种核酸序列、痘病毒和抗CTLA4抗体。本专利技术还涉及根据本专利技术的组合物用于治疗癌症的用途。
技术介绍
传统上，在肿瘤疾病的背景下，治疗包括使用化学或生物化合物(化学疗法)、辐射(放射疗法)和/或手术。虽然近年来已观察到靶向治疗特别是使用单克隆抗体或靶向特异性受体的其它分子取得了巨大进展，但仍然观察到高死亡率，并且继续设想进一步的治疗途径以便降低与这些疾病及其治疗相关联的相关死亡率和/或副作用。在设想的新治疗途径中，可特别提及基因疗法和免疫疗法。针对预先存在的癌细胞进行免疫的想法基于以下观察：癌细胞表达突变的蛋白、异常糖基化的蛋白或者在由病毒感染诱导的肿瘤的情况下表达病毒蛋白。在肿瘤内，这些蛋白的表达不诱导产生有效的免疫应答。实际上，肿瘤特别能够产生阻止启动靶向这些抗原和/或表达它们的细胞的免疫应答的微环境。此外，即使免疫应答被诱导，其由于在肿瘤中占优势的无反应性而不总是成功有效的。因此已假定，就产生的免疫应答而言更有效的是将与肿瘤细胞相关联的抗原注射到免疫系统具有活性的区域中。在与肿瘤相关联的抗原中，还可提及从引起癌化的细胞群中的突变的累积获得的肿瘤新抗原。这些突变可由例如暴露于紫外线辐射或来自烟草或其它种类的致癌物质造成。一些直接参与致癌作用，其它仅处于“乘客”状态，但是由于蛋白序列中氨基酸的变化，所有这些都有可能被免疫系统认为与自身不同并且因此具有抗原性。在癌症治疗的背景下，已根据三个主要领域使用基因疗法。第一领域包括在肿瘤部位上注射编码适用于提升免疫系统局部抑制的免疫刺激分子的基因。例如，将编码白细胞介素的基因直接注射到肿瘤中。局部白细胞介素产生被认为能够使免疫系统具有正常活性并且破坏癌细胞。然而，用这种类型的策略获得的结果已令人失望。第二研究领域包括将编码细胞毒性分子或诱导直接或间接产生细胞毒性分子的基因注射到癌细胞中。该策略被认为能够破坏肿瘤细胞并且任选地将抗原释放到体内，从而能够激活免疫系统。最后的研究领域包括使用编码与肿瘤相关联的抗原的核酸给患者接种疫苗。实际上，由患者的细胞而不是其原位注射产生抗原，使得可以设想优异的抗原呈递以更好地与癌细胞中发生的抗原呈递保持一致。然而，在这些各种治疗的背景下观察到的抗肿瘤应答不比常规治疗的背景下观察到的临床应答好得多。因此，期望具有能够长期控制肿瘤体积和提高受治疗的患者存活率的新颖的产品和/或新颖的方法。
技术实现思路
本专利技术涉及药物组合物，其特征在于其包含编码癌细胞的至少一种特异性新抗原的至少一种核酸序列、至少一种痘病毒和抗CTLA4抗体。这三种成分的特异性组合使得可以获得对由核酸序列编码的(一个或多个)新抗原靶向的免疫应答。痘病毒使得可以既增强核酸序列的转染又增强对(一个或多个)新抗原产生的免疫应答的质量。抗CTLA-4抗体还使得可以增强对(一个或多个)新抗原的免疫应答。核酸序列的使用使得可以设想快速且个性化地产生编码(一个或多个)新抗原的序列。实际上，当前的技术能够对患者的癌细胞的基因型进行完全测序，并且通过患者的组成性比较而鉴别特异性突变。如果这些突变是非同义的，则属于由肿瘤表达的编码序列，并且由于其特征而被认为是免疫原性的，则后者可用于诱导对肿瘤的免疫。肿瘤基因组中的突变和所得的新抗原是限于给定患者的肿瘤或形成该肿瘤的克隆的独特的组合。使用新抗原作为用于使患者对其自己的肿瘤细胞免疫的手段是新颖的概念。其实现因需要在短时间内生产与由给定患者的肿瘤携带的新抗原相对应的个体化药物制剂而变得复杂。迄今为止，肿瘤学的治疗性免疫已使用两种主要种类的产品。第一类包括通常通过注射给药被认为是肿瘤中存在的抗原的肽或蛋白，存在佐剂物质中的它们的整体，其使用有时引起顾虑。第二类包括给药编码抗原的核酸，该抗原被认为存在于肿瘤中但通常对应于由肿瘤优先表达的蛋白，但是该抗原不一定与非肿瘤型式不同，并且不一定符合新抗原的定义。在这两类产品中，使用基因疗法的免疫疗法，特别是基于使用病毒载体的那些免疫疗法，在肿瘤治疗中已显示出可重现的显著疗效。使用基因疗法的免疫疗法，尤其是具有病毒基础的那些免疫疗法，被免疫系统自然地感知为危险信号。它们更具免疫原性，并且原则上不需要使用佐剂。病毒成分(特别是如果其包含痘病毒)诱导先天性应答，从而促进对所表达的抗原的适应性免疫应答的发展。表达序列的基因修饰病毒的设计和药物生产在技术上是可行的选项，所述序列编码存在于患者肿瘤中的一个或多个新抗原；然而，其涉及很难普及的长期且昂贵的操作。相反，质粒或双链闭合线性核酸或编码一个或多个新抗原的其它基因表达载体的生产是最多在几周内可行的简单的、相对便宜的操作。共同注射编码一个或多个新抗原的核酸和病毒特别是痘病毒的原理，易于能够在短时间内产生对应于由患者肿瘤携带的新抗原的个性化药物制剂，同时受益于提供免疫应答发展所必需的危险信号的病毒的存在。此外，痘病毒由于其膜的磷脂成分而易于促进核酸渗透到存在于注射部位附近的细胞中，并且因此促进由核酸编码的抗原蛋白的表达。在DNA表达载体的情况下，核酸序列促进特异性传感器识别其中这些载体已渗透的细胞的细胞质中的双链DNA。该识别是促进免疫应答的生物应答的来源。因此，核酸序列和痘病毒具有互补的不同作用途径，并且使得可以获得优异的应答。痘病毒的进一步的优点在于其任选地表达除了新抗原之外的可在注射部位处表达和呈现的附加肿瘤抗原的能力。举例来说，在由该病毒诱导的肿瘤的情况下可提及HPVE6和E7蛋白，或者在腺癌的情况下可提及MUC1蛋白。抗CTLA4抗体是免疫应答的阴性检验点的抑制剂。迄今为止，它们通过全身静脉路径给药，至少在治疗恶性皮肤黑素瘤和非小细胞肺癌方面具有显著疗效，但换来不可忽视的不良作用。抗CTLA4抗体或抗体片段的共同给药易于促进由免疫疗法诱导的免疫应答，特别是基因表达载体和痘病毒的组合。为此，减少到通常全身剂量的1/20或更少的剂量被认为已足够。在这些剂量下并且在共同注射后，注射部位的引流区淋巴结中的浓度被认为高于经由全身路径的浓度，而全身浓度本身大大降低，不良作用的风险同样大大降低。在本专利技术的范围内，术语“核酸序列”是指DNA或RNA型编码核酸序列。该核酸序列不包含在病毒基因组中或封装在病毒颗粒中。根据本专利技术的一个实施例，所述核酸序列选自包含以下的组：质粒和线性DNA或RNA的载体。根据本专利技术的一个实施例，所述核酸序列是裸露的，即其不与促进其在真核细胞中渗透的分子诸如例如阳离子聚合物、病毒聚合物、脂质和/或脂质体相关联。根据本专利技术的优选的实施例，所述核酸序列是双链闭合线性核酸。此外，闭合线性核酸由于其生产方法而伴随着非常少的生产残余物，特别是细菌，这使得可以避免繁琐的纯化步骤并且使得能够更快且更便宜地使用。闭合线性核酸是本领域技术人员公知的，其结构、其功能以及能够生产其的工艺特别描述于文献CN10380337、EP2601312、GB101013153、JP12013521110、US2013216562、WO12017210、AU2010209532、CA2514130、CN102301010、DK2346431、EA021069、EA201101141、EP2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.药物组合物，其特征在于，其包含编码癌细胞的至少一种特异性新抗原的至少一种核酸序列、至少一种痘病毒类型病毒颗粒和抗CTLA4抗体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.10.08 FR 1559589;2016.09.30 FR 16594501.药物组合物，其特征在于，其包含编码癌细胞的至少一种特异性新抗原的至少一种核酸序列、至少一种痘病毒类型病毒颗粒和抗CTLA4抗体。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述核酸序列进一步包含提供真核细胞中癌细胞的所述特异性新抗原的表达的调控元件。3.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述核酸序列选自包含以下的组：质粒、闭合线性DNA载体或RNA分子。4.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述核酸序列是闭合线性核酸序列。5.根据权利要求2至权利要求4中任一项所述的组合物，其特征在于，提供与所述真核细胞中癌细胞相关联的所述(一个或多个)新抗原的所述表达的所述调控元件包含所述宿主细胞中的基因转录启动子和翻译起始区。6.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述痘病毒是非重组体或包...

【专利技术属性】
技术研发人员：让马克·利马谢，
申请(专利权)人：让马克·利马谢，
类型：发明
国别省市：法国,FR