抗植物致病组合物制造技术

本发明专利技术涉及具有抗致病活性的分离的细菌和包括其的组合物。本发明专利技术进一步涉及源自所述细菌的化合物或其类似物，和使用其治疗或减少病原体的症状的方法，所述病原体包括但不限于植物病原菌。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗植物致病组合物
本专利技术在其一些实施方式中涉及抗植物致病组合物。
技术介绍
细菌植原体暂定属(genusCa.Phytoplasma)由相对小的细菌组成，其全部是韧皮部局限的、非螺旋的和无细胞壁的植物病原体。与病毒不同，植原体具有其自身的、高度降低的代谢，但是对其存活必需的分子中的一些获取自宿主。它们代表柔膜菌纲内的单源进化枝，其当前基于多种保守基因的序列分析被分为至少15个亚群。葡萄黄化病(grapevineyellows)(GY)——最初认为是由病毒引起的病害复合体——现在已知具有植原体病原学。GY综合征的几乎相同症状由不同的植原体引起并且在葡萄藤(酿酒葡萄(Vitisvinifera))的叶、枝条和花穗(cluster)上出现。典型症状包括叶脉与叶片变色与坏死、叶向下卷曲、枝条缺乏木质化或不完全木质化、枝条萎缩(shunting)与坏死、花序败育和浆果皱缩。那些症状与筛板处的胼胝质沉积和随后的韧皮部退化相关。虽然迄今为止不知道酿酒葡萄或砧木(rootstock)的抗性栽培种，但是就症状严重性而言，多个葡萄品种相当地不同。其范围从高度易感的栽培种中的快速衰退和死亡到作为病原体的无症状携带者(carrier)的耐受性砧木。大约70％的世界葡萄生产被用于葡萄酒，其是世界上最高附加值的农业食用产品。影响葡萄酒质量的主要因素是葡萄生长的条件。病害、虫害和葡萄栽培实践极大地影响葡萄生产和质量的一致性。大部分时间，使用杀虫剂预防性地或应答性地防控病害和虫害。考虑到常规应用被证明无效，病原体——包括但不限于韧皮部局限的病原体(例如，植原体)——的防控需要新策略。
技术实现思路
本专利技术涉及具有抗致病活性的分离的细菌和包括其的组合物。本专利技术进一步涉及源自所述细菌的化合物或其类似物，和使用其治疗或减少病原体——包括但不限于植物病原菌——的症状的方法。根据一方面，提供了分离的细菌，其包括与SEQIDNO：1具有至少98％序列同一性的核酸序列，和与SEQIDNO：2-14中的任一种具有至少85％序列同一性的至少一种另外的核酸序列。根据一些实施方式，分离的细菌包括在SEQIDNO：2-14中陈述的核酸序列。根据一些实施方式，分离的细菌包括与人参土戴氏菌(Dyellaginsengisoli)具有至少10％序列变化性(sequencevariety)的核酸序列。根据另一方面，提供了组合物，其包括本专利技术的分离的细菌，和乳化剂、生长基质中的任一种或其组合。根据一些实施方式，组合物包括乳化剂，其包括选自如下的材料：非离子型表面活性剂、阴离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂或两亲型表面活性剂。根据一些实施方式，乳化剂是非离子型表面活性剂。在一个实施方式中，所述非离子型表面活性剂包括聚氧乙烯(20)失水山梨醇单月桂酸酯。根据一些实施方式，组合物包括生长基质，所述生长基质包括选择性细菌生长培养基。根据一些实施方式，所述选择性细菌生长培养基包括选自糖和氨基酸的一种或多种材料。根据一些实施方式，所述糖选自：阿拉伯糖、甘露糖、蔗糖、蜜二糖、半乳糖、肌醇、葡糖苷、和其任意组合或衍生物。根据一些实施方式，所述氨基酸选自：脯氨酸硝基苯胺、γ-L-谷氨酰对硝基苯胺、苯丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、和其任意组合。根据一些实施方式，组合物进一步包括选自如下的一种或多种化合物：喹啉甲醛(quinolinecarboxaldehyde)、和羟甲基-2-糠醛、或其任意衍生物。根据另一方面，包括组合物，其包括喹啉甲醛和羟甲基-2-糠醛、或其任意衍生物。根据一些实施方式，本专利技术的组合物进一步包括选自如下的材料：肥料、除草剂、杀虫剂、或其任意组合。根据另一方面，提供了治疗或减少病原体的症状的方法，方法包括使所述病原体与本文公开的分离的细菌或组合物接触的步骤，从而治疗或减少病原体的症状。根据一些实施方式，所述病原体是植物病原菌。根据一些实施方式，植物病原菌选自野油菜黄单胞菌(Xanthomonascampestris)、韧皮部杆菌暂定属(CandidatusLiberibacter)和植原体。根据一些实施方式，植物病原菌是植原体。在另一个示例性实施方式中，病原体是韧皮部杆菌暂定属。在另一个示例性实施方式中，病原体是野油菜黄单胞菌。根据一些实施方式，病原体是蜜蜂螺原体(Spiroplasmamelliferum)。根据一些实施方式，提供了组合物，其包括植物种子和封装所述植物种子的胶囊，其中所述胶囊包括：i.本文公开的细菌或组合物，和ii.生物相容性材料。根据一些实施方式，生物相容性材料包括粘合材料。根据一些实施方式，所述粘合材料选自：瓜尔胶、衍生的瓜尔胶、聚丙烯酰胺、聚(甲基丙烯酸)、聚(丙烯酸)、聚丙烯酸酯、聚(乙二醇)、膦酸酯-封端聚合物、聚环氧乙烷、聚(乙烯醇)、聚甘油、聚四氢呋喃、聚酰胺、淀粉、衍生的淀粉、糯玉米、高粱、糯高粱、西米、糊精、几丁质、壳聚糖、藻酸盐组合物、树胶、果胶、纤维素、或其任意组合或衍生物。根据一些实施方式。所述生物相容性材料是矿物质或包括矿物质。根据一些实施方式，组合物进一步包括粘合剂。根据一些实施方式，粘合剂选自：明胶、聚乙酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮、糊精、麦芽糊精、多糖、脂肪、油、蛋白质、虫胶、偏二氯乙烯、偏二氯乙烯共聚物、木质素磺酸钙、丙烯酸共聚物、聚丙烯酸乙烯酯、玉米蛋白、壳聚糖、聚环氧乙烷、丙烯酰亚胺聚合物、聚丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酰亚胺单体、藻酸盐、聚氯丁二烯、糖浆、或其任意组合。本专利技术的适用性的进一步实施方式和完整范围将根据下文给出的详细描述变得显而易见。然而，应当理解仅仅通过说明给出详细描述和具体实例，同时指示本专利技术的优选实施方式，这是由于根据此详细描述，本专利技术的精神和范围内的多种改变和修改将对本领域技术人员显而易见。附图说明图1图解了与0.5μg/ml土霉素(描绘为“Oxy”)的抑制相比，戴氏菌属样细菌滤过物(描绘为“D”)对蜜蜂螺原体的体外发育的抑制。图2图解了(从左到右)己烷、MBTE、氯仿、丙酮和MEOH的分级提取物(fractionextract)对螺原体生长的作用。亮培养基指示螺原体生长而较暗培养基(由“*”标记)指示螺原体抑制。图3展现了对由具有或不具有DLB的培养基获得的甲醇和丙酮分级提取物的气相色谱法-质谱法(GC-MS)分析。图4A-D使用不同的探针呈现了葡萄藤植物叶柄部分中DLB定位的FISH分析：图4A：一般细菌——显示为灰色部分；图4B：DLB——特异性的；图4C：可见光；图4D：组合的所有图像。图5A-E展现了在接种之后八周，DLB对葡萄藤小植物的影响。图5A：健康的；图5B：健康的，接种有DLB；图5C：植原体-感染的；图5D：植原体-感染的，接种有戴氏菌属。图5E描绘了在健康的(“H”)和植原体-感染的(“Phyto”)植物接种有(“+D”)和未接种有DLB之后八周，DLB对葡萄藤小植物的影响。图6A-E描绘了在接种之后八周，DLB对小长春花小植物的影响。图6A：健康的；图6B：健康的，接种有DLB；图6C：植原体-感染的；图6D：植原体-感染的，接种有DLB。图6E展现了在健康的(“H”)和植原体-感染的(“Phyto”)植物接种有(“+D”)和未接种有DLB之后八周，DLB对小长春花小植本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.分离的细菌，其包括与SEQ ID NO:1具有至少98％序列同一性的核酸序列和与SEQ ID NO:2‑14中的任一种具有至少85％序列同一性的至少一种另外的核酸序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.29 US 62/154,2461.分离的细菌，其包括与SEQIDNO:1具有至少98％序列同一性的核酸序列和与SEQIDNO:2-14中的任一种具有至少85％序列同一性的至少一种另外的核酸序列。2.权利要求1所述的分离的细菌，其包括在SEQIDNO:2-14中陈述的核酸序列。3.权利要求1所述的分离的细菌，其包括与人参土戴氏菌具有至少10％序列变化性的核酸序列。4.组合物，其包括权利要求1-3中任一项所述的细菌，和乳化剂、生长基质或其组合中的任一种。5.权利要求4所述的组合物，其中所述乳化剂包括选自如下的材料：非离子型表面活性剂、阴离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂或两亲型表面活性剂。6.权利要求4或5中任一项所述的组合物，其中所述乳化剂是非离子型表面活性剂。7.权利要求4所述的组合物，其中所述生长基质包括选择性细菌生长培养基。8.权利要求7所述的组合物，其中所述选择性细菌生长培养基包括选自糖和氨基酸的一种或多种材料。9.权利要求8所述的组合物，其中所述糖选自：阿拉伯糖、甘露糖、蔗糖、蜜二糖、半乳糖、肌醇、葡糖苷、和其任意组合或衍生物。10.权利要求8所述的组合物，其中所述氨基酸选自：脯氨酸硝基苯胺、γ-L-谷氨酰对硝基苯胺、苯丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、和其任意组合。11.权利要求4至10中任一项所述的组合物，进一步包括选自如下的一种或多种化合物：喹啉甲醛、和羟甲基-2-糠醛、或其任意衍生物。12.组合物，其包括喹啉甲醛和羟甲基-2-糠醛，或其任意衍生物。13.权利要求4至12中任一项所述的组合物，进一步包括选自如下的材料：肥料、除草剂、杀虫剂、或其任意组合。14...

【专利技术属性】
技术研发人员：E·彻睿费恩，V·纳瑞，L·艾瑟瑞克鲁赫，T·泽哈维，N·莫泽斯达彼，
申请(专利权)人：以色列农业和农村发展部农业研究组织范卡尼中心，
类型：发明
国别省市：以色列,IL