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粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用制造技术

技术编号:18313410 阅读:264 留言:0更新日期:2018-06-30 19:28
本发明专利技术公开了粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用,具体公开粪生链霉菌产生的挥发性物质能够抑制15种植物病原菌的生长,其中对荔枝霜疫霉、群结腐霉、链格孢属、小麦赤霉病菌、香蕉炭疽病菌和水稻稻瘟病菌抑制作用最强,抑制率达100%。本发明专利技术还进一步明确了粪生链霉菌产生的挥发性物质中7种具有明显抑菌作用的化合物,为今后研究荔枝霜疫霉、群结腐霉、链格孢属、香蕉炭疽病菌、水稻稻瘟病菌等植物病原菌的防治药物提供方向。

Application of volatile substances produced by Streptomyces faecalis in the control of plant diseases

The invention discloses the application of volatile substances produced by Streptomyces feces in the control of plant diseases. The volatile substances produced by Streptomyces faecalis can inhibit the growth of 15 plant pathogens, in which lychee lichee, conjera group, cyclosporin, wheat scab, banana anthrax, and rice blast are used. The inhibitory effect of the pathogen was the strongest, and the inhibition rate was 100%. The invention further clarifies 7 compounds with obvious bacteriostasis in the volatile substances produced by Streptomyces faeciae, which can be used to prevent and control the pathogen of Phytophthora litchi, conjera, anthracnose, rice blast, and so on.

【技术实现步骤摘要】
粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用
本专利技术涉及植物病害生物防治领域,尤其涉及粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用。
技术介绍
植物病害是影响农产品效益的重要因素之一,目前对植物病害的防治主要采用化学药物,但化学药物存在毒副作用强、容易残留、环境污染以及抗药性等一系列问题,化药的使用越来越受到限制。利用生防菌或其代谢产物进行植物病原菌的防治,具有周期短、低毒、无污染和便于生产等优点,是农产品绿色防控的有效途径。但是目前利用单一生防菌进行生物防治存在功能单一的局限性,还不能满足生产需求,还需分离抗菌谱更广的菌株,应用此类菌株为多种病害的高效防控提供技术支撑。
技术实现思路
本专利技术提供一种粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用,解决现有技术中的单一生防菌功能单一的问题。本专利技术采取的技术方案如下:粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用。优选的,所述植物病害为由荔枝霜疫霉、辣椒疫霉、芋疫霉、群结腐霉、链格孢属、香蕉枯萎病菌4号小种、香蕉枯萎病菌1号小种、小麦赤霉病菌、荔枝炭疽病菌、香蕉炭疽病菌、水稻稻瘟病菌、火龙果黑斑病菌、新暗色柱节孢、葡萄溃疡病菌或番木瓜疮痂病菌引起的植物病害。优选的,所述挥发性物质的制备方法为:S1:将粪生链霉菌菌株在PDA平板上划线培养7d,刮取新鲜孢子接入ISP2培养基后,置于摇床上振荡培养,然后制备孢子悬浮液,接种到小麦粒培养基上培养,得粪生链霉菌小麦粒培养物;S2:将小麦粒培养物放入小瓶中,密封放置后,萃取。优选的,所述挥发性物质的制备方法中,步骤S1为:S1:将粪生链霉菌菌株在PDA平板上划线培养7d,刮取新鲜孢子接入含有100mLISP2培养基的三角瓶内,然后置于摇床上,以200rpm、28℃振荡培养3d,制备浓度1×107个孢子/mL的孢子悬浮液,按1mL/100g的比例接种到小麦粒培养基上,摇匀后,置于25℃条件下培养21-28d,其间每3d将小麦粒培养基摇匀一次。优选的,所述挥发性物质的制备方法中,步骤S2为:S2:称取培养21-28d的粪生链霉菌小麦粒培养物放入瓶中,密封后25℃下放置12h,然后用SPME萃取头萃取。优选的,所述挥发性物质包括以下活性成分:与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:(1)粪生链霉菌产生的挥发性物质能够抑制15种植物病原菌的生长,其中对荔枝霜疫霉、群结腐霉、链格孢属、小麦赤霉病菌、香蕉炭疽病菌和水稻稻瘟病菌抑制作用最强,抑制率达100%。(2)明确了粪生链霉菌产生的挥发性物质中7种具有明显抑菌作用的化合物,为今后研究荔枝霜疫霉、群结腐霉、链格孢属、小麦赤霉病菌、香蕉炭疽病菌和水稻稻瘟病菌等植物病原菌的防治药物提供方向。附图说明图1为粪生链霉菌BWL-H1产生的挥发性物质对各植物病原菌的抑制效果图;图2为不同培养时间对粪生链霉菌BWL-H1产生挥发性物质抑菌活性影响效果图;图中a,b,c,d,e,f分别为对照和粪生链霉菌BWL-H1在小麦培养基上培养4d、7d、14d、21d、28d的培养物的处理。图3为不同培养时间对粪生链霉菌BWL-H1产生挥发性物质抑菌活性影响结果统计图。具体实施方式下面通过具体实施方式结合附图对本专利技术作进一步详细说明。本专利技术实施例所用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。本专利技术实施例所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。本专利技术所述粪生链霉菌菌株BWL-H1(StreptomycesfimicariusBWL-H1),由海南大学植物保护学院植物病害生物防治实验室分离保存,可由现有技术中的常规方法获得。本专利技术所述荔枝霜疫霉(Peronophythoralitchii)、辣椒疫霉(Phytophthoracapsici)、芋疫霉(Phytophthoracolocasiae)、群结腐霉(Pythiummyriotylum)、链格孢霉属(Alternariaalternata)、水稻稻瘟病菌(Pyriculariagrisea)、新暗色柱节孢(Neoscytalidiumdimidiatum)、葡萄溃疡病菌(Lasiodiplodiatheobromae)、小麦赤霉病菌(Fusariumgraminearum)、黄瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporumf.sp.cucumerinum)、火龙果黑斑病菌(Bipolariscactivora)、香蕉炭疽病菌(Colletotrichummusarum)、荔枝炭疽病菌(Colletotrichumgloeosporioides)、香蕉枯萎病菌4号小种(Fusariumoxysporumf.sp.cubenseRace4)、香蕉枯萎病菌1号小种(Fusariumoxysporumf.sp.cubenseRace1)、苹果轮纹病菌(Botryosphaeriaberengerianaf.sp.)、番木瓜疮痂病菌(Cladosporiumcaricinum)为海南大学植物保护学院植物病害生物防治实验室分离保存,可由现有技术中的常规方法获得。本专利技术实施例所用马铃薯葡萄糖培养基(PDA):去皮马铃薯200g,葡萄糖15g,琼脂18g,蒸馏水1000mL。酵母提取物麦芽糖培养基(ISP2):酵母膏10g,琼脂粉20g,麦芽浸粉10g,葡萄糖4g,琼脂粉20g,蒸馏水1000mL,pH7.2-7.4。小麦粒培养基:将小麦加足水煮沸至表皮开裂后过滤,晾干,分装灭菌。实施例1、粪生链霉菌BWL-H1产生挥发性物质的制备将粪生链霉菌BWL-H1菌株在PDA平板上划线培养7d,刮取新鲜孢子接入含有100mLISP2培养基的250mL三角瓶内,然后置于200rpm的摇床上28℃振荡培养3d,制备孢子悬浮液(约1×107个孢子/mL),按1mL/100g(V/W)的比例接种量接种到无菌的小麦粒培养基上。摇匀后,置于25℃条件下培养21d,其间每3d将小麦粒培养基摇匀一次,以便菌株BWL-H1均匀生长。实施例2、粪生链霉菌BWL-H1产生的挥发性物质的抑菌谱测定将供试病原菌接种到PDA培养基上,25℃恒温培养箱中培养6d然后用打孔器在菌落外缘制取菌饼,置于新鲜PDA平板中央,称取20g/L粪生链霉菌BWL-H1小麦粒培养物(制备方法参见实施例1)移入90mm培养皿中,然后将两皿底相对扣在一起,最后用封口膜将两个培养皿紧密的封在一起,做成一个双皿对扣的装置,病原菌在上,小麦培养物在下,这样既可以防止粪生链霉菌BWL-H1与病原菌接触,又能让它之间的气体充分流动,以20g/L的无菌小麦粒为对照。将双皿对扣装置放置在25℃培养箱中培养,每天观察,待各病原菌对照菌落长满培养皿时测量抑菌圈的直径,用十字交叉法测量菌落直径,计算抑制率,每个处理3个重复,实验重复3次。结果见表1和图1。菌丝生长抑制率(%)=(对照菌落直径-处理菌落直径)/对照菌落直径×100%表1:粪生链霉菌BWL-H1产生的挥发性物质的抑菌谱实验结果表明粪生链霉菌BWL-H1产生的挥发性物质能够抑制15种植物病原菌的生长,其中对荔枝霜疫霉、群结腐霉、链格孢属、小麦赤霉病菌、香蕉炭疽病菌和水稻稻瘟病菌的抑制作用最强,菌丝完全不生长,抑制率达100%。而不能完全抑制的病原菌,其菌丝本文档来自技高网...
粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用

【技术保护点】
1.粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用。

【技术特征摘要】
1.粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用。2.根据权利要求1所述粪生链霉菌产生的挥发性物质在植物病害防治中的应用,其特征在于,所述植物病害为由荔枝霜疫霉、辣椒疫霉、芋疫霉、群结腐霉、链格孢属、香蕉枯萎病菌4号小种、香蕉枯萎病菌1号小种、小麦赤霉病菌、荔枝炭疽病菌、香蕉炭疽病菌、水稻稻瘟病菌、火龙果黑斑病菌、新暗色柱节孢、葡萄溃疡病菌或番木瓜疮痂病菌引起的植物病害。3.根据权利要求1所述粪生链霉菌产生的挥发性物质的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:将粪生链霉菌菌株在PDA平板上划线培养7d,刮取新鲜孢子接入ISP2培养基后,置于摇床上振荡培养,然后制备孢子悬浮液,接种到小麦粒培养基上培养,得粪生链霉菌小麦粒培养物;S2:将小麦粒培养物放入小瓶中,密封放置后,萃取。4...

【专利技术属性】
技术研发人员:邢梦玉张荣意刘铜
申请(专利权)人:海南大学
类型:发明
国别省市:海南,46

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