MG53蛋白的医药用途制造技术

本发明专利技术涉及一种MG53蛋白的医药用途，包括重组人分泌MG53乳酸球菌用于制备预防和/或治疗炎症性肠病的药物、药物组合物、食品、保健品及食品添加剂等的应用。本发明专利技术经由活体内及体外的相关实验证实，重组人MG53蛋白对炎症性肠病，包括溃疡性结肠炎或克罗恩病，具有优异的预防和治疗且无毒副作用，可持久且有效地应用于制备预防和/或治疗炎症性肠病的药物、药物组合物、食品、保健品或食品添加剂，这些药物、药物组合物、食品、保健品或食品添加剂可用于预防和治疗炎症性肠病，具有重大应用价值。

The medical use of MG53 protein

The invention relates to a medical use of MG53 protein, including the application of recombinant human MG53 Lactococcus in the preparation of drugs, pharmaceutical compositions, food, health products and food additives for the prevention and / or treatment of inflammatory bowel disease. The present invention has proved that recombinant human MG53 protein has excellent prevention and treatment and non toxic side effects for inflammatory bowel disease, including ulcerative colitis or Crohn's disease, and can be applied to the preparation of drugs, pharmaceutical compositions, food, food, and food for the prevention and / or treatment of inflammatory bowel disease. Health products or food additives, these drugs, pharmaceutical compositions, food, health products or food additives can be used to prevent and treat inflammatory bowel disease, which is of great application value.

【技术实现步骤摘要】
MG53蛋白的医药用途
本专利技术属于生物医药领域，涉及重组人MG53蛋白在预防和/或治疗炎症性肠病中的应用。
技术介绍
炎症性肠病(InflammatoryBowelDisease，IBD)是一种慢性复发性的自身免疫性疾病，并以活动期和缓解期交替为特点，分为溃疡性结肠炎(UlcerativeColitis)和克罗恩病(Crohn'sDisease)两种类型。溃疡性结肠炎是一种慢性非特异性结肠炎症，以腹泻、腹痛和粘液脓血便为主要临床表现。克罗恩病为一种慢性肉芽肿性炎症，以腹痛、腹泻、瘘管、肛门病变和不同程度的全身症状为主要临床表现。近年来随着生活方式日益西化IBD的患病率在我国呈逐渐增加趋势。IBD的发病机制仍未完全明了，导致IBD的控制率处于较低水平，引起IBD病程迁延反复，影响患者生活质量。炎症性肠病的主要病理改变是肠粘膜广泛的急性和慢性炎症伴溃疡、糜烂和坏死，肠道粘膜的这种病理变化导致肠上皮屏障功能损害。肠上皮细胞及细胞间紧密连接和粘附连接共同构成了肠上皮屏障，其中肠上皮细胞是构成肠上皮屏障的基础。病理情况下，肠上皮细胞的坏死会导致细胞通透性增加，使得肠道病原菌、内毒素和大分子物质通过肠道屏障进入其他组织器官或循环系统中，诱导免疫炎症反应的发生，同时肠道发生炎症之后，又可以造成肠上皮细胞的进一步坏死，从而放大炎症反应，形成恶性循环，最终导致IBD迁延反复。修复肠上皮细胞的坏死是预防和治疗IBD的主要研究方向。肠上皮细胞膜破裂是肠上皮细胞坏死和肠上皮屏障破坏的主要病理基础。细胞膜修复蛋白MG53蛋白是由477个氨基酸组成的tripartitemotif的家族成员之一，其结构包含三个结构域，从N端到C端分别是锌指结构域、B-box和卷曲螺旋结构，特异性表达于心肌与骨骼肌细胞。既往研究发现，在细胞膜受到损伤后，MG53可由细胞浆向细胞膜转移，聚集于胞膜破损处，封闭胞膜缺口，修复细胞膜。在心脑肾肺损伤模型中和肌萎缩小鼠模型中给予MG53可以通过膜修复功能促进细胞的存活，达到治疗疾病的作用，但是未见在修复肠上皮细胞中的报道。另一方面，MG53蛋白结构中的E3泛素连接酶Ringfinger结构域可发挥E3泛素连接酶作用，诱导胰岛素受体1(IRS1)的泛素化，加速IRS1的衰减，从而MG53蛋白也可作为蛋白衰减中重要的调节器。但是，由于蛋白质的特殊性，给药方式受到限制，因此有必要制成可在肠道局部表达活性、无抗原性、使用安全、服用方便、便于大规模生产MG53蛋白的方法，并且可能对结肠损伤发挥更佳的治疗作用。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的之一在于提供MG53作为诊断或治疗溃疡性结肠炎的标志物的应用；本专利技术的目的之二在于提供一种重组人MG53蛋白在制备预防和/或治疗炎症性肠病的药物或保健品中的应用；本专利技术的目的之三在于提供分泌人MG53蛋白重组乳酸菌在制备防治炎症性肠病的药物或保健品中的应用；本专利技术的目的之四在于提供重组人MG53蛋白在制备修复肠上皮细胞损伤的药物或保健品中的应用。为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：1、本专利技术在溃疡性结肠炎模型中循环血液中可以检测MG53含量低于正常小鼠，结肠中MG53含量高于正常小鼠，上述结果证明MG53可以作为溃疡性结肠炎的诊断生物标记物；靶向血清MG53可以是用于在溃疡性结肠炎中治疗结肠损伤的潜在的治疗药物。因此MG53可以作为诊断或治疗溃疡性结肠炎的标志物的应用。2、本专利技术利用MG53敲除小鼠溃疡性结肠炎模型中发现，MG53敲除鼠可明显促进葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎，加重小鼠体重下降、腹泻和隐血现象，促进结肠长度缩短，降低结肠炎小鼠生存率。而重组rhMG53在治疗炎症性肠病特别是治疗溃疡性结肠炎和克罗恩病中具有显著效果。因此重组人MG53蛋白可以制备预防和/或治疗炎症性肠病的药物、组合物、保健品、食品或添加剂中的应用。优选的，所述炎症性肠病是溃疡性结肠炎。优选的，所述炎症性肠病是克罗恩病。3、重组rhMG53蛋白和分泌活性的rhMG53乳酸链球菌分别由肌肉注射或口服给药可明显抑制葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎(一种公认的溃疡性结肠炎实验动物模型)，改善小鼠体重下降、腹泻和隐血现象，抑制结肠长度缩短，提高结肠炎小鼠生存率。上述结果表明重组rhMG53对小鼠溃疡性结肠炎具有良好的改善作用，可用于溃疡性结肠炎的防治。此外，重组rhMG53蛋白和分泌活性的rhMG53乳酸链球菌尚可降低2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的小鼠结肠炎(一种公认的克罗恩病实验动物模型)，缓解体重减轻现象，升高存活率，且抑制结肠长度的缩短。上述结果表明，重组rhMG53蛋白和分泌活性的rhMG53乳酸链球菌对小鼠克罗恩病具有良好的改善作用。因此，分泌人MG53蛋白重组乳酸菌在制备防治炎症性肠病的药物、组合物、保健品、食品或添加剂中的应用。优选的，所述炎症性肠病是溃疡性结肠炎。优选的，所述炎症性肠病是克罗恩病。更优选的，所述分泌人MG53蛋白重组乳酸菌含有表达MG53基因的表达载体。更优选的，所述表达载体由MG53基因连入pNZ8148载体多克隆酶切位点处。4、重组人MG53蛋白在制备修复肠上皮细胞损伤的药物或保健品中的应用。上述重组rhMG53蛋白可与药学上可接受的载体混合，用于制备防治溃疡性结肠炎和克罗恩病的药物的各种制剂。可经口服，舌下，透皮，注射，滴注，粘膜，喷雾，输液，直肠或非肠道给药。本专利技术的有益效果在于：本专利技术公开了MG53及其重组MG53的医药用途，为炎症性肠病的诊断和治疗提供了新的途径和药物，对临床炎症性肠病监控和治疗具有重要意义。附图说明为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图进行说明：图1为溃疡性结肠炎模型小鼠血和结肠中MG53含量及定位的影响(A：溃疡性结肠炎小鼠血清中MG53影响；B：溃疡性结肠炎小鼠结肠MG53的组织定位；C：溃疡性结肠炎小鼠血清中MG53表达量)。图2为MG53敲除小鼠溃疡性结肠炎模型对体重、活动指数和生存率的影响(A：体重；B：疾病活动指数；C：存活率)。图3是重组rhMG53蛋白对溃疡性结肠炎模型，疾病活动指数，存活率的影响(A：结肠炎模型；B：疾病活动指数；C：存活率)。图4是重组rhMG53蛋白对溃疡性结肠炎模型小鼠结肠长度和病理改变的影响(A：小鼠结肠长度；B：病理改变)。图5重组rhMG53蛋白对2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的小鼠结肠炎模型体重和存活率的影响(A：体重；B：存活率)。图6分泌活性的rhMG53乳酸链球菌制备与鉴定(A：载体构建；B：PCR检测；C：Westernblot检测)。图7是分泌活性的rhMG53乳酸链球菌对溃疡性结肠炎模型存活率的影响。图8是分泌活性的rhMG53乳酸链球菌对溃疡性结肠炎模型体重存活率的影响。具体实施方式下面将结合附图，对本专利技术的优选实施例进行详细的描述。实施例1、溃疡性结肠炎模型的制备实验所有的动物由陆军军医大学大坪医院实验动物中心提供雄性C57BL/6小鼠，体重22～25g，实验过程中的手术操作符合陆军军医大学实验动物的规定。随机分为正常组、模型组，对照组饮用普通灭菌水，模型组都自由饮用4％葡聚糖硫酸钠(DSS)7天，观察小鼠体征变化。造模第8天各组小鼠眼眶采血，室温本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.MG53作为诊断或治疗溃疡性结肠炎的标志物的应用。

【技术特征摘要】
1.MG53作为诊断或治疗溃疡性结肠炎的标志物的应用。2.重组人MG53蛋白在制备预防和/或治疗炎症性肠病的药物、组合物、保健品、食品或添加剂中的应用。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述炎症性肠病是溃疡性结肠炎。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述炎症性肠病是克罗恩病。5.分泌人MG53蛋白重组乳酸菌在制备防治炎症性肠病的药物、组合物、保健品、食品或添加剂中的应用。6.根据权利要求4所述的应用，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾春雨，韩愈，杨东海，巩正藩，周中淑，麻建杰，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学第三附属医院野战外科研究所，
类型：发明
国别省市：重庆,50