一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统技术方案

一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统，所述的系统包括显微成像系统、荧光激发系统、滤光片系统一、滤光片系统二、光学装置整体移动系统、样品承载系统、数据计算系统和样品池。本发明专利技术的优点是：提高检测的准确度，样品池固定不动，杜绝以往样品池移动带来的细胞流动干扰；提高不稳定染料的染色效果，激发光斑较小，仅照射摄像头拍摄的区域，减少敏感染料被光长时间照射带来的发射光强度降低；提高检测灵敏度，激发光几乎垂直的照射在样品上，形成光强度较大的光斑，强烈激发染料，提高检测灵敏度，垂直式激发也没有以往的透射式激发存在的强大的杂光干扰问题，黑色底的检测池提供一个良好的暗色本底，有助于提高灵敏度。

A counting system for rapid counting of fluorescent dyes and dyed particles in liquid samples

A counting system for fast counting the fluorescent dye particles in a liquid sample. The system includes a microscopic imaging system, a fluorescence excitation system, a filter system one, a filter system two, a whole optical device, a sample bearing system, a data calculation system and a sample pool. The advantage of the invention is to improve the accuracy of detection, keep the sample pool fixed, eliminate the cell flow disturbance caused by the movement of the previous sample pool, improve the dyeing effect of the unstable dye, stimulate the light spot to be small, only irradiate the area taken by the camera, and reduce the light intensity of the sensitive dye being irradiated by the light for a long time. In order to improve the detection sensitivity, the stimulated luminescence is almost perpendicular to the sample, forming a light spot of light intensity, strongly stimulating the dye, improving the detection sensitivity, and the vertical excitation has no strong interference with the past transmission excitation, and the black bottom detection pool provides a good dark background. It helps to improve the sensitivity.

【技术实现步骤摘要】
一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统
本专利技术涉及一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统。
技术介绍
液体是各种反应进行的良好介质，也是生物体中各种成分分散的媒介。常见的对液体中的微粒进行计数及分类的方法有显微镜人工计数法、显微图像计算机辅助计数法、激光散射法、流式细胞法、Coulter法等等，这些方法存在着计数效率低、平行性差、区分度不佳、抗干扰能力弱、价格昂贵等等不足，难以在样品快速检验和工业过程控制等领域广泛应用。显微镜人工计数法是一种传统的、较为准确的微粒计数方法，传统显微计数法是通过人工进行计数，效率较低而且容易出现人为的错误，显微图像计算机辅助计数法虽然极大提高了效率，但是由于视野选择多为人工进行，常常出现随机差、人为错误、没有代表性等问题，影响计数的准确性。不同的荧光染料具有不同的光学特性和特异结合性质，可以利用这些特性将液体中的微粒进行荧光染色，达到快速微粒计数以及不同微粒区分计数的目的。而且荧光法具有良好的抗干扰性，样品的颜色、样品浑浊度以及外界的杂光对其测定结果影响极小。现有荧光法微粒计数法激发光多以小角度大光斑照射激发样品发光，可能导致部分荧光寿命较低或者需要较高激发光能量的染料发光强度快速衰减和发光效率较低的现象，导致计数不准、假阳性、假阴性等问题。部分仪器采用光源在样品池下部照射激发荧光，显微成像镜头在上方拍摄的设计，这样的设计虽然光路简单，但是会导致样品背景过亮，会干扰显微成像效果，导致计数不准、假阳性、假阴性等问题。常见的荧光计数法采用移动样品池的方法来获得多个计数视野，由于样品没有进行固定，样品池的移动会导致样品中微粒产生移动，导致无法准确获得微粒计数。现有方法为了应对不同折光率的样品带来的光路变化，常采用固定样品专用光路、手动调节光路或者使用昂贵的液体透镜作为光路调节器，导致使用费用较高或者操作不便。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有的荧光计数法显微成像效果不好、计数不准确、系统复杂等问题，提供一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统，该系统通过对液体样品中的微粒进行特定荧光染料染色及各组成系统的共同作用，能够实现准确高效、方便快捷的对液体样品中特定微粒进行快速计数以及快速分类计数。所述的微粒可以是生物样本中的尿液、血液、分泌物、细胞悬液和乳汁，或其他液体样品，例如微胶囊、乳化液中的具有荧光基团或能被特定荧光染料染色的微粒。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统，所述的系统包括显微成像系统、荧光激发系统、滤光片系统一、滤光片系统二、光学装置整体移动系统、样品承载系统、数据计算系统和样品池；所述的显微成像系统的输出端与数据计算系统的输入端相连，所述的显微成像系统设置在样品池正上方，显微成像系统用于拍摄样品池内的微粒；所述的荧光激发系统的荧光激发端设置在样品池的斜上方，荧光激发系统用于激发样品池内的微粒显色，所述的荧光激发系统内设置有滤光片系统一，所述的滤光片系统一用于获得所需不同波长的激发光，所述的荧光激发系统内的激发光通过光纤传输；所述的滤光片系统二设置在显微成像系统的拍摄光路上，滤光片系统二用于获取较佳的样品发射图像和防止外界杂光的干扰；所述的光学装置整体移动系统用于实现显微成像系统的水平左右移动；所述的样品承载系统用于承载样品池。本专利技术相对于现有技术的有益效果是：本专利技术能够提高检测效率，测定一个染色后的样品仅需60s；提高检测的准确度，样品池固定不动，杜绝以往样品池移动带来的细胞流动干扰，提高不稳定染料的染色效果；激发光斑较小，仅照射摄像头拍摄的区域，减少敏感染料被光长时间照射带来的发射光强度降低；使用光纤传导激发光，光路简洁，激发光可以随镜头随意移动；提高检测准确性，光源处设有滤光片，使得光源发出特定波长的光，高效率激发荧光染料，同时避免白光激发导致的多种不同激发波长染料同时发光干扰检测，光源处的滤光片设有不透光档位，便于化学发光方法的应用和系统校准，摄像头处设有滤光片，降低杂散光对计数的干扰；提高检测灵敏度，激发光几乎垂直的照射在样品上，形成光强度较大的光斑，强烈激发染料，提高检测灵敏度，垂直式激发也没有以往的透射式激发存在的强大的杂光干扰问题，黑色底的检测池提供一个良好的暗色本底，有助于提高灵敏度。附图说明图1为本专利技术系统的结构示意图；其中，1-显微成像系统、2-荧光激发系统、3-滤光片系统一、3-1-滤光片系统二、4-光学装置整体移动系统、5-样品承载系统、6-数据计算系统、7-样品池。具体实施方式下面结合附图和实施例对本专利技术的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。本专利技术通过显微成像系统对液体样品中的荧光染料染色微粒进行清晰拍摄图像；荧光激发系统以75°~85°角的488nm的光照射显微成像系统拍摄区域，激发吖啶橙染色微粒发出荧光；滤光片系统一以波长为488nm的滤光片来保证激发所需光波长，滤光片系统二以波长为580nm的滤光片来防止杂光干扰显微成像系统成像；光学装置整体移动系统将显微成像系统和荧光激发系统精密地按照设定进行移动，获取多个视野的样品图像；样品承载系统将样品以尽可能单微粒的形式分布在一个平面上便于准确计数；数据计算系统通过设定的算法（例如：腐蚀算法：把发光点都缩小成一个个小点，然后再循环计算和背景色不同的像素个数）对特定的微粒进行快速计数。本专利技术采用显微成像技术和荧光染色技术，开发了一种准确高效、方便快捷和使用费用低廉的对液体样品中特定微粒进行快速计数以及快速分类计数的系统，该系统通过对显微成像系统视野中的微粒使用化学方法进行荧光染色，使得数据计算系统内的计数芯片可以对微粒进行计数，设备通过光学装置整体移动系统移动，获得多个不同视野的微粒计数，通过数据计算系统的算法得到样品中染色微粒的数量。具体实施方式一：本实施方式记载的是一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统，如图1所示，所述的系统包括显微成像系统1、荧光激发系统2、滤光片系统一3、滤光片系统二3-1、光学装置整体移动系统4、样品承载系统5、数据计算系统6和样品池7；所述的显微成像系统1的输出端与数据计算系统6的输入端相连，所述的显微成像系统1设置在样品池7正上方，显微成像系统1用于拍摄样品池7内的微粒；所述的荧光激发系统2的荧光激发端设置在样品池7的斜上方，荧光激发系统2用于激发样品池7内的微粒显色，所述的荧光激发系统2内设置有滤光片系统一3，所述的滤光片系统一3用于获得所需不同波长的激发光，所述的荧光激发系统2内的激发光通过光纤传输；所述的滤光片系统二3-1设置在显微成像系统2的拍摄光路上，滤光片系统二3-1用于获取较佳的样品发射图像和防止外界杂光的干扰；所述的光学装置整体移动系统4用于实现显微成像系统1的左右水平移动；所述的样品承载系统5用于放置样品池7。所述的系统工作过程如下：启动电源开关，光源和摄像头自动开启，滤光片系统一3的定位（令光通过没有滤光片的1号（没有滤光片的透光位）位置经光纤传输照射在样品池7内的经过抛光本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统，其特征在于：所述的系统包括显微成像系统（1）、荧光激发系统（2）、滤光片系统一（3）、滤光片系统二（3‑1）、光学装置整体移动系统（4）、样品承载系统（5）、数据计算系统（6）和样品池（7）；所述的显微成像系统（1）的输出端与数据计算系统（6）的输入端相连，所述的显微成像系统（1）设置在样品池（7）正上方，显微成像系统（1）用于拍摄样品池（7）内的微粒；所述的荧光激发系统（2）的荧光激发端设置在样品池（7）的斜上方，荧光激发系统（2）用于激发样品池（7）内的微粒显色，所述的荧光激发系统（2）内设置有滤光片系统一（3），所述的滤光片系统一（3）用于获得所需不同波长的激发光，所述的荧光激发系统（2）内的激发光通过光纤传输；所述的滤光片系统二（3‑1）设置在显微成像系统（2）的拍摄光路上，滤光片系统二（3‑1）用于获取较佳的样品发射图像和防止外界杂光的干扰；所述的光学装置整体移动系统（4）用于实现显微成像系统（1）的左右水平移动；所述的样品承载系统（5）用于承载样品池（7）。

【技术特征摘要】
1.一种用于对液体样品中荧光染料染色微粒进行快速计数的计数系统，其特征在于：所述的系统包括显微成像系统（1）、荧光激发系统（2）、滤光片系统一（3）、滤光片系统二（3-1）、光学装置整体移动系统（4）、样品承载系统（5）、数据计算系统（6）和样品池（7）；所述的显微成像系统（1）的输出端与数据计算系统（6）的输入端相连，所述的显微成像系统（1）设置在样品池（7）正上方，显微成像系统（1）用于拍摄样品池（7）内的微粒；所述的荧光激发系统（2）的荧光激发端设置在样品池（7）的斜上方，荧光激发系统（2）用于激发样品池（7）内的微粒显色，所述的荧光激发系统（2）内设置有...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴显祺，张宏伟，
申请(专利权)人：哈尔滨索飞永诚科技有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23