一种共表达细胞因子IL-21的双特异性嵌合抗原受体、质粒、CIK细胞及MM病应用制造技术

本发明专利技术公开了一种共表达细胞因子IL‑21的双特异性嵌合抗原受体、质粒、CIK细胞及应用，共表达细胞因子IL‑21的双特异性嵌合抗原受体(MmCAR)，由CD8leader、BCMAscFv、CD8的铰链区和跨膜区、4‑1BB共刺激信号区、CD3ζ胞内信号区、T2A自剪切区、IL‑21表达区、T2A自剪切区、CD8leader、CD138scFv、CD8的铰链区和跨膜区、4‑1BB共刺激信号区、CD3ζ胞内信号区依次串联构成。本发明专利技术可以识别更多类型的肿瘤细胞，且IL‑21的分泌增加CIK细胞的增殖和效应。因此，本发明专利技术的MmCAR清除肿瘤群体更彻底，疗效更持久，降低复发及抗原标记转阴的几率。

A double specific chimeric antigen receptor, plasmid, CIK cell and MM disease expression co expressing cytokine IL-21

The invention discloses a dual specific chimeric antigen receptor, plasmids, CIK cells and applications that CO express the cytokine IL 21, and co express the dual specific chimeric antigen receptor (MmCAR) of the cytokine IL 21, the hinges and transmembrane regions of the CD8leader, BCMAscFv, CD8, the 4 1BB co stimulation signal region, the CD3 zeta intracellular signal region, and the T2A. The self shear zone, IL 21 expression area, T2A self shear zone, CD8leader, CD138scFv, CD8 hinges and transmembrane regions, the 4 1BB co stimulation signal region, and the CD3 zeta intracellular signal region are in series in series. The invention can identify more types of tumor cells, and the secretion of IL 21 enhances the proliferation and effect of CIK cells. Therefore, the MmCAR of the invention clears the tumor population more thoroughly, and has a more durable effect, reducing the probability of recurrence and antigen marking.

【技术实现步骤摘要】
一种共表达细胞因子IL-21的双特异性嵌合抗原受体、质粒、CIK细胞及MM病应用
本专利技术涉及基因
，尤其涉及一种共表达细胞因子IL-21的双特异性嵌合抗原受体、含有该受体的质粒、CIK细胞及MM病应用。
技术介绍
多发性骨髓瘤(Multiplemyeloma,MM)是以恶性浆细胞聚集骨髓并在血液或尿液中出现单克隆蛋白(M蛋白)为特征的一种恶性疾病，临床特点包括易发感染、肾功能受损、贫血、高钙血症及溶骨性病变。其发病率约占血液恶性肿瘤的13％，多发于老年人，随着我国人口老龄化，MM发病人数有增加的趋势。目前的治疗方案，已使得大多数病人的预后有了明显的改善，但患者最终仍不能幸免于难，更有部分患者对现有的治疗方案没有反应，因此仍需更有效更安全的治疗方法出现。细胞过继免疫治疗的发展，为治疗MM带来了新的治疗策略，特别是嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor，CAR)修饰的T细胞免疫治疗(CAR-T)技术的发展，为临床带来了新的治疗希望。CAR-T是一种结合T细胞免疫治疗和抗体靶向治疗的治疗手段，具有特异性识别并杀伤肿瘤细胞的能力，其突出优点是可以克服MHC限制本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种共表达细胞因子IL‑21的双特异性嵌合抗原受体，其特征在于：由CD8leader、BCMAscFv、CD8的铰链区和跨膜区、4‑1BB共刺激信号区、CD3ζ胞内信号区、T2A自剪切区、IL‑21表达区、T2A自剪切区、CD8leader、CD138scFv、CD8的铰链区和跨膜区、4‑1BB共刺激信号区、CD3ζ胞内信号区，依次串联构成。

【技术特征摘要】
1.一种共表达细胞因子IL-21的双特异性嵌合抗原受体，其特征在于：由CD8leader、BCMAscFv、CD8的铰链区和跨膜区、4-1BB共刺激信号区、CD3ζ胞内信号区、T2A自剪切区、IL-21表达区、T2A自剪切区、CD8leader、CD138scFv、CD8的铰链区和跨膜区、4-1BB共刺激信号区、CD3ζ胞内信号区，依次串联构成。2.如权利要求1所述的共表达细胞因子IL-21的双特异性嵌合抗原受体，其特征在于：所述CD8leader核酸人工序列为SEQIDNO.2；BCMAscFv核酸人工序列为SEQIDNO.3；CD8铰链区核酸人工序列为SEQIDNO.4；CD8跨膜区核酸人工序列为SEQIDNO.5；CD137共刺激区核酸人工序列为SEQIDNO.6；CD3ζ信号传导区核酸人工序列为SEQIDNO.7；T2A核酸人工序列为SEQIDNO.8；IL-21核酸人工序列为SEQIDNO.9；CD138scFv核酸人工序列为SEQIDNO.10。3.如权利要求2所述的共表达细胞因子IL-21的双特异性嵌合抗原受体，其特征在于：所述嵌合抗原受体的核酸序列为SEQIDNO.1。4.如权利要求1-3任一项所述的共表达细胞因子IL-21的双特异性嵌合抗原受体，其特征在于：采用包括如下步骤的制备方法得到：(1)分别按CD8leader核酸人工序列、BCMAscFv核酸人工序列、CD8铰链区核酸人工序列、CD8跨膜区核酸人工序列、CD137共刺激区核酸人工序列、CD3ζ信号传导区核酸人工序列、T2A核酸人工序列、IL-21核酸人工序列、T2A核酸人工序列、CD8leader核酸人工序列、CD138scFv核酸人工序列、CD8铰链区...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘明录，王立新，强邦明，冯建海，金海锋，万磊，韩国英，卢永灿，韩庆梅，刘敏，张传鹏，
申请(专利权)人：山东兴瑞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37