含透明质酸衍生物和DNA片段的注射用透明质酸组合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种注射用透明质酸组合物，其中，交联的粘弹性透明质酸凝胶包含DNA片段。更具体而言，本发明专利技术涉及一种注射用透明质酸组合物，该组合物含有通过透明质酸在碱性下交联而获得的交联度为0.1～200％的透明质酸组合物，且透明质酸组合物与0.1～50wt％的DNA片段混合。DNA片段选自例如多核苷酸(PN)和多脱氧核糖核苷酸(PDRN)。用于美容或治疗目的的组合物具有改善的粘弹性流动特性和酶抗性。

Hyaluronic acid composition containing hyaluronic acid derivative and DNA fragment for injection and its application

The invention relates to a hyaluronic acid composition for injection, wherein the cross-linked viscoelastic hyaluronic acid gel contains a DNA fragment. More specifically, the invention relates to a hyaluronic acid composition for injection, which contains hyaluronic acid composition from 0.1 to 200% by crosslinking of hyaluronic acid in alkaline solution, and hyaluronic acid composition is mixed with a DNA fragment of 0.1 ~ 50wt%. DNA fragments are selected from polynucleotides (PN) and PDRN. The compositions used for cosmetic or therapeutic purposes have improved viscoelastic flow characteristics and enzyme resistance.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含透明质酸衍生物和DNA片段的注射用透明质酸组合物及其应用
本专利技术涉及一种用于美容或治疗用途的注射用透明质酸组合物，其包含交联的粘弹性透明质酸衍生物和DNA片段。更具体而言，本专利技术涉及一种注射用透明质酸组合物，其包含具有特定的交联度范围的透明质酸衍生物和DNA片段。
技术介绍
基于透明质酸的注射用凝胶多年来用于美容目的、填充或替换生物组织(例如填充皱纹、重塑面部、增大唇部体积等)以及经中胚层疗法进行皮肤再水化的治疗。在这方面，为了增加凝胶的体内持续时间(即凝胶在注射位置的停留时间)并由此增加治疗效力的持续时间，已经做出了许多努力来改善基于透明质酸的凝胶的物理化学稳定性。通常，DNA片段由生物聚合物(诸如磷酸脂类)、四种碱基和脱氧核糖组成。含有这些成分的组合物是细胞的必需成分，并且用于各种目的，诸如通过将这些片段注射到伤口部位等进行的治疗并改善伤口部位的药物，以及改善与细胞活性相关的皱纹的化妆品。DNA注射剂是指含有生物材料诸如多核苷酸(PN)或多脱氧核糖核苷酸(PDRN)的注射剂。DNA片段通过促进作为胞间成分的胞外基质(ECM)的形成，活化人体中的皮肤愈合能力，从而恢复皮肤的老化和萎缩的再生能力，改善皮肤的功能。虽然已经开发了各种填充剂产品，但已知迄今为止还没有具有皮肤再生效果的功能性透明质酸-DNA复合填充剂产品。此外，在传统的透明质酸填充剂产品中，将透明质酸衍生物与非交联的透明质酸混合，以在手术期间获得良好的感觉。然而，存在着未交联的透明质酸容易通过酶反应而降解的缺点。在这些情况下，本专利技术人致力于开发功能性透明质酸-DNA复合填充剂产品。结果，本专利技术人已制得一种通过以特定比例将DNA片段混合到交联的透明质酸组合物而具有改善的物理性质(粘弹性和挤出力)且具有透明质酸酶抗性的注射用透明质酸组合物。
技术实现思路
【技术课题】因此，作为现有技术问题的解决方案，本专利技术的目的在于提供一种通过将DNA片段与交联的透明质酸混合而具有优异的粘弹性和挤出力且具有酶抗性(enzymeresistance)的注射用透明质酸组合物及其制备方法。【专利技术的效果】根据本专利技术的注射用透明质酸组合物及其制备方法，可以提供具有优异的弹性特性和挤出力且具有酶抗性的注射用透明质酸组合物，从而能够有助于美容或治疗目的。附图说明图1a～图1i示出了使用流变仪的每种频率的实施例1～5和比较例1～4的储能模量(G’)、损耗模量(G”)、Tan(δ)、复数粘度(G)的结果。每幅图分别是以下例子的结果。图1a：比较例1；图1b：比较例2；图1c：比较例3；图1d：比较例4；图1e：实施例1；图1f：实施例2；图1g：实施例3；图1h：实施例4；图1i：实施例5。图2a和图2b是表示用于确认根据本专利技术注射用透明质酸组合物的预填充注射器中的挤出力的吐出载荷试验(dischargeloadtest)结果的曲线图。图3示出了根据本专利技术的注射用透明质酸组合物中PDRN片段的电泳结果。图4a～图4d表示了通过混合DNA片段进行的交联的透明质酸的粒径分析图。图5示出了由于透明质酸酶降解透明质酸所引起的透明质酸的粘度随时间的变化。图6a～图6i是使用流变仪进行的实施例与比较例的流变特性比较的曲线图。每幅图分别是以下例子的结果。图6a：实施例7；图6b：实施例8；图6c：实施例9；图6d：实施例10；图6e：实施例11；图6f：实施例12；图6g：实施例13；图6h：实施例14；图6i：实施例15。具体实施方式在本专利技术的实现这些目的的一个实施方式中，本专利技术涉及一种注射用透明质酸组合物，其包含交联度为0.1～200％的透明质酸衍生物以及占总组合物的0.1～50wt％的DNA片段。本文所用的术语“透明质酸”是指由成线性连接的重复单元N-乙酰-D-葡糖胺和D-葡糖醛酸组成的生物聚合物材料。在本专利技术中，透明质酸用于包括透明质酸本身、其盐或其组合。透明质酸盐的实例包括但不限于：无机盐，诸如透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸钙、透明质酸镁、透明质酸锌和透明质酸钴；以及有机盐，诸如透明质酸四丁铵。在本专利技术中，可以单独使用透明质酸本身或其盐，或者可以使用两种或更多种透明质酸或其盐的组合。在本专利技术中，透明质酸的分子量可以为100,000～5,000,000Da。此外，交联的透明质酸衍生物可以通过使用交联剂使透明质酸本身或其盐交联来制备。为了交联，能够使用在碱性水溶液中使用交联剂的方法。碱性水溶液包括但不限于NaOH、KOH，优选NaOH水溶液。NaOH水溶液可以以0.25～5N的浓度使用。交联的透明质酸衍生物可以是在0.02～1Hz的频率下Tanδ为0.01～2.0并且在25℃下复数粘度为10Pa.s(1Hz)的粘弹性的交联的透明质酸。交联剂可以是含有两种或更多种环氧官能团的化合物。其优选的实例包括：1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)、乙二醇二缩水甘油醚(EGDGE)、1,6-己二醇二缩水甘油醚、丙二醇二缩水甘油醚、聚丙二醇二缩水甘油醚、聚四亚甲基二醇二缩水甘油醚(polytetramethyleneglycoldiglycidylether)、新戊二醇二缩水甘油醚、聚甘油聚缩水甘油醚、二甘油聚缩水甘油醚、甘油聚缩水甘油醚、三甲基丙烷聚缩水甘油醚、1,2-(双(2,3-环氧丙氧基)乙烯(1,2-(bis(2,3-epoxypropoxy)ethylene)、季戊四醇聚缩水甘油醚和山梨糖醇聚缩水甘油醚。1,4-丁二醇缩水甘油醚是特别优选的。本文所用的术语“交联度”定义为交联剂与基于透明质酸的组合物的交联部分中的透明质酸单体单元的重量比(wt％)。交联度被测量为交联剂与透明质酸单体的重量比。在本专利技术中，通过与交联剂交联，透明质酸的交联度优选为0.1～200％，并且更优选为1～50％。此外，根据本专利技术的注射用组合物包含表现一定交联度的透明质酸衍生物和DNA片段。在本专利技术中，DNA片段可以选自例如但不限于多核苷酸(PN)或多脱氧核糖核苷酸(PDRN)。在优选的实施方式中，DNA片段相对于组合物的总体积的浓度为0.01～20mg/ml，并且相对于总组合物在注射用组合物中所含的比例优选为0.1～50wt％，更优选为5～30wt％。此外，本专利技术中的交联的透明质酸衍生物与DNA片段的混合比优选为交联的透明质酸衍生物:DNA片段＝5.0～9.99:0.01～5.0，更优选为7.0～9.5:0.5～3.0的重量比。此外，在另一个实施方式中，本专利技术涉及一种注射用透明质酸组合物的制备方法。注射用组合物的制备方法包括以下步骤：a)通过使用交联剂使透明质酸或其盐在碱性水溶液中交联来制备交联度为0.1～200％的透明质酸衍生物；以及b)将DNA片段与步骤a)中制备的交联度为0.1～200％的透明质酸衍生物混合。步骤a)中的透明质酸衍生物的制备优选通过以下方式进行：将基于NaOH水溶液占1～25wt％的透明质酸或其盐添加到0.25～5N的碱性水溶液中，并且将基于透明质酸或其盐的重复单元的交联度为0.1～200％、优选1～50％的交联剂与透明质酸及其盐均匀混合。在一个实施方式中，该步骤中透明质酸与交联剂的交联反应在10～60℃下，更优选在20～50℃下，最优选在25～40℃下进行。在一个优选实施方式中，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种注射用透明质酸组合物，其包含交联度为0.1～200％的透明质酸衍生物以及基于总组合物占0.1～50wt％的DNA片段。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.24 KR 10-2015-01649321.一种注射用透明质酸组合物，其包含交联度为0.1～200％的透明质酸衍生物以及基于总组合物占0.1～50wt％的DNA片段。2.根据权利要求1所述的注射用透明质酸组合物，其中，所述DNA片段的浓度为0.001～40mg/ml。3.根据权利要求1所述的注射用透明质酸组合物，其中，所述透明质酸衍生物的浓度为1～50mg/ml。4.根据权利要求1所述的注射用透明质酸组合物，其中，所述透明质酸衍生物的分子量为100,000～5,000,000Da。5.根据权利要求1所述的注射用透明质酸组合物，其中，所述DNA片段选自由多核苷酸(PN)和多脱氧核糖核苷酸(PDRN)组成的组。6.根据权利要求1所述的注射用透明质酸组合物，其中，所述交联的透明质酸衍生物:所述DNA片段的重量比为5.0～9.99:0.01～5.0。7.一种权利要求1～6中任一项所述的透明质酸注射用组合物的制备方法，包括：a)通过使用交联剂使透明质酸或其盐在碱性水溶液中交联来制备交联度为0.1～200％的透明质酸衍生物；以及b)将DNA片段与步骤a)中制备的交联度为0.1～200％的透明质酸衍生物混合。8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述碱性水溶液为NaOH水溶液。9.根据权利要求8所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：金珉庆，禹具，白永俊，李星熙，闵庚右，
申请(专利权)人：株式会社BMI韩国，
类型：发明
国别省市：韩国,KR