一种同时测定心可舒片中多种成分的含量的方法技术

本发明专利技术属于中药质量控制领域，涉及一种同时测定心可舒片中多种成分的含量的方法。具体而言，该方法包括以下步骤：1)利用心可舒片配制供试品溶液；2)利用7种指标性成分(丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B、熊果酸、金丝桃苷、木香烃内酯和葛根素)对照品分别配制对照品溶液；3)设置UPLC检测条件；和4)测定。利用该方法能够同时测定7种指标性成分的含量，方法简便、快速及准确，解决了现有技术无法同时测定多种成分的缺陷；出峰时间更短，节约了测定时间，提高了工作效率，特别适用于在线质量控制与检测；减少了有毒溶剂的使用量，更有利于环保；可以提高制剂的安全性、有效性及可控性，从而确保制剂的临床疗效和患者的身体健康。

A method for simultaneous determination of the contents of various components in Xin Ke Shu tablets

The invention belongs to the field of quality control of Chinese medicine, and relates to a method for simultaneously determining the content of various components in Xin Ke Shu tablet. In particular, the method includes the following steps: 1) make use of Xin Shu tablet to prepare the sample solution; 2) use 7 index components (Danshensu Sodium, Protocatechualdehyde, salvianolic acid B, ursolic acid, Hyperoside, aromatic hydrocarbon and Ge Gensu) as control products respectively; 3) set up UPLC detection conditions; and 4). The method can be used to determine the content of 7 index components at the same time. The method is simple, fast and accurate. It solves the defect that the existing technology can not determine the various components at the same time. The peak time is shorter, the measuring time is reduced, the working efficiency is improved, and it is especially suitable for the on-line quality control and detection, and the toxic solvent is reduced. The dosage is more conducive to environmental protection, and can improve the safety, efficacy and controllability of the preparation, thus ensuring the clinical efficacy of the preparation and the health of the patient.

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定心可舒片中多种成分的含量的方法
本专利技术属于中药质量控制领域，涉及一种同时测定心可舒片中多种成分的含量的方法，同时测定了心可舒片中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B、熊果酸、金丝桃苷、木香烃内酯和葛根素的含量。
技术介绍
心可舒片为山东沃华医药科技股份有限公司独家产品，由丹参(以丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B作为指标性成分)、三七(以熊果酸作为指标性成分)、山楂(以金丝桃苷等作为指标性成分)、葛根(以葛根素作为指标性成分)、木香(以木香烃内酯作为指标性成分)5味中药组成，具有活血化瘀、行气止痛的功效，用于气滞血瘀引起的胸痹、胸痛、胸闷、气短、心悸等，也可用于冠心病、心绞痛、高脂血症、脑动脉硬化、中风及中风后遗症等症状，疗效良好，现已广泛应用于临床。目前，心可舒制剂的质量控制较为简单，主要采用薄层色谱法对其中的化合物进行鉴别，也有采用高效液相色谱法(HPLC)对少数几个化合物进行含量测定。然而，现有方法大多比较简单、粗糙，不能全面反映该复方制剂的质量情况。
技术实现思路
为了提高心可舒片中指标性成分鉴别及其含量测定的准确性，更好地反映复方制剂的整体质量情况，本专利技术旨在提供一种同时测定心可舒片中多达7种成分的含量的方法。具体而言，本专利技术采用如下技术方案：一种同时测定心可舒片中多种成分的含量的方法，其包括下列步骤：1)供试品溶液的配制：取心可舒片，粉碎成细粉，取0.1g，精密称定，置10mL具塞量瓶中，精密加入70％v/v甲醇水溶液5mL，密塞，称定具塞量瓶的重量，超声处理20min，取出，放冷，再称定具塞量瓶的重量，两次称定的重量差值用70％v/v甲醇水溶液补足，离心10min，取上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤，得到供试品溶液；2)对照品溶液的配制：取丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、丹酚酸B对照品、熊果酸对照品、金丝桃苷对照品、木香烃内酯对照品和葛根素对照品适量，精密称定，分别加入70％v/v甲醇水溶液，制成1mL溶液中含50μg丹参素钠、20μg原儿茶醛、100μg丹酚酸B、200μg熊果酸、100μg金丝桃苷、20μg木香烃内酯和150μg葛根素的7种对照品溶液；3)UPLC检测条件的设置：以十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)为固定相；以乙腈为流动相A，以0.5％v/v甲酸水溶液为流动相B，并采用下列梯度洗脱方式：0～3min，流动相A的体积百分比为10％～19％，流动相B的体积百分比为90％～81％；3～7min，流动相A的体积百分比为19％～28％，流动相B的体积百分比为81％～72％；7～10min，流动相A的体积百分比为28％～50％，流动相B的体积百分比为72％～50％；10～13min，流动相A的体积百分比为50％～75％，流动相B的体积百分比为50％～25％；13～16min，流动相A的体积百分比为75％～90％，流动相B的体积百分比为25％～10％；流速为0.1～0.5mL/min；柱温为30℃；检测波长采用下列变化方式：0～1.5min，检测波长为340nm；1.5～13min，检测波长为287nm；13～16min，检测波长为225nm；4)测定：精密吸取7种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入超高效液相色谱仪，分别测定各种成分的含量。在上述方法中，所述心可舒片中的原料药为由以重量份计的下列成分组成的中药组合物：葛根10～20份、山楂10～20份、丹参10～20份、三七0.5～2份和木香0.5～2份。优选的，所述心可舒片中的原料药为由以重量份计的下列成分组成的中药组合物：葛根15份、山楂15份、丹参15份、三七1份和木香1份。为了验证上述方法的稳定性、精密度、重复性、线性范围等因素，本专利技术进行了含量测定方法学验证试验。经验证，本专利技术的方法能够作为心可舒片的质量控制方法。与现有技术相比，采用上述技术方案的本专利技术具有下列优点：1)本专利技术的方法采用超高效液相色谱法(UPLC)及可变波长检测法同时对心可舒片中的丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B、熊果酸、金丝桃苷、木香烃内酯和葛根素7种成分进行了含量测定，方法简便、快速及准确，解决了现有技术无法同时测定多种成分的缺陷；2)本专利技术的方法具有更高的灵敏度，更高的理论塔板数，更好的分离效果，使得7种成分均能够在各自的最大吸收波长下出峰，从而使分析效果达到最佳；3)本专利技术的方法的出峰时间更短，极大地节约了测定时间，提高了工作效率，特别适用于在线质量控制与检测；4)同时，本专利技术的方法减少了有毒溶剂的使用量，更有利于环保；5)通过本专利技术的方法建立的心可舒片多成分含量测定方法，可以提高制剂的安全性、有效性及可控性，从而确保制剂的临床疗效，保障患者的身体健康。附图说明图1是流动相系统为甲醇/水的供试品溶液的色谱图。图2是流动相系统为甲醇/0.05％v/v磷酸水溶液的供试品溶液的色谱图。图3是流动相系统为乙腈/水的供试品溶液的色谱图。图4是流动相系统为乙腈/0.05％v/v磷酸水溶液的供试品溶液的色谱图。图5是流动相系统为乙腈/0.1％v/v甲酸水溶液的供试品溶液的色谱图。图6是流动相系统为乙腈/0.5％v/v甲酸水溶液的供试品溶液的色谱图。图7是流动相系统为乙腈/0.1％v/v三氟乙酸水溶液的供试品溶液的色谱图。图8是检测波长为287nm的供试品溶液的色谱图。图9是检测波长为225nm的供试品溶液的色谱图。图10是检测波长为340nm的供试品溶液的色谱图。图11是利用本专利技术中的方法测定的心可舒片中7种指标性成分的色谱图。图12是对照品1(熊果酸)的色谱图。图13是对照品2(丹参素钠)的色谱图。图14是对照品3(原儿茶醛)的色谱图。图15是对照品4(金丝桃苷)的色谱图。图16是对照品5(葛根素)的色谱图。图17是对照品6(丹酚酸B)的色谱图。图18是对照品7(木香烃内酯)的色谱图。图19是10批心可舒片待测样品的色谱图。具体实施方式下面将结合附图以及具体的实施例对本专利技术的技术方案做出进一步的阐述。除另有说明以外，下列实施例中所使用的材料、试剂、仪器等均可通过常规商业手段获得。实验例：同时测定心可舒片中7种指标性成分的含量。1、仪器、试剂和样品：1.1仪器：ACQUITYUPLCH-CLASS型超高效液相色谱仪(美国Waters公司)，C181.7μm1.0×50mmCOL色谱柱(美国Waters公司)，二极管阵列检测器(DAD)，EmpowerMassLynx色谱工作站；METTLERAE240型电子天秤(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)；KQ-250E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；SENCOW2018型恒温水浴锅(上海申生科技有限公司)；IKARV05基本型1-B旋转蒸发仪(德国IKA集团)；SHB-3A型循环水多用真空泵(上海亚荣生化仪器厂)；SZ-93自动双重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)。1.2试剂：甲醇(色谱纯，美国Tedia试剂公司)；乙腈(色谱纯，美国Tedia试剂公司)；水(二次蒸馏水)；其他试剂(分析纯，国产)。1.3样品：丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、丹酚酸B对照品、熊果酸对照品、金丝桃苷对照品、木香烃内酯对照品和葛根素对照品，均由中国食品药品检定研究院提供；心可舒片，由山东沃华医药科技股份有限公司提供。2、方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时测定心可舒片中多种成分的含量的方法，其包括下列步骤：1)供试品溶液的配制：取心可舒片，粉碎成细粉，取0.1g，精密称定，置10mL具塞量瓶中，精密加入70％v/v甲醇水溶液5mL，密塞，称定具塞量瓶的重量，超声处理20min，取出，放冷，再称定具塞量瓶的重量，两次称定的重量差值用70％v/v甲醇水溶液补足，离心10min，取上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤，得到供试品溶液；2)对照品溶液的配制：取丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、丹酚酸B对照品、熊果酸对照品、金丝桃苷对照品、木香烃内酯对照品和葛根素对照品适量，精密称定，分别加入70％v/v甲醇水溶液，制成1mL溶液中含50μg丹参素钠、20μg原儿茶醛、100μg丹酚酸B、200μg熊果酸、100μg金丝桃苷、20μg木香烃内酯和150μg葛根素的7种对照品溶液；3)UPLC检测条件的设置：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；以乙腈为流动相A，以0.5％v/v甲酸水溶液为流动相B，并采用下列梯度洗脱方式：0～3min，流动相A的体积百分比为10％～19％，流动相B的体积百分比为90％～81％；3～7min，流动相A的体积百分比为19％～28％，流动相B的体积百分比为81％～72％；7～10min，流动相A的体积百分比为28％～50％，流动相B的体积百分比为72％～50％；10～13min，流动相A的体积百分比为50％～75％，流动相B的体积百分比为50％～25％；13～16min，流动相A的体积百分比为75％～90％，流动相B的体积百分比为25％～10％；流速为0.1～0.5mL/min；柱温为30℃；检测波长采用下列变化方式：0～1.5min，检测波长为340nm；1.5～13min，检测波长为287nm；13～16min，检测波长为225nm；4)测定：精密吸取7种对照品溶液与供试品溶液各5μL，注入超高效液相色谱仪，分别测定各种成分的含量。...

【技术特征摘要】
1.一种同时测定心可舒片中多种成分的含量的方法，其包括下列步骤：1)供试品溶液的配制：取心可舒片，粉碎成细粉，取0.1g，精密称定，置10mL具塞量瓶中，精密加入70％v/v甲醇水溶液5mL，密塞，称定具塞量瓶的重量，超声处理20min，取出，放冷，再称定具塞量瓶的重量，两次称定的重量差值用70％v/v甲醇水溶液补足，离心10min，取上清液，经0.45μm微孔滤膜过滤，得到供试品溶液；2)对照品溶液的配制：取丹参素钠对照品、原儿茶醛对照品、丹酚酸B对照品、熊果酸对照品、金丝桃苷对照品、木香烃内酯对照品和葛根素对照品适量，精密称定，分别加入70％v/v甲醇水溶液，制成1mL溶液中含50μg丹参素钠、20μg原儿茶醛、100μg丹酚酸B、200μg熊果酸、100μg金丝桃苷、20μg木香烃内酯和150μg葛根素的7种对照品溶液；3)UPLC检测条件的设置：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；以乙腈为流动相A，以0.5％v/v甲酸水溶液为流动相B，并采用下列梯度洗脱方式：0～3min，流动相A的体积百分比为10％～19％，流动相B的体积百分比为90％～81％；3～7min，流动相A的体积...

【专利技术属性】
技术研发人员：周万辉，曾英姿，王冬梅，于洪亮，赵磊，
申请(专利权)人：山东沃华医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37