辅助骨髓纤维症的状态的诊断的方法、辅助预后的预测的方法、及治疗效果的监测方法、以及在这些方法中使用的标志物及装置制造方法及图纸

本发明专利技术涉及辅助骨髓纤维症(MF)的状态的诊断的方法、辅助MF的预后预测的方法、及MF的治疗效果的监测方法。另外，本发明专利技术涉及用于执行这些方法的装置。再者，本发明专利技术涉及骨髓纤维化状态的判断用标志物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】辅助骨髓纤维症的状态的诊断的方法、辅助预后的预测的方法、及治疗效果的监测方法、以及在这些方法中使用的标志物及装置
本专利技术涉及辅助骨髓纤维症(myelofibrosis：MF)的状态的诊断的方法、辅助MF的预后预测的方法、及MF的治疗效果的监测方法。另外，本专利技术涉及用于执行这些方法的装置。再者，本专利技术涉及骨髓纤维化状态的判断用标志物。
技术介绍
骨髓纤维症是骨髓增殖性肿瘤的一种，是在骨髓中发生广泛的纤维化的疾病。骨髓纤维化的结果，变得在骨髓以外的场所、特别是在脾脏造血，从而发生脾肿大。骨髓纤维症分类为原因不明的原发性骨髓纤维症和继基础疾病而续发的二次性骨髓纤维症的2种。在原发性骨髓纤维症中，由从异常增殖的巨核细胞分泌的各种细胞因子的刺激，成纤维细胞增殖而产生网状纤维或胶原纤维，骨髓的纤维化发展。二次性骨髓纤维症从真性多血症、原发性血小板血症等的造血器肿瘤迁移的情况多，病态与原发性骨髓纤维症相同。在骨髓纤维症的诊断中，通过将从患者采集的骨髓用显微镜观察(骨髓活体检查)而确认骨髓的纤维化。纤维化的状态基于作为WHO采用的半定量评价基准的“Europeanconsensusongradingofbonemarrowfibrosis”而评价。在此基准中，纤维化的状态分类为MF-0、MF-1、MF-2及MF-3的4个等级。由于骨髓纤维化与病期并行进行，得知可由骨髓纤维化的状态预测患者的预后。例如，在非专利文献1中，通过将骨髓纤维化的状态用上述的基准分类，预测初期的骨髓纤维症患者的预后。提示骨髓纤维症的发病与调节细胞因子的信号传递的被称为Janus激酶(JAK)的激酶的基因变异相关。在原发性骨髓纤维症中，有报告称在约半数的患者中确认到JAK2基因的变异。另外，在专利文献1中公开了基于受试者的JAK2基因的指定的变异的存在或不在的测定而进行骨髓增殖性疾病的诊断或预后判断的方法。【现有技术文献】【专利文献】专利文献1：国际公开第2010/051214号单行本【非专利文献】非专利文献1：GianelliU.等,ModernPathology,vol.25,p.1193-1202,2012
技术实现思路
【专利技术要解决的技术课题】骨髓纤维化的状态是掌握骨髓纤维症发展至何程度，在进行治疗时对于确认其效果必要的信息。另外，骨髓纤维化的状态是对于患者的预后预测也有用的信息。一方面，在专利文献1记载的方法中，通过对特定的JAK2变异的存在的有无进行测定，进行骨髓增殖性疾病的诊断，但无法掌握骨髓纤维化的状态，或掌握骨髓纤维症的发展的程度。因此，研究骨髓纤维化的状态的手段目前仅有骨髓活体检查。但是，由于骨髓的采集对患者的负担极大，无法为了研究骨髓纤维化的状态而频繁地进行骨髓活体检查。另外，在骨髓纤维化的评价中，要求病理组织学检查的技术和经验。再者，由于在骨髓纤维症的施用治疗中有每日服用高价的治疗药的必要，从而有为了确认施用治疗的有效性而以比以往更高的频度研究骨髓纤维化的状态的期盼。所以，期望对患者的负担小，并且使骨髓纤维化的状态的客观的评价成为可能的手段的开发。【解决课题的技术方案】本专利技术人发现，通过以骨髓纤维症患者的末梢血中所含的指定的糖蛋白质作为生物标志物而进行测定，可客观地评价骨髓纤维化的状态，从而完成本专利技术。从而，本专利技术的第1实施方式提供辅助骨髓纤维症的状态的诊断的方法，其包括：对从骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质进行测定的工序，及基于此标志物蛋白质的测定值而判断上述患者的骨髓纤维化的状态的工序，此标志物蛋白质是有与多花紫藤凝集素(Wisteriafloribundaagglutinin：WFA)凝集素结合的糖链的Mac-2结合蛋白(Mac-2-bindingprotein：M2BP)。本专利技术的第2实施方式提供辅助骨髓纤维症的预后的预测的方法，其包括：对从骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质进行测定的工序，及基于此标志物蛋白质的测定值而判断上述患者的预后的工序，此标志物蛋白质是有与WFA凝集素结合的糖链的M2BP。本专利技术的第3实施方式提供骨髓纤维症的治疗效果的监测方法，其包括：对从受对于骨髓纤维症的治疗的骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质进行测定的工序，及基于此标志物蛋白质的测定值而判断骨髓纤维症的治疗效果的工序，此标志物蛋白质是有与WFA凝集素结合的糖链的M2BP。本专利技术的第4实施方式提供，存在于骨髓纤维症的患者的末梢血中、且由有与WFA凝集素结合的糖链的M2BP构成的骨髓纤维化状态的判断用标志物。本专利技术的第5实施方式提供骨髓纤维症的状态诊断装置，其具备含处理器及处于此处理器的控制下的存储器的计算机，在上述存储器中记录有用于使上述计算机执行下列工序的计算机程序：取得从骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质的测定值的工序，及基于此标志物蛋白质的测定值而判断上述患者的骨髓纤维化的状态的工序，上述标志物蛋白质是有与WFA凝集素结合的糖链的M2BP。本专利技术的第6实施方式提供骨髓纤维症的预后预测装置，其具备含处理器及处于此处理器的控制下的存储器的计算机，在上述存储器中记录有用于使上述计算机执行下列工序的计算机程序：取得从骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质的测定值的工序，及基于此标志物蛋白质的测定值而判断上述患者的预后的工序，上述标志物蛋白质是有与WFA凝集素结合的糖链的M2BP。本专利技术的第7实施方式提供骨髓纤维症的治疗效果的监测装置，其具备含处理器及处于此处理器的控制下的存储器的计算机，在上述存储器中记录有用于使上述计算机执行下列工序的计算机程序：取得从受对于骨髓纤维症的治疗的骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质的测定值的工序，及基于此标志物蛋白质的测定值而判断骨髓纤维症的治疗效果的工序，上述标志物蛋白质是有与WFA凝集素结合的糖链的M2BP。【专利技术效果】本专利技术对于在试样的采集中的患者的负担小，并且，能客观地评价骨髓纤维化的状态。【附图说明】【图1】是显示用骨髓活体检查分类的MF-0/1组及MF-2/3组的各自的WFA+-M2BP的测定值的箱线图。【图2】是为了算出WFA+-M2BP的测定值的截止值而制成的ROC曲线。【图3】是显示用骨髓活体检查分类的MF-0组、MF-1组、MF-2组及MF-3组的各自的WFA+-M2BP的测定值的箱线图。【图4】是显示JAK抑制剂的施用导致的骨髓纤维症患者的WFA+-M2BP的测定值的变化的坐标图。【图5】是显示骨髓纤维症的状态的诊断装置的一例的概略图。【图6】是显示骨髓纤维症的状态的诊断装置的硬件构成的框图。【图7】是使用骨髓纤维症的状态的诊断装置的骨髓纤维症的状态的判断的流程图。【图8】是使用骨髓纤维症的预后的预测装置的预后判断的流程图。【图9】是使用骨髓纤维症的治疗效果的监测装置的治疗效果的判断的流程图。【图10A】是显示JAK抑制剂的施用导致的骨髓纤维症患者A的WFA+-M2BP的测定值的变化的坐标图。【图10B】是显示JAK抑制剂的施用导致的骨髓纤维症患者B的WFA+-M2BP的测定值的变化的坐标图。【图10C】是显示JAK抑制剂的施用导致的骨髓纤维症患者C的WFA+-M2BP的测定值的变化的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.辅助骨髓纤维症的状态的诊断的方法，其包括：对从骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质进行测定的工序，及基于上述标志物蛋白质的测定值而判断上述患者的骨髓纤维化的状态的工序，上述标志物蛋白质是有与多花紫藤(Wisteria floribunda)凝集素(WFA)结合的糖链的Mac‑2结合蛋白(M2BP)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.07.24 JP 2015-1469771.辅助骨髓纤维症的状态的诊断的方法，其包括：对从骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质进行测定的工序，及基于上述标志物蛋白质的测定值而判断上述患者的骨髓纤维化的状态的工序，上述标志物蛋白质是有与多花紫藤(Wisteriafloribunda)凝集素(WFA)结合的糖链的Mac-2结合蛋白(M2BP)。2.权利要求1所述的方法，其中判断上述骨髓纤维化的状态在以MF-0、MF-1、MF-2及MF-3表示的骨髓纤维化的等级之中，是相当于MF-0/1的等级或者相当于MF-2/3的等级。3.权利要求1所述的方法，其中判断上述骨髓纤维化的状态相当于在以MF-0、MF-1、MF-2及MF-3表示的骨髓纤维化的等级之中的何等级。4.权利要求2所述的方法，其中当上述标志物蛋白质的测定值与指定的截止值相同或比其高时，判断为骨髓纤维化的状态相当于MF-2/3的等级，当上述标志物蛋白质的测定值比指定的截止值低时，判断为骨髓纤维化的状态相当于MF-0/1的等级。5.权利要求1～4之任一项所述的方法，其中上述标志物蛋白质使用WFA凝集素和抗M2BP抗体测定。6.权利要求5所述的方法，其中上述WFA凝集素固定于磁性粒子，上述抗M2BP抗体被标记物质标记。7.权利要求1～6之任一项所述的方法，其中上述标志物蛋白质使用固定了使4聚体WFA凝集素成为2聚体而得到的2聚体WFA凝集素的磁性粒子和抗M2BP抗体进行测定。8.辅助骨髓纤维症的预后的预测的方法，其包括：对从骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质进行测定的工序，及基于上述标志物蛋白质的测定值而判断上述患者的预后的工序，上述标志物蛋白质是有与多花紫藤(Wisteriafloribunda)凝集素(WFA)结合的糖链的Mac-2结合蛋白(M2BP)。9.权利要求8所述的方法，其中当上述标志物蛋白质的测定值与指定的截止值相同或比其高时，预测为上述患者是高风险，当上述标志物蛋白质的测定值比指定的截止值低时，预测为上述患者是低风险。10.骨髓纤维症的治疗效果的监测方法，其包括：对从受对于骨髓纤维症的治疗的骨髓纤维症的患者采集的末梢血中所含的标志物蛋白质进行测定的工序，及基于上述标志物蛋白质的测定值而判断骨髓纤维症的治疗效果的工序，上述标志物蛋白质是有与多花紫藤(Wisteriafloribunda)凝集素(WFA...

【专利技术属性】
技术研发人员：田中靖人，楠本茂，高滨洋一，香川孝司，
申请(专利权)人：公立大学法人名古屋市立大学，希森美康株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP