一种促进皮肤伤口愈合的制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于医药产品领域，尤其涉及一种促进皮肤伤口愈合的制剂及其制备方法和应用。本发明专利技术提供了一种制剂，由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成。实验结果表明，本发明专利技术制剂能够促进皮肤伤口愈合。本发明专利技术制剂在敷贴后，制剂中的细胞因子和内皮祖细胞被释放出来，进而促进形成新生组织，起到定植修复的作用；脐带干细胞条件培养基中含有多种活性因子，能够提高组织的再生能力、促进原有组织的修复，起到全方位促进伤口愈合的作用。

Preparation for promoting skin wound healing and preparation method and application thereof

The invention belongs to the field of medical products, in particular to a preparation for promoting skin wound healing, and a preparation method and application thereof. The invention provides a preparation, which is made from endothelial progenitor cells, vascular endothelial factor, conditioned medium of umbilical cord stem cells and matrix glue. The experimental results show that the preparation of the invention can promote skin wound healing. After the preparation, the cytokine and endothelial progenitor cells in the preparation are released to promote the formation of new tissue and play the role of colonization and repair. There are a variety of active factors in the conditioned medium of the umbilical cord stem cells, which can improve the regeneration ability of the tissue and promote the repair of the original tissue. The effect of wound healing.

【技术实现步骤摘要】
一种促进皮肤伤口愈合的制剂及其制备方法和应用
本专利技术属于医药产品领域，尤其涉及一种促进皮肤伤口愈合的制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
皮肤是人体的重要器官，具有屏障保护、吸收与代谢、分泌与排泄、体温调节、免疫等各种功能。由于创伤等原因，可能导致皮肤的大范围伤害，并有可能导致并发症，危及人类生命。伤口愈合过程分为四期：(1)组织液渗出期：由胶原纤维细胞分泌胶原蛋白填充伤口，其中I型胶元蛋白为形成瘢痕的主要胶原。(2)炎症期(清创期)：发生在24-48小时，并伴随细菌感染，此时主要有免疫细胞清除受损组织和微生物。(3)增殖分化期：首先是表皮干细胞分化表皮，真皮干细胞分化表皮组织，成纤维细胞，以及毛发、汗腺和皮脂腺等皮肤附属器，造血干细胞中的内皮祖细胞分化新生血管、淋巴管和神经。(4)组织重朔：过度纤维化的瘢痕难以被机体吸收，造成血管以及毛发等皮肤附属器的重建发生严重障碍，形成终身病理性瘢痕。目前对于皮肤创伤等处理主要方式有机体组织自行修复或移植皮肤，但前者修复时间长，后者会对患者造成二次伤害。
技术实现思路
本专利技术提供了一种促进皮肤伤口愈合的制剂及其制备方法和应用，用于解决目前创伤处理方式修复时间长或会对患者造成二次伤害的问题。本专利技术的具体技术方案如下：一种制剂，由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成。优选的，所述脐带干细胞条件培养基和所述基质胶的体积比为1：1～2。优选的，所述内皮祖细胞在所述制剂中的含量为5～8×106个/mL。优选的，所述血管内皮因子在所述制剂中的含量为25～75ng/mL。本专利技术还提供了一种制剂的制备方法，包括：a)0～4℃下将脐带干细胞条件培养基和基质胶混匀，得到第一混合液；b)将含血管内皮因子的生理盐水重悬内皮祖细胞，得到第二混合液；c)0～4℃下将所述第一混合液和所述第二混合液混匀后置于模具中成型，得到所述制剂。优选的，所述第一混合液和所述第二混合液的体积比为1：1～3。优选的，所述脐带干细胞条件培养基按照如下方法获得：将脐带干细胞进行传代培养，获得P2～P5代脐带干细胞，收集所述P2～P5代脐带干细胞的培养上清液，得到所述脐带干细胞条件培养基。进一步的，将所述脐带干细胞进行传代培养之前，还包括：将脐带组织依次进行消化处理和离心分离，得到脐带干细胞。本专利技术还提供了上述技术方案所述制剂或上述技术方案所述制备方法制得的制剂在促进皮肤伤口愈合中的应用。优选的，所述制剂的储存温度为0～4℃。综上所述，本专利技术提供了一种制剂，由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成。实验结果表明，本专利技术制剂能够促进皮肤伤口愈合。本专利技术制剂在敷贴后，制剂中的细胞因子和内皮祖细胞被释放出来，进而促进形成新生组织，起到定植修复的作用；脐带干细胞条件培养基中含有多种活性因子，能够提高组织的再生能力、促进原有组织的修复，起到全方位促进伤口愈合的作用。具体实施方式本专利技术提供了一种促进皮肤伤口愈合的制剂及其制备方法和应用，用于解决目前创伤处理方式修复时间长或会对患者造成二次伤害的问题。下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。一种制剂，由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成。基质胶(Matrigel)是一种可溶性的基底膜基质，主要成分包括层黏连蛋白和胶原IV等，同时含有TGF-β成纤维细胞生长因子、组织纤维酶原活化因子以及其它在EHS肿瘤中自然表达的生长因子等。基质胶可以有效帮助上皮细胞等各类细胞的附着和分化，其中，包括神经细胞、肝细胞、哺乳动物上皮细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等。并且，基质胶还会影响鼠乳腺上皮细胞的蛋白表达水平，支持周围神经再生和牛输软管上皮细胞的分化。生物可降解高分子材料一般用于生物体内，是非永久性植入材料，在发挥作用之后能被活体吸收或参与正常的代谢而被排出体外，同时其降解产物对生物体无毒。本专利技术中，基质胶作为一种天然的水溶性的生物可降解高分子材料，其降解产物易被吸收而不产生炎症反应。本专利技术制剂由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成，基质胶可被人体降解且对上皮祖细胞无毒副作用，并能起到很好的皮肤修复作用，使得该制剂能够与皮肤进行贴合。此外，内皮祖细胞在细胞因子和生长因子的作用下，能够分化形成新的皮肤组织，使得创口快速愈合；脐带干细胞条件培养基可以改善肤质，防止皮肤粗糙，对皮肤发育与维持起着十分重要的作用。本专利技术中，制剂由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成。该制剂采用基质胶联合内皮祖细胞、血管内皮因子和脐带干细胞条件培养基，能够对创口进行修复，该制剂使用时，仅需要敷贴在创口处，即可起到立竿见影的修复效果，避免了对机体造成多次伤害。本专利技术制剂在敷贴后，制剂中的细胞因子和内皮祖细胞被释放出来，进而促进形成新生组织，起到定植修复的作用。此外，脐带干细胞条件培养基中含有多种活性因子，能够提高组织的再生能力、促进原有组织的修复，起到全方位促进伤口愈合的作用。本专利技术中，脐带干细胞条件培养基和基质胶的体积比为1：1～2。内皮祖细胞在制剂中的含量为5～8×106个/mL。血管内皮因子在制剂中的含量为25～75ng/mL。本专利技术还提供了上述技术方案制剂的制备方法，包括：a)0～4℃下将脐带干细胞条件培养基和基质胶混匀，得到第一混合液；b)将含血管内皮因子的生理盐水重悬内皮祖细胞，得到第二混合液；c)0～4℃下将第一混合液和第二混合液混匀后置于模具中成型，得到制剂。本专利技术中，第一混合液和第二混合液的体积比为1：1～3。本专利技术中，脐带干细胞条件培养基按照如下方法获得：将脐带干细胞进行传代培养，获得P2～P5代脐带干细胞，收集P2～P5代脐带干细胞的培养上清液，得到脐带干细胞条件培养基。进一步的，将脐带干细胞进行传代培养之前，还包括：将脐带组织依次进行消化处理和离心分离，得到脐带干细胞。本专利技术还提供了上述技术方案制剂或上述技术方案制备方法制得的制剂在促进皮肤伤口愈合中的应用。本专利技术中，制剂的储存温度为0～4℃。本专利技术提供了一种制剂，由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成。实验结果表明，本专利技术制剂能够促进皮肤伤口愈合。本专利技术制剂在敷贴后，制剂中的细胞因子和内皮祖细胞被释放出来，进而促进形成新生组织，起到定植修复的作用；脐带干细胞条件培养基中含有多种活性因子，能够提高组织的再生能力、促进原有组织的修复，起到全方位促进伤口愈合的作用。为了进一步理解本专利技术，下面结合具体实施例对本专利技术进行详细阐述。实施例1内皮祖细胞的分离提取本实施例采用Ficoll梯度离心法分离人脐血单核细胞中的活细胞，联合MACS磁珠抗体标记法分选CD133+细胞以除去大部分血液细胞及血小板等，再通过贴壁法除去成熟的内皮细胞和单核细胞，利用内皮祖细胞的贴壁性能去除其它细胞，获得内皮祖细胞。实施例2脐带干细胞条件培养基的收集取汇合度80％～90％的P2～P3代的脐带干细胞，用PBS清洗1～3遍后，往细胞中加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制剂，其特征在于，由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成。

【技术特征摘要】
1.一种制剂，其特征在于，由内皮祖细胞、血管内皮因子、脐带干细胞条件培养基和基质胶制成。2.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述脐带干细胞条件培养基和所述基质胶的体积比为1：1～2。3.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述内皮祖细胞在所述制剂中的含量为5～8×106个/mL。4.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述血管内皮因子在所述制剂中的含量为25～75ng/mL。5.一种制剂的制备方法，其特征在于，包括：a)0～4℃下将脐带干细胞条件培养基和基质胶混匀，得到第一混合液；b)将含血管内皮因子的生理盐水重悬内皮祖细胞，得到第二混合液；c)0～4℃下将所述第一混合液和所述第二混合液混匀后置于模具中成型，得到所述制剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：马颖，
申请(专利权)人：广东颜值科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44