紫芝黑豆溶栓酶的制备方法技术

本发明专利技术公开的紫芝黑豆溶栓酶的制备方法，以紫芝为生产菌株，以黑豆为培养基，采用固态发酵的方法，其紫芝溶栓酶有强烈的溶血栓活性，活性中心存在丝氨酸残基，为丝氨酸蛋白酶、胰蛋白酶属，是一种新发现的溶栓酶，具有提高免疫力的功效，并适用于免疫力低及其引起的症状；既保留了黑豆的营养成份，使用后又可增强人体肠道功能，具有很好的经济效益和市场前景。

Preparation of thrombolytic enzyme in black bean

The preparation method of Ganoderma black bean thrombolytic enzyme, using ganoderma as production strain, using black bean as culture medium, using solid fermentation method, its thrombolytic enzyme has strong hemolytic thrombolytic activity, the active center has serine residue, and it is a new kind of thrombolytic enzyme, which is serine protease and trypsin. It has the effect of improving immunity and is suitable for low immunity and its symptoms. It not only preserves the nutritional components of the black bean, but also enhances the function of human intestinal tract after use. It has good economic benefit and market prospect.

【技术实现步骤摘要】
紫芝黑豆溶栓酶的制备方法
本专利技术涉及一种溶栓酶的制备方法及豆类发酵制品的深加工领域，尤其是一种紫芝黑豆溶栓酶的制备方法。
技术介绍
紫芝，真菌的一种。似灵芝。应用范围非常广泛，无论心、肺、肝、脾、肾脏虚弱，均可服用。紫芝所治病种涉及呼吸、循环、消化、神经、内分泌及免疫等各个系统；涵盖内、外、妇、儿、五官各科疾病。紫芝化学成分为子实体及菌丝体，含蛋白质、氨基酸、糖类、香豆素、甾体及三萜化合物。子实体并含油脂、蜡、挥发性及升华性物质。性淡、温，味稍苦，能补中强智、宁心益胃，用于神经衰弱、失眠、胃痛、消化不良、解菌毒，有一定的抗癌作用。黑豆为豆科植物大豆(学名：Glycinemax(L.)merr)的黑色种子。黑豆又名橹豆、黑大豆等。黑豆具有高蛋白、低热量的特性，外皮黑，里面黄色或绿色。黑豆性喜温暖，耐高温，生育适温18～30度，播种法繁殖以颗粒大而饱满、色泽乌黑发亮者为佳。根据中国科学家的一项研究发现，黑豆防老抗衰，药食俱佳，它与黄豆同属大豆类，黑豆皮提取物能够提高机体对铁元素的吸收，带皮食用黑豆能够改善贫血症状。目前，血栓栓塞性疾病，如脑血栓、心肌梗塞、冠心病、肢体血管栓塞本文档来自技高网...

【技术保护点】
紫芝黑豆溶栓酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：包含紫芝黑豆的固态发酵过程和酶的分离纯化过程；其中，紫芝黑豆的固态发酵过程包括：①菌种活化将紫芝菌丝体均匀涂布在斜面培养基表面培养；②种子培养将黑豆匀浆加水煮沸，制成种子培养基，将步骤①中获得的活化紫芝菌种接种至种子培养基摇瓶培养；③将黑豆制成固体发酵培养基；④发酵产酶将步骤②获得的种子培养基接种至步骤③获得的固体发酵培养基获得固体发酵物料；酶的分离纯化过程包括：i、酶的分离取紫芝黑豆的固态发酵过程中获得的固体发酵物料，加入0.1～0.2mol/L、pH7～8的磷酸钠缓冲液从发酵物料中提取酶，其液比是1∶3～6，搅拌2～4小时后，离心、取上清...

【技术特征摘要】
2017.11.08 CN 20171109807241.紫芝黑豆溶栓酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：包含紫芝黑豆的固态发酵过程和酶的分离纯化过程；其中，紫芝黑豆的固态发酵过程包括：①菌种活化将紫芝菌丝体均匀涂布在斜面培养基表面培养；②种子培养将黑豆匀浆加水煮沸，制成种子培养基，将步骤①中获得的活化紫芝菌种接种至种子培养基摇瓶培养；③将黑豆制成固体发酵培养基；④发酵产酶将步骤②获得的种子培养基接种至步骤③获得的固体发酵培养基获得固体发酵物料；酶的分离纯化过程包括：i、酶的分离取紫芝黑豆的固态发酵过程中获得的固体发酵物料，加入0.1～0.2mol/L、pH7～8的磷酸钠缓冲液从发酵物料中提取酶，其液比是1∶3～6，搅拌2～4小时后，离心、取上清液为粗酶液；ii、酶的纯化将步骤i获得的粗酶液进行SephadexG-50柱层析和CMC离子交换柱层析，用离子强度pH线性梯度洗脱，收集具有溶栓酶活性的洗脱液部分，获得纯化的紫芝黑豆溶栓酶。2.根据权利要求1所述的紫芝黑豆溶栓酶的制备方法，其特征在于：所述紫芝黑豆的固态发酵过程步骤①中的菌种活化斜面培养基由下列物质按重量份组成：马铃薯200重量份，胡萝卜200重量份，琼脂20重量份，蛋白胨1.2重量份，葡萄糖21重量份，磷酸二氢钾0.4重量份，硫酸镁0.18重量份，维生素B1少许。3.根据权利要求1所述的紫芝黑豆溶栓酶的制备方法，其特征在于：所述紫芝黑豆的固态发酵过程步骤②中的种子培养基由...

【专利技术属性】
技术研发人员：程京燕，苏保荣，高向阳，
申请(专利权)人：珠海市微豆生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44