The present invention relates to a preparation method of an ad - peptide, which solves the technical problem that the existing technique is complicated, the consumption of raw materials is large, and the yield of the synthetic product is low, the purity is low, and the impurity of its own is difficult to be purified. The invention provides a method for the preparation of AMBA peptide. First, the liquid phase synthesis method is used to synthesize the two peptide fragment Fmoc Thr (OtBu) Ala OH, Fmoc Lys (Boc), and the amino resin as solid phase synthesis. In vivo, according to the amino acid sequence of Apapa peptide from the C end to the N end, the total protected amino acid and the synthesized two peptide fragment and four peptide fragment of the Fmoc protective group were condensed in order from the C end to the end of the amino acid sequence. The 6 step solid condensation reaction was reduced, and the fully protected Apapa peptide resin was obtained, and the pure Apapa peptide was obtained by lysis and purification. The invention is widely applied to the preparation technology of polypeptide drugs.
【技术实现步骤摘要】
一种阿巴帕肽的制备方法
本专利技术属于多肽药物制备方法
，特别涉及一种阿巴帕肽的制备方法。
技术介绍
甲状旁腺激素(PTH)是一种由甲状旁腺主细胞分泌的，调节体内钙和磷代谢的多肽类激素，其C端肽链与PTH-II受体结合可促进骨细胞凋亡、N端肽链与PTH-I受体结合可促进骨骼重建。Lilly公司以人甲状旁腺素(hPTH)N-末端34个氨基酸残基研制的用于治疗骨质疏松症的药物特立帕肽(Teriparatide)于2002年12月被FDA批准上市。阿巴帕肽，英文名称为Abaloparatide，是由RadiusHealth公司研制的一种新型甲状旁腺激素相关肽(PTHrP)，它是PTH-I受体强有力的选择性激活剂，可以增加骨矿物质含量、骨密度以及骨强度，促进骨骼形成，已于2017年4月28日被FDA批准上市，其商品名称为Tymlos。阿巴帕肽经皮下注射，用于治疗处于骨折风险或对其它治疗药物无效的绝经后妇女的骨质疏松症，可有效降低新发椎体和非椎体骨折率。与特立帕肽相比，阿巴帕肽能够更好的降低骨折率和高钙血症发生率。阿巴帕肽是由34个氨基酸残基组成的多肽，分子式为C17...
【技术保护点】
一种阿巴帕肽的制备方法，其特征在于，包括步骤如下：1)用液相合成法合成Fmoc‑Thr(OtBu)‑Ala‑OH二肽片段；2)用液相合成法合成Fmoc‑Lys(Boc)‑Gly‑OH二肽片段；3)用液相合成法合成Fmoc‑Arg(Pbf)‑Arg(Pbf)‑Arg(Pbf)‑Glu(OtBu)‑OH四肽片段；4)用液相合成法合成Fmoc‑Ala‑Val‑OH二肽片段；5)缩合反应：在缩合体系存在下，以Fmoc保护的氨基树脂为载体，用固相合成法，按照阿巴帕肽主链肽序从C端至N端依次缩合全保护氨基酸和步骤1)合成Fmoc‑Thr(OtBu)‑Ala‑OH二肽片段、步骤2)合成F...
【技术特征摘要】
1.一种阿巴帕肽的制备方法，其特征在于，包括步骤如下：1)用液相合成法合成Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH二肽片段；2)用液相合成法合成Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH二肽片段；3)用液相合成法合成Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-OH四肽片段；4)用液相合成法合成Fmoc-Ala-Val-OH二肽片段；5)缩合反应：在缩合体系存在下，以Fmoc保护的氨基树脂为载体，用固相合成法，按照阿巴帕肽主链肽序从C端至N端依次缩合全保护氨基酸和步骤1)合成Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH二肽片段、步骤2)合成Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH二肽片段、步骤3)合成Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-OH四肽片段和步骤4)合成Fmoc-Ala-Val-OH二肽片段，得阿巴帕肽-氨基树脂为：Ala-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Aib-Lys(Boc)-Leu-His(Trt)-Thr(OtBu)-Ala-氨基树脂；所述的依次缩合全保护氨基酸顺序为：Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ala-Val-OH；6)裂解步骤5)制得的阿巴帕肽-氨基树脂，同时切除侧链保护基，得阿巴帕肽粗肽；7)对步骤6)制得的阿巴帕肽粗肽进行纯化、冻干，得阿巴帕肽纯品多肽。2.根据权利要求1所述的一种阿巴帕肽的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH的合成方法为：先将Fmoc-Thr(OtBu)-OH和HOSu在DCC存在时，生成Fmoc-Thr(OtBu)-OSu；再将Fmoc-Thr(OtBu)-OSu和H-Ala-OH在碱催化下生成Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH。3.根据权利要求1所述的一种阿巴帕肽的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH的合成方法为：先Fmoc-Lys(Boc)-OH和HOSu在DCC存在时生成Fmoc-Lys(Boc)-OSu；再Fmoc-Lys(Boc)-OSu和H-Gly-OH在碱催化下生Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH。4.根据权利要求1所述的一种阿巴帕肽的制备方法，其特征在于，步骤3)中所述Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-OH的合成方法为：先将Fmoc-Arg(Pbf)-OH和HOSu在DCC存在时生成Fmoc-Arg(Pbf)-OSu；再将Fmoc-Arg(Pbf)-OSu和H-Arg(Pbf)-OH在碱催化下生成Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-OH；将Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-OH和HOSu在D...
【专利技术属性】
技术研发人员：姬胜利，殷金岗，陈明鲁，王广胜，
申请(专利权)人：润辉生物技术威海有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37
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