The invention provides a method for identifying the varieties of Camellia, which relates to the field of garden and horticulture. The molecular specific marker primers provided by the invention can quickly identify the camellia Camellia, and especially, the invention also provides a detection method for the detection of the variety of camellia flower. The method is simple and quick. It is a molecular means to distinguish the varieties of Camellia sinensis by apparent characteristics. The detection method provided by this invention can fundamentally solve the phenomenon of \homonymous foreign objects\ and \exotic names\ between varieties and subspecies of camellia flowers in gardens and horticulture applications, and to the application, popularization and new varieties of garden and garden plants. Breeding provides detection methods and technical support at molecular level.
【技术实现步骤摘要】
一种用于鉴定茶花品种的方法
本专利技术涉及园林
,特别地涉及山茶花品种“怒江山茶”的分子特异性标记引物以及利用该分子特异性标记引物对山茶花品种“怒江山茶”进行快速鉴定的方法。
技术介绍
茶花品种大约有2000种,可分为3大类,12个花型,2013年中国茶花品种已有306个以上。《花镜》记载茶花品种有十九个:玛瑙茶、鹤顶红、宝珠茶、蕉萼白宝珠、杨妃茶、正宫粉、石榴茶、一捻红、照殿红、晚山茶、南山茶等。茶花型多,有单瓣、半重瓣、重瓣、曲瓣、五星瓣、六角形、松壳型等。我国山茶花属植物资源丰富,分布广泛,且山茶花属植物表型具有较强可塑性,种间杂交容易,品种数量众多,有些品种间性状差异较小,传统形态分类很难快速、准确有效评价与区分。学术界对目前山茶花品种的名称和描述都很混乱,“同物异名”或“同名异物”现象较为严重,缺乏统一规范的名称及科学系统的分类体系,不便于品种鉴定、推广、交流及新品种的培育,因此亟需建立一个科学合理的山茶花品种分类鉴定系统以帮助山茶花在园林艺术领域有长足发展。本专利技术提供一种用于鉴定茶花品种怒江山茶的方法,从分子水平上建立该品种的特异的DNA指纹 ...
【技术保护点】
一种用于鉴定茶花品种的方法,其特征在于,所述方法包括提取待测山茶花品种组织的基因组DNA作为模板,以分子特异性标记引物作为扩增引物,进行PCR扩增,对扩增产物进行电泳检测,若电泳结果出现600‑800bp的特异DNA条带,则待测山茶花品种为怒江山茶,反之则否。
【技术特征摘要】
1.一种用于鉴定茶花品种的方法,其特征在于,所述方法包括提取待测山茶花品种组织的基因组DNA作为模板,以分子特异性标记引物作为扩增引物,进行PCR扩增,对扩增产物进行电泳检测,若电泳结果出现600-800bp的特异DNA条带,则待测山茶花品种为怒江山茶,反之则否。2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,以所述分子特异性标记引物作为扩增引物,进行PCR扩增,对扩增产物进行电泳检测,若电泳结果出现712bp的特异DNA条带,则待测山茶花品种为怒江山茶。3.根据权利要求1或2任一所述方法,其特征在于,所述山茶花DNA提取包括如下步骤:步骤一、取待检测山茶花品种新鲜幼嫩叶片2g,迅速放入2mLEppendorf管中,置于液氮罐中预冷;步骤二、将样品从液氮罐中取出,放入预冷的研钵中,在研钵中不断倒入液氮将叶片磨成细粉;步骤三、迅速将研磨好的细粉装入2mLEppendorf管中,加入900μL65℃预热的CTAB提取缓冲液,混匀;步骤四、将Eppendorf管置于55℃水浴中,保温60min,其间不时颠倒混匀;步骤五、待冷至室温后,加入500μL氯仿/异戊醇,颠倒混匀至溶液呈乳浊状,6000rpm离心5min分层;步骤六、用剪去端部约0.5cm的2mL吸头小心将上层液相转移至另一Eppendorf管中;步骤七、加入600μL异丙醇...
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