YD1701在制备治疗ALDH1A3高表达肿瘤的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种YD1701在制备治疗ALDH1A3高表达肿瘤的药物中的应用，研究发现YD1701可以作为ALDH1A3抑制剂，能够逆转ALDH1A3高表达肿瘤细胞发生间质‑上皮转化(MET)，减少肿瘤侵袭转移，抑制肿瘤进展，延长荷瘤动物的带瘤生存时间；并且YD1701细胞毒性小，有望成为治疗ALDH1A3高表达肿瘤的新药物，具有很好的应用前景。

Application of YD1701 in the preparation of drugs for treatment of ALDH1A3 with high expression of tumor

The present invention relates to the application of YD1701 in the preparation of drugs for the treatment of ALDH1A3 high expression of tumor. It has been found that YD1701 can be used as a ALDH1A3 inhibitor to reverse the transformation of interstitial epithelium (MET) in ALDH1A3 high expression tumor cells, reduce tumor invasion and metastasis, inhibit the progression of tumor and prolong the survival time of tumor bearing animals. Moreover, YD1701 has little cytotoxicity and is expected to become a new drug for the treatment of ALDH1A3 high expression tumor.

【技术实现步骤摘要】
YD1701在制备治疗ALDH1A3高表达肿瘤的药物中的应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及YD1701在制备治疗ALDH1A3高表达肿瘤的药物中的应用。
技术介绍
癌是起源于上皮组织的恶性肿瘤，是恶性肿瘤中最常见的一类，极大的危害人类健康，并成为新世纪人类的第一杀手。侵袭转移是癌患者最主要的死亡原因，而上皮-间质转化(EMT)则是癌侵袭转移过程中的核心细胞生物学事件之一。因此，筛选开发逆转EMT的小分子是抗癌侵袭转移治疗领域的重要方向，具有很好的应用前景。人类乙醛脱氢酶(Aldehydedehydrogenases，ALDH)家族包含19个亚型，不同ALDH亚型亚细胞定位各不相同(包括细胞核、线粒体和细胞浆)且功能各异。该家族能够通过将内生性醛催化形成酸，进而参与众多重要病理生理过程的调控，包括视觉、神经递质传递以及胚胎发育等等。随着研究的深入，ALDH家族成员的功能以一种令人惊讶的速度不断扩展，越来越多的结果表明，该家族成员在恶性肿瘤的发生、进展、治疗抵抗和复发过程中扮演举足轻重的角色。公开号为CN105734121A的中国专利报道了乙醛脱氢酶1A3(ALDH1A3)的高表达与结直肠癌(CRC)细胞发生EMT密切相关，ALDH1A3过表达能够促进直肠癌的侵袭转移；而下调ALDH1A3的表达、抑制ALDH1A3的活性、或给予ALDH1A3过表达效应抑制剂可以完全或部分逆转结直肠癌细胞的侵袭转移能力。ALDH1A3的高表达还见于胶质瘤、前列腺癌、胰腺癌、卵巢癌、肺癌、肝癌、胃、髓母细胞瘤等，并与上述肿瘤的侵袭、转移和预后不良密切相关。因此筛选ALDH1A3抑制剂对ALDH1A3高表达肿瘤细胞的治疗具有重要意义。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种YD1701在制备治疗ALDH1A3高表达肿瘤的药物中的应用，该药物具有细胞毒性小，为ALDH1A3高表达肿瘤提供一种新的治疗药物。为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：YD1701在制备治疗ALDH1A3高表达肿瘤的药物中的应用。本专利技术中，所述ALDH1A3高表达肿瘤为结直肠癌、髓母细胞瘤、胶质瘤、前列腺癌、卵巢癌、肺癌、胃癌、肝癌或胰腺癌中的一种。本专利技术中，所述ALDH1A3高表达肿瘤为结直肠癌。本专利技术中，所述药物包括YD1701和药学上可接受的载体。优选的，所述药物为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂中的任一种。本专利技术中，所述YD1701在制备抑制ALDH1A3高表达肿瘤侵袭转移的药物中的应用。本专利技术中，所述YD1701在制备抑制ALDH1A3高表达肿瘤进程的药物中的应用。本专利技术中，所述YD1701在制备延长ALDH1A3高表达肿瘤生存时间的药物中的应用。本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供了治疗ALDH1A3高表达肿瘤的新药物，该药物细胞毒性小，对ALDH1A3具有很好的抑制作用，降低肿瘤细胞的侵袭能力，抑制肿瘤进展，延长荷瘤动物带瘤生存时间，能够作为治疗结直肠癌、髓母细胞瘤、胶质瘤、前列腺癌、卵巢癌、肺癌、胃癌、肝癌、胰腺癌等的候选药物，对ALDH1A3高表达肿瘤具有重要意义。附图说明为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图进行说明：图1为分子对接筛选ALDH1A3的特异性抑制剂结果图。图2为通过基于指纹的聚类分为结构簇鉴定的化合物。图3为YD1701结构式。图4为YD1701的LC-MS的鉴定结果。图5为YD1701与DEAB、双硫仑和西咪替丁比较结果。图6为YD1701对正常结肠粘膜上皮NCM460细胞毒性结果。图7为体外模拟YD1701化合物与ALDH1A3的结合图(A：3-D模式；B：2-D模式)。图8为体外YD1701处理CRC细胞后细胞形态。图9为E-钙粘蛋白、CDH2/N-钙粘蛋白，波形蛋白表达结果图。图10为EMT转录因子SNAI2/Slug，ZEB1的表达结果图。图11为YD1701处理后不同CRC细胞系和原代CRC细胞的自发侵袭能力结果图。图12为YD1701处理后不同CRC细胞系和原代CRC细胞的细胞毒性结果图。图13为YD1701处理后不同CRC细胞系和原代CRC细胞的抗增殖结果图。图14为YD1701治疗小鼠CRC皮下移植瘤的过程示意图。图15为YD1701小鼠生存时间结果图。图16为YD1701治疗小鼠皮下移植瘤的效果图，包括皮下肿瘤、肝脏和肺转移情况。图17为YD1701和5-FU治疗小鼠原位CRC移植瘤的过程示意图。图18为通过活体成像系统观察小鼠结肠原位植入肿瘤微组织块20天后小动物活体成像观察结果图。图19为YD1701治疗后原位CRC荷瘤小鼠的总生存时间结果图。图20为YD1701治疗小鼠原位移植瘤的效果图，包括原位肿瘤，肝脏和肺转移情况。图21为YD1701对髓母细胞瘤、前列腺癌、肺癌、卵巢癌、胃癌、肝癌侵袭表型的抑制结果图。具体实施方式下面将结合附图，对本专利技术的优选实施例进行详细的描述。实施例1、ALDH1A3抑制剂筛选采用分子对接筛选ALDH1A3的特异性抑制剂(图1)。在进行分子对接之前，首先，去除盐离子，仅保留最大的分子片段，列举互变异构体和质子化来制备目标文库(>20万个化合物)。然后，通过能量最小化产生3-D结构。接下来，以高通量对接，将前20000种化合物进一步进行柔性对接，并且用力场精炼对接的姿态。此后，计算前1000种化合物的ADMET描述符，并过滤ADMET性质差的化合物。在ADMET过滤过程中，对logP>6或警报数>3的所有化合物进行过滤。对挑选出来的494种化合物，通过基于指纹的聚类分为结构簇，最终鉴定出30个化合物，具体流程见图2所示。在这30化合物中，基于对正常结肠粘膜上皮细胞的毒性效应，挑选出毒性反应最小的化合物YD1701，YD1701分子式分子量＝536.63，结构式如图3所示。然后将YD1701，化合物进行LC-MS鉴定，结果如图4所示。将鉴定后的YD1701化合物与已知的ALDH抑制剂进行比对，结果显示筛选的YD1701化合物与已知的ALDH抑制剂，如DEAB、双硫仑和西咪替丁不同(图5)，表明YD1701化合物为一种新的ALDH抑制剂，预测YD1701化合物可能对ALDH高表达肿瘤有疗效。实施例2、YD1701细胞毒性实验为明确YD1701化合物能否用于ALDH1A3高表达肿瘤治疗，需要研究YD1701化合物对正常细胞的细胞毒性。将正常结肠粘膜上皮NCM460细胞株(购买自美国典型培养物保藏中心，ATCC)扩大培养至细胞状态良好，用胰酶消化各细胞，并用中和胰酶消化后，用无菌的PBS洗细胞一次后细胞计数，采用完全培养基调整各细胞浓度为5×104/ml，然后将调整好浓度的细胞悬液置于无菌的10cm的细胞培养皿中，前后左右轻摇混匀细胞，采用排枪将细胞悬液均匀的加入96孔板中，每孔100μL，37℃培养过夜，待细胞贴壁后再加入浓度分别为(0μg/mL、0.04μg/mL、0.2μg/mL、1μg/mL、5μg/mL、25μg/mL、125μg/mL、250μg/mL)的YD1701化合物，96孔板的外圈孔不加细胞悬液，加无菌PBS以防培养基蒸发；然后用排枪换液，各孔加入含相应YD1701化合物浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】
YD1701在制备治疗ALDH1A3高表达肿瘤的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.YD1701在制备治疗ALDH1A3高表达肿瘤的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述ALDH1A3高表达肿瘤为结直肠癌、髓母细胞瘤、胶质瘤、前列腺癌、卵巢癌、肺癌、胃癌、肝癌或胰腺癌中的一种。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述ALDH1A3高表达肿瘤为结直肠癌。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物包括YD1701和药学上可接受的载体。5.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：余时沧，段江洁，王君，卞修武，
申请(专利权)人：余时沧，
类型：发明
国别省市：重庆,50