ptna基因片段在生产丁醇中的应用制造技术

本发明专利技术公开了ptna基因片段在生产丁醇中的应用。具体为高产丁醇的过表达重组梭菌及其构建方法与应用。所述ptna基因的序列为SEQ ID NO.1。所述过表达重组梭菌的构建方法，包括以下步骤：(1)ptna基因过表达重组质粒构建；(2)过表达重组质粒的扩增(3)过表达重组质粒的甲基化；(4)ptna基因过表达重组菌株构建；(4)过表达重组菌株丁醇发酵性能检测。本发明专利技术还包括过表达重组梭菌在生产丁醇中的发酵应用。本发明专利技术将ptna基因在C.acetobutylicum ATCC 824中过表达能显著提高在ABE发酵中葡萄糖、果糖以及菊芋水解液的利用率及丁醇的产量。

Application of ptna gene fragment in production of butanol

The invention discloses the application of ptna gene fragment in the production of butanol. The overexpression of Clostridium recombined with high butanol and its construction method and application are described. The sequence of the ptna gene is SEQ ID NO.1. The construction method of the expressed recombinant Clostridium recombinant included the following steps: (1) ptna gene overexpressed recombinant plasmids; (2) overexpression of recombinant plasmids (3) over expression of recombinant plasmids methylation; (4) ptna gene overexpression recombinant strain; (4) overexpression of recombinant strain butanol fermentation performance detection. The invention also includes over expressing the fermentation application of recombinant Clostridium in the production of butanol. The overexpression of ptna gene in C.acetobutylicum ATCC 824 can significantly improve the utilization of glucose, fructose and Jerusalem artichoke hydrolysate in ABE fermentation and the yield of butanol.

【技术实现步骤摘要】
ptna基因片段在生产丁醇中的应用
本专利技术属于生物工程
，涉及ptna基因片段在生产丁醇中的应用，具体为高产丁醇的过表达重组梭菌及其构建方法与应用。
技术介绍
近年来传统化石能源的日渐枯竭与能源需求的持续增长，社会经济的迅猛发展与温室效应的逐年加剧，使得开发绿色可再生能源迫在眉睫，已成为全球环境与科研范畴内的研究热点，也是人类社会未来可持续发展的重要议题。生物质资源则被认为是一种理想的可再生资源，绿色环保、可再生的两大优点使之受到越来越多的关注，但目前生物质资源还存在利用率低等缺点。新型绿色环保、可持续发展的能源，已经成为全球共同的需求。生物液体燃料主要包括生物乙醇，生物丁醇、生物柴油等，生物丁醇相对于其他生物燃料具有更多的优势。首先，丁醇的能量密度及热值与汽油接近，可与汽油以任意比混溶，且无需对现有动力设备进行技术改造，国际市场潜力巨大。其次，丁醇也是众多化学基产品的关键化工合成原料，对于解决市场供需具有重要的经济意义。尽管生物丁醇展示了良好的发展态势，但仍然存在诸多技术问题，总体来说，主要是发酵原料的成本较高、发酵过程中底物的利用不完全和发酵产物中丁醇浓度较低等问题，因本文档来自技高网...

【技术保护点】
ptna基因片段在生产丁醇中的应用，所述ptna基因片段具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；所述ptna基因编码如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.ptna基因片段在生产丁醇中的应用，所述ptna基因片段具有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列；所述ptna基因编码如SEQIDNO.2所示的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述应用为构建过表达ptna基因片段相关的生物材料。3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述ptna基因片段相关的生物材料为下述一种：(1)含有权利要求1所述的ptna基因的表达盒；(2)含有权利要求1所述的ptna基因的重组载体或含有(1)所述表达盒的重组载体；(3)含有(2)所述重组载体的重组菌株。4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述的(1)～(3)中任一项的生物材料中，还包含核苷酸序列为SEQIDNO.3的硫解酶的启动子。5.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述ptna基因在梭菌内过表达。6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述梭菌选自丙酮丁醇梭菌(Clostridiumacetobutylicum)，拜氏梭菌(Clostridiumbeijerinckii)，糖乙酸多丁醇梭菌(Clostridiumsaccharoperbutylacetonicum)及糖丁酸梭菌(Clostridiumsaccharobutylicum)中的野生型菌株，或者为经过诱变筛选或遗传改造后的菌株。7.根据权利要求5所述应用，其特征在于，包括以下步骤：(1)过表达重组质粒的构建：将核苷酸序列为SEQIDNO.3的硫解酶启动子(thl)序列经PstI和SalI酶切后与pIMP1质粒连接，得到载体质粒pIMP1-thl，以丙酮丁醇梭菌C.acetobu...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈丽杰，李颖，吴又多，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21