一种多功能微生物土壤修复剂及其制备与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种多功能微生物土壤修复剂及其制备与应用，属于生物技术与环境保护领域。本发明专利技术的多功能微生物土壤修复剂采用包含以下重量份数的原料均匀混合而成：纳米壳聚糖30‑60份，腐殖酸10‑20份，纳米生物炭10‑20份，复合微生物菌剂20‑30份；其中，所述复合微生物菌剂是由食苯芽孢杆菌、索诺拉沙漠芽孢杆、菌球形赖氨酸芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、苏云金杆菌、反硝化无色杆菌、澳大利亚糖丝菌、佐氏红球菌、硫化物氧化假诺卡氏菌、食二氯杂环己烷假诺卡氏菌经纯化、优选、发酵、干燥脱水制备得到。本发明专利技术的多功能微生物土壤修剂可替代传统的物理与化学修复技术，能降解复杂污染物、修复面广，可防止土壤退化及抑制环境中病虫害，具有修复治理效果好、成本低、经济环保的优点。

A multifunctional microbial soil remediation agent and its preparation and Application

The invention discloses a multifunctional microbial soil remediation agent and its preparation and application, belonging to the field of biotechnology and environmental protection. The multifunctional microbial soil restorant is made of a homogeneous mixture of raw materials containing the following weight parts: 30 nanometer chitosan, 60 humic acids, 10 humic acids, 10 nano biological charcoal 20, 20 compound microbial agent 30; among them, the compound microbial inoculant is from Bacillus subtilis and Sonora Desert buds Spore, Bacillus globosum, Bacillus licheniformis, Bacillus licheniformis, Bacillus thuringiensis, Bacillus thuringiensis, denitrifying colorless bacilli, Australian sugar filamentum, Streptococcus sustachi, sulphide oxidation of pseudoracillae, and two chlorocycline, pseudoracea, were purified, optimized, fermented, dried and dehydrated. The multifunctional microbial soil repair agent of the invention can replace the traditional physical and chemical remediation technology, can degrade complex pollutants, have wide repair surface, can prevent soil degradation and inhibit diseases and insect pests in the environment, and has the advantages of good treatment effect, low cost, and economic and environmental protection.

【技术实现步骤摘要】
一种多功能微生物土壤修复剂及其制备与应用
本专利技术涉及一种多功能微生物土壤修复剂及其制备与应用，属于生物技术与环境保护领域。
技术介绍
目前，随着工业、城市污染的加剧和农业化学物质种类、数量的增加，土壤污染已成为备受关注的全球性环境污染问题，中国受污染耕地面积约为1.5亿亩，其中，受有机污染物（农药、石油烃和多环芳烃（PAHs））污染的农田达3600万hm2。而土壤污染主要是工业活动造成的重金属和石油等污染及农业化肥、农药造成的有机污染。土壤污染如不能及时得到修复，随着时间的推移污染物将不可避免的向其他环境转嫁污染。当前，中国土壤污染出现了有毒化工和重金属污染由工业向农业转移、由城区向农村转移、由地表向地下转移、由上游向下游转移、由水土污染向食品链转移的趋势，逐步积累的污染正在演变成污染事故的频繁爆发。当前，国内的土壤修复剂以化学药剂为主，容易带来二次污染。生物修复环境技术刚刚起步，以微生物为主的土壤修复剂，菌株功能单一，微生物种类较少，施入环境后，菌群在环境中稳定性差，不能与土著微生物实现平衡与共生，有效性降低，修复效果差。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的不足，提供一种多功能微生物土壤修复剂及其制备方法，采用本专利技术获得的多功能微生物土壤修复剂主要用于解决土壤环境中重金属和石油烃和PAHs等污染及农业化肥、农药造成的有机污染，其次可解决土壤退化及农业环境病虫害多发的问题。本专利技术以微生物为主体，将多种互不拮抗、互生共代谢的微生物经纯化培养，平衡复配，补充到污染的环境后，共同以有机污染物为唯一碳源和能源，与其它有机物质进行共代谢而降解有机物。通过补充有益微生物群，修复被污染环境中的微生物生态系统，构建生态平衡。本专利技术可替代传统的物理与化学修复技术，能降解复杂污染物、修复面广，可防止土壤退化及抑制环境中病虫害，具有修复治理效果好、成本低、经济环保的优点。本专利技术技术方案如下：一种多功能微生物土壤修复剂，是采用包括如下重量份的原料均匀混合制备而成：纳米壳聚糖30-60份，腐殖酸10-20份，纳米生物炭10-20份，复合微生物菌剂20-30份；所述复合微生物菌剂是由食苯芽孢杆菌（Bacillusbenzoevorans）、索诺拉沙漠芽孢杆菌（Bacillussonorensis）、球形赖氨酸芽孢杆菌（Lysinibacillussphaericus）、地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）、环状芽孢杆菌（BacilluscirculansJordan）、苏云金杆菌（Bacillusthuringiensis）、反硝化无色杆菌（Achromobacterdenitrificans）、澳大利亚糖丝菌（SaccharothrixaustraliensisLabeclaetat.）、佐氏红球菌（Rhodococcuszopfii）、硫化物氧化假诺卡氏菌（Pseudonocardiasulfidoxydans）、食二氯杂环己烷假诺卡氏菌（Pseudonocardiadioxanivrans）经纯化、优选、发酵、干燥脱水制备得到，所述每克复合微生物菌剂中，食苯芽孢杆菌活菌数10-12×109个，索诺拉沙漠芽孢杆菌活菌数6-10×109个，球形赖氨酸芽孢杆菌活菌数3-5×109个，地衣芽孢杆菌活菌数20-30×109个，环状芽孢杆菌活菌数15-20×109个，苏云金杆菌活菌数8-12×109个，反硝化无色杆活菌数9-10×109个，澳大利亚糖丝菌活菌数3-6×109个，佐氏红球菌活菌数5-9×109个，硫化物氧化假诺卡氏菌活菌数8-10×109个，食二氯杂环己烷假诺卡氏菌活菌数6-10×109个。本专利技术的多功能微生物土壤修复剂，其制备方法包括如下步骤：（1）取以下菌种：食苯芽孢杆菌、索诺拉沙漠芽孢杆菌、球形赖氨酸芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、苏云金杆菌、反硝化无色杆菌，分别接种于液体种子培养基，均在32-37℃条件下液体培养20-24h，获得液体种子，然后按10%的接种量将液体种子接种于液体发酵培养基中，在32-37℃进行液体种子扩大发酵培养26-32h，干燥脱水，分别获得上述各菌种的菌剂菌粉，依次记为菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、菌剂F、菌剂G；所述各菌种的菌剂菌粉中含有的活菌数分别如下：食苯芽孢杆菌活菌数10-12×109个/克菌剂A，索诺拉沙漠芽孢杆菌活菌数6-10×109个/克菌剂B，球形赖氨酸芽孢杆菌活菌数3-5×109个/克菌剂C，地衣芽孢杆菌活菌数20-30×109个/克菌剂D，环状芽孢杆菌活菌数15-20×109个/克菌剂E，苏云金杆菌活菌数8-12×109个/克菌剂F，反硝化无色杆菌活菌数9-10×109个/克菌剂G；（2）将澳大利亚糖丝菌接种于液体种子培养基，在28-30℃条件下液体培养48-60h，然后将获得的液体种子按10%的接种量接种于液体发酵培养基中，在37-40℃培养60-72h，干燥脱水，获得该菌种的菌剂菌粉，记为菌剂H；所述菌剂菌粉含有澳大利亚糖丝菌活菌数3-6×109个/克菌剂H；（3）将佐氏红球菌接种于液体种子培养基，在28-30℃条件下液体培养20-24h，然后将获得的液体种子按10%的接种量接种于液体发酵培养基中，在26-28℃培养3-5天，干燥脱水，获得该菌种的菌剂菌粉记为菌剂I；所述菌剂菌粉含有赤红球菌活菌数5-9×109个/克菌剂I；（4）将硫化物氧化假诺卡氏菌接种于液体种子培养基，在23-25℃条件下液体培养24-48h，然后将获得的液体种子按10%的接种量接种于液体发酵培养基中，在23-25℃培养48-72h，干燥脱水，获得该菌种的菌剂菌粉，记为菌剂J；所述菌剂菌粉含有硫化物氧化假诺卡氏菌8-10×109个/克菌剂J；（5）将食二氯杂环己烷假诺卡氏菌接种于液体种子培养基，均在28-30℃条件下液体培养24-48h，然后将获得的液体种子按10%的接种量接种于液体发酵培养基中，在25-28℃培养48-72h，干燥脱水，获得该菌种的菌剂菌粉，记为菌剂K；所述菌剂菌粉含有食二氯杂环己烷假诺卡氏菌活菌数6-10×109个/克菌剂K；（6）将步骤（1）-（5）制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、菌剂F、菌剂G和菌剂H、菌剂I、菌剂J、菌剂K按照重量比0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.1-1:0.1-1的比例混合后，制得复合微生物菌剂；（7）将步骤（6）制得的复合微生物菌剂20-30份与纳米壳聚糖30-60份、腐殖酸10-20份、纳米生物炭10-20份混合均匀，制备得到多功能微生物土壤修复剂。优选的，所述步骤（1）中的液体种子培养基采用如下原料混合经灭菌后制得：葡萄糖20g/L、蛋白胨16g/L、氯化钠6g/L、牛肉膏2g/L、MnSO4·7H2O0.02g/L、高灭磷0.01g/L、乙酯杀螨醇0.01g/L、氯苯胺灵0.01g/L、氯氟氰菊酯0.01g/L、百草枯0.01g/L，溶解于1000mL蒸馏水中，pH7.2-7.6。优选的，所述步骤（1）中的液体种子扩大发酵培养，是将液体发酵种子接种到扩大培养的发酵罐中，接种量10%；液体发酵培养基配方为：玉本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多功能微生物土壤修复剂，其特征在于：采用包括如下重量份的原料均匀混合制备而成：纳米壳聚糖30‑60份，腐殖酸10‑20份，纳米生物炭10‑20份，复合微生物菌剂20‑30份；所述复合微生物菌剂是由食苯芽孢杆菌、索诺拉沙漠芽孢杆菌、球形赖氨酸芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、苏云金杆菌、反硝化无色杆菌、澳大利亚糖丝菌、佐氏红球菌、硫化物氧化假诺卡氏菌、食二氯杂环己烷假诺卡氏菌经纯化、优选、发酵、干燥脱水制备得到，所述每克复合微生物菌剂中，食苯芽孢杆菌活菌数10‑12×10

【技术特征摘要】
2017.03.10 CN 20171014151801.一种多功能微生物土壤修复剂，其特征在于：采用包括如下重量份的原料均匀混合制备而成：纳米壳聚糖30-60份，腐殖酸10-20份，纳米生物炭10-20份，复合微生物菌剂20-30份；所述复合微生物菌剂是由食苯芽孢杆菌、索诺拉沙漠芽孢杆菌、球形赖氨酸芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、苏云金杆菌、反硝化无色杆菌、澳大利亚糖丝菌、佐氏红球菌、硫化物氧化假诺卡氏菌、食二氯杂环己烷假诺卡氏菌经纯化、优选、发酵、干燥脱水制备得到，所述每克复合微生物菌剂中，食苯芽孢杆菌活菌数10-12×109个，索诺拉沙漠芽孢杆菌活菌数6-10×109个，球形赖氨酸芽孢杆菌活菌数3-5×109个，地衣芽孢杆菌活菌数20-30×109个，环状芽孢杆菌活菌数15-20×109个，苏云金杆菌活菌数8-12×109个，反硝化无色杆活菌数9-10×109个，澳大利亚糖丝菌活菌数3-6×109个，佐氏红球菌活菌数5-9×109个，硫化物氧化假诺卡氏菌活菌数8-10×109个，食二氯杂环己烷假诺卡氏菌活菌数6-10×109个。2.根据权利要求1所述的多功能微生物土壤修复剂，其特征在于：其制备方法包括如下步骤：（1）取以下菌种：食苯芽孢杆菌、索诺拉沙漠芽孢杆菌、球形赖氨酸芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、苏云金杆菌、反硝化无色杆菌，分别接种于液体种子培养基，均在32-37℃条件下液体培养20-24h，获得液体种子，然后按10%的接种量将液体种子接种于液体发酵培养基中，在32-37℃进行液体种子扩大发酵培养26-32h，干燥脱水，分别获得上述各菌种的菌剂菌粉，依次记为菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、菌剂F、菌剂G；所述各菌种的菌剂菌粉中含有的活菌数分别如下：食苯芽孢杆菌活菌数10-12×109个/克菌剂A，索诺拉沙漠芽孢杆菌活菌数6-10×109个/克菌剂B，球形赖氨酸芽孢杆菌活菌数3-5×109个/克菌剂C，地衣芽孢杆菌活菌数20-30×109个/克菌剂D，环状芽孢杆菌活菌数15-20×109个/克菌剂E，苏云金杆菌活菌数8-12×109个/克菌剂F，反硝化无色杆菌活菌数9-10×109个/克菌剂G；（2）将澳大利亚糖丝菌接种于液体种子培养基，在28-30℃条件下液体培养48-60h，然后将获得的液体种子按10%的接种量接种于液体发酵培养基中，在37-40℃培养60-72h，干燥脱水，获得该菌种的菌剂菌粉，记为菌剂H；所述菌剂菌粉含有澳大利亚糖丝菌活菌数3-6×109个/克菌剂H；（3）将佐氏红球菌接种于液体种子培养基，在28-30℃条件下液体培养20-24h，然后将获得的液体种子按10%的接种量接种于液体发酵培养基中，在26-28℃培养3-5天，干燥脱水，获得该菌种的菌剂菌粉记为菌剂I；所述菌剂菌粉含有赤红球菌活菌数5-9×109个/克菌剂I；（4）将硫化物氧化假诺卡氏菌接种于液体种子培养基，在23-25℃条件下液体培养24-48h，然后将获得的液体种子按10%的接种量接种于液体发酵培养基中，在23-25℃培养48-72h，干燥脱水，获得该菌种的菌剂菌粉，记为菌剂J；所述菌剂菌粉含有硫化物氧化假诺卡氏菌8-10×109个/克菌剂J；（5）将食二氯杂环己烷假诺卡氏菌接种于液体种子培养基，均在28-30℃条件下液体培养24-48h，然后将获得的液体种子按10%的接种量接种于液体发酵培养基中，在25-28℃培养48-72h，干燥脱水，获得该菌种的菌剂菌粉，记为菌剂K；所述菌剂菌粉含有食二氯杂环己烷假诺卡氏菌活菌数6-10×109个/克菌剂K；（6）将步骤（1）-（5）制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、菌剂F、菌剂G和菌剂H、菌剂I、菌剂J、菌剂K按照重量比0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.5-2:0.1-1:0.1-1的比例混合后，制得复合微生物菌剂；（7）将步骤（6）制得的复合微生物菌剂20-30份与纳米壳聚糖30-60份、腐殖酸10-20份、纳米生物炭10-20份混合均匀，制备得到多功能微生物土壤修复剂。3.根据权利要求2所述的多功能微生物土壤修复剂，其特征在于：所述步骤（1）中的液体种子培养基采用如下原料混合经灭菌后制得：葡萄糖20g/L、蛋白胨16g/L、氯化钠6g/L、牛肉膏2g/L、MnSO4·7H2O0.02g/L、高灭磷0.01g/L、乙酯杀螨醇0.01g/L、氯苯胺灵0.01g/L、氯氟氰菊酯0.01g/L、百草枯0.01g/L，溶解于1000mL蒸馏水中，...

【专利技术属性】
技术研发人员：何圣平，凌仕信，
申请(专利权)人：厦门天邦润生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35