一种雷公藤红素的分离纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种雷公藤红素的分离纯化方法，其特征在于：包含以下步骤：用有机溶剂超声提取工艺获得提取物浸膏，再运用脱脂及醇提‑水沉工艺对浸膏进行处理，得到雷公藤红素粗提物，用大孔树脂分离雷公藤红素粗提物，得到雷公藤红素粗品，最后用双溶剂重结晶纯化，得到高纯度的雷公藤红素。采用大孔树脂的粗提物分离工艺，具有选择性好、分离效率高和易于规模化制备等优点；采用双溶剂重结晶纯化工艺，具有工艺简单、产品的外观与纯化高的特点。

A method for isolation and purification of tripterin

The invention discloses a separation and purification method for tripterin, which includes the following steps: the extract extract is obtained by the ultrasonic extraction process of organic solvent, then the extract is treated with degreasing and alcohol extraction water sedimentation process, and the crude extract of tripterin is obtained, and the roughing of tripterin is extracted with macroporous resin. The crude product of Tripterygium was obtained and purified by double solvent recrystallization to obtain high purity Tripterygium. The separation process of crude extract with macroporous resin has the advantages of good selectivity, high separation efficiency and easy to be prepared by scale. The double solvent recrystallization purification process has the characteristics of simple process and high appearance and purification of the product.

【技术实现步骤摘要】
一种雷公藤红素的分离纯化方法
本专利技术涉及一种雷公藤红素的分离纯化方法，属于植物活性成分分离工艺

技术介绍
雷公藤红素来源于卫矛科植物雷公藤或南蛇藤等的根皮，是一个具有多种生物活性的天然产物。雷公藤红素是治疗类风湿病雷公藤片、雷公藤多甙片等制剂的有效成分之一。现代研究表明：雷公藤红素具有很强的抗氧化和抗癌症新生血管生成作用，还有抗类风湿和杀虫作用，在脑神经保护也有突出的功效[中草药,2010,41(7):1215-1218]。雷公藤红素作为新型天然蛋白酶体抑制剂，在癌症的预防和治疗方面显示巨大的开发潜力，有望发展成为继紫杉醇之后新一代高效的抗肿瘤植物药[中国制药信息,2006,22(9):15]。我国具有丰富的雷公藤红素的植物资源，因此，开展雷公藤红素提取与分离纯化研究，获得高纯度的雷公藤红素产品，尽可能充分利用植物资源，具有重要的应用前景和实际意义，也可为新药研发及中药现代化提供一种新的途径。雷公藤素属于五环三萜类化合物，外观形状为红色或暗红色晶体，具有一定的毒性，分子式和分子量分别C29H38O4和450.61，熔点为185-205℃。不易溶于水，溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙酸乙酯等有机溶剂中，理化性质较稳定，最大吸收波长为425nm。雷公藤红素在已经报道的植物中普遍含量较低，因此，如何提高植物中雷公藤红素的提取分离效率，充分利用有限的资源显得尤为重要。雷公藤红素的提取工艺报道较多，如传统的有机溶剂加热回流提取、超临界流体萃取及超声波提取。雷公藤红素的分离工艺主要有液滴逆流色谱法[JChromatogrA,2004,1028:171-174]和硅胶柱色谱法[王宁强,沈阳药科大学硕士论文.2008；辽宁中医药大学学报,2013,15(6):48-50]。然而，传统柱层析方法难以分离出高纯度的雷公藤红素产品，且存在着溶剂和能量消耗大，工艺比较复杂，成本较高的缺点。专利CN10163842A以低级氯代烷烃为溶剂加热回流提取，提取液经过脱脂-醇沉工艺，得到稠膏状粗提物，再用固定相为正相硅胶或反相硅胶柱分离纯化，收集洗脱液，脱溶剂干燥后得到粉末状精提物，最后用乙醇-水混合溶剂重结晶，得到较高纯度的雷公藤红素。专利CN101311186A改善了传统柱层析方法不能分离出高纯度的雷公藤红素的不足，运用氯仿超声波提取、双溶剂洗脱硅胶柱层析和混合溶剂重结晶等工艺。总体上这些分离纯化工艺，仍然存在着工艺复杂，分离效率低和成本较高的不足。因此，探索简便有效的雷公藤红素分离纯化工艺，提高雷公藤红素的分离效率，获得高纯度的雷公藤红素产品，充分利用雷公藤红素相关植物资源是非常必要的。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：旨在提高雷公藤红素的分离纯化效率，简化分离纯化工艺，降低雷公藤红素的制备成本，获得高纯度的雷公藤红素产品。本专利技术的技术方案是：一种雷公藤红素的分离纯化方法，包含以下步骤：用有机溶剂超声提取工艺获得提取物浸膏，再运用脱脂及醇提-水沉工艺对浸膏进行处理，得到雷公藤红素粗提物，用大孔树脂分离雷公藤红素粗提物，得到雷公藤红素粗品，最后用双溶剂重结晶纯化，得到高纯度的雷公藤红素。所述的大孔树脂为AB-8大孔吸附树脂。所述的粗提物:大孔树脂的质量比例为1:(10~50)。所述的用体积分数为60~90的乙醇/水作为洗脱剂，洗脱液的pH值为5.5~6.5。所述的双溶剂体系为环己烷/二氧六环或环己烷/THF，混合溶剂的体积比例为(85~98):(2~15)。本专利技术的有益效果：采用大孔树脂的粗提物分离工艺，具有选择性好、分离效率高和易于规模化制备等优点；采用双溶剂重结晶纯化工艺，具有工艺简单、产品的外观与纯化高的特点。具体实施方式实施例1将经充分干燥雷公藤根皮粉碎，80%以上的粉末过30-40目筛。取雷公藤根粉末200.0g，加入氯仿800ml，浸泡2h，再超声提取40min，分两次重复操作，合并提取液，蒸馏回收溶剂氯仿，并在50-60ºC下干燥，得到浸膏3.56g。取上述浸膏4.0g加入石油醚60ml，加热回流30min，趁热滤过倾出石油醚，重复两次，得到残余物，挥发干石油醚，得到脱低极性成分提取物1.22g。然后加入50ml的95%乙醇，加热至70ºC左右溶解，再缓慢加入相同体积水，然后将大部分乙醇蒸出，置于冰水浴中冷却，产生暗红色沉积物为雷公藤红素粗提物，干燥称重为0.32g。取上述雷公藤红素粗提物0.5g，用少量乙醇溶剂溶解，用经过预处理的AB-8大孔吸附树脂20g装柱并进行柱分离，用调PH为6.5的70%乙醇洗脱，收集Rf值约为0.70的组分，浓缩干燥后，得到雷公藤红素粗品0.12g。取上述得到的雷公藤红素粗品0.20g,选用环己烷/二氧六环体积比90:10进行重结晶，得到雷公藤红素为红色针状结晶0.182g,熔点：195~203ºC。产品经过HPLC分析，含量为98.5%。实施例2将经充分干燥雷公藤根皮粉碎，80%以上的粉末过30-40目筛。取雷公藤根粉末200.0g，加入氯仿800ml，浸泡2h，再超声提取40min，分两次重复操作，合并提取液，蒸馏回收溶剂氯仿，并在50-60ºC下干燥，得到浸膏3.56g。取上述浸膏4.0g加入石油醚60ml，加热回流30min，趁热滤过倾出石油醚，重复两次，得到残余物，挥发干石油醚，得到脱低极性成分提取物1.22g。然后加入50ml的95%乙醇，加热至70ºC左右溶解，再缓慢加入相同体积水，然后将大部分乙醇蒸出，置于冰水浴中冷却，产生暗红色沉积物为雷公藤红素粗提物，干燥称重为0.32g。取上述雷公藤红素粗提物0.5g，用少量乙醇溶剂溶解，用经过预处理的AB-8大孔吸附树脂20g装柱并进行柱分离，用调PH为6.5的70%乙醇洗脱，收集Rf值约为0.70的组分，浓缩干燥后，得到雷公藤红素粗品0.12g。取上述得到的雷公藤红素粗品0.20g,选用环己烷/THF体积比95:5进行重结晶，得到雷公藤红素为红色针状结晶0.175g,熔点：195~203ºC。产品经过HPLC分析，含量为98.2%。本专利技术提供了一种雷公藤红素分离纯化方法，具有工艺简单，分离纯化效率高，获得纯度98.5%的雷公藤红素产品，能够满足医药及其它各种用途需要。对比实施例1将经充分干燥雷公藤根皮粉碎，80%以上的粉末过30-40目筛。取雷公藤根粉末200.0g，加入氯仿800ml，浸泡2h，再超声提取40min，分两次重复操作，合并提取液，蒸馏回收溶剂氯仿，并在50-60ºC下干燥，得到浸膏3.56g。取上述浸膏4.0g加入石油醚60ml，加热回流30min，趁热滤过倾出石油醚，重复两次，得到残余物，挥发干石油醚，得到脱低极性成分提取物1.22g。然后加入50ml的95%乙醇，加热至70ºC左右溶解，再缓慢加入相同体积水，然后将大部分乙醇蒸出，置于冰水浴中冷却，产生暗红色沉积物为雷公藤红素粗提物，干燥称重为0.32g。取上述雷公藤红素粗提物0.5g，用少量乙醇溶剂溶解，用经过预处理的AB-8大孔吸附树脂20g装柱并进行柱分离，用调PH为6.5的70%乙醇洗脱，收集Rf值约为0.70的组分，浓缩干燥后，得到雷公藤红素粗品0.12g。取上述得到的雷公藤红素粗品0.20g,选用环己烷/丙酮体积比90:10进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种雷公藤红素的分离纯化方法，其特征在于：包含以下步骤：用有机溶剂超声提取工艺获得提取物浸膏，再运用脱脂及醇提‑水沉工艺对浸膏进行处理，得到雷公藤红素粗提物，用大孔树脂分离雷公藤红素粗提物，得到雷公藤红素粗品，最后用双溶剂重结晶纯化，得到高纯度的雷公藤红素。

【技术特征摘要】
1.一种雷公藤红素的分离纯化方法，其特征在于：包含以下步骤：用有机溶剂超声提取工艺获得提取物浸膏，再运用脱脂及醇提-水沉工艺对浸膏进行处理，得到雷公藤红素粗提物，用大孔树脂分离雷公藤红素粗提物，得到雷公藤红素粗品，最后用双溶剂重结晶纯化，得到高纯度的雷公藤红素。2.根据权利要求1所述的一种雷公藤红素的分离纯化方法，其特征在于：所述的大孔树脂为AB-8大孔吸附树脂。3.根据权利要求2所述的一种雷公...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡小华，谢兵，罗迎春，
申请(专利权)人：贵州民族大学，
类型：发明
国别省市：贵州,52