一株特效厌氧反硝化菌及其处理废水的方法技术

本发明专利技术公开了一株特效厌氧反硝化菌，该菌株为ＨＪＤ０７，厌氧反硝化菌菌菌株，保藏号为ＣＧＭＣＣ　№　２１６３，保藏日期为２００７年０９月１３日，所述的厌氧反硝化菌菌株从淤泥中分离得到，该厌氧反硝化菌在２５℃～３５℃，ｐＨ值为６．５～８．０，富集培养基中培养，分离培养基中分离。通过厌氧反硝化处理废水，成本低、除氮高效稳定、无二次污染，从而有效地处理了含氮废水，保护环境。

【技术实现步骤摘要】
一抹特^L^M硝化菌及其处理废水的方法
本专利技术涉及生物
，尤其是关于一林特效厌氧反硝化菌及其处 理废水的方法。背景才支术氮素污染不仅可引起水体富营养化，造成水生植物和藻类过度生长， 使水质迅速恶化，而且会降低水体观赏价值，危害水生生物的生存。水中 硝态氮(硝酸盐和亚硝酸)含量过高会影响人类健康，诱发高铁血红蛋白 血症和胃癌。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，克服现有技术的不足，提供一种成本 低、稳定高效除氮、无二次污染的特效厌氧反硝化及其处理废水的方法。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是: 一抹特效厌氧反硝化菌， 该菌林为HJD07,厌氧反硝化菌菌菌林，保藏号为CGMCCW2163,保藏 曰期为2007年09月13曰。所述的厌氧反硝化菌菌株从淤泥中分离得到，该厌氧反硝化菌在25°C 35°C, pH值为6.5 8.0,富集培养基中培养，分离培养基中分离。所述的厌氧反硝化菌菌抹从河底淤泥中分离得到，该厌氧反硝化菌菌 株适宜在温度为30。C， pH值为7.0 7.2，富集培养基中培养，分离培养基 中分离。所述的富集培养基成分为葡萄糖5g、硫酸铵2g、硫酸镁0.02g、柠 檬酸钠lg、磷酸二氢钾4g、磷酸氬二钾6g、蒸馏水1000mL, pH值7.0 7.2， 固体培养基另加琼脂2%(W/V,即在100亳升培养基中用的琼脂是2克)。所述的分离培养基成分为葡萄糖5g、亚硝酸钾2g、硫酸镁0.2g、氯 化钠lg、磷酸二氢钾4g、磷酸氢二钾6g、蒸馏水1000mL, pH值为7.0-7.2, 固体培养基另加琼脂2%(W/V，即在100毫升培养基中用的琼脂是2克)。所述的厌氧反硝化菌菌林从河底淤泥中分离得到，该厌氧反硝化菌菌 株适宜在温度为30。C,密闭培养3天；在富集培养基成分为葡萄糖5g、硫 酸铵2g、硫酸镁0.02 g、柠檬酸钠lg、磷酸二氢钾4g、磷酸氢二钾6g、 蒸馏水1000mL, pH值7.(K7.2，固体培养基另加琼脂2%(W/V,即在100 毫升培养基中用的琼脂是2克)中培养，培养基变混浊后，同样条件下振荡 培养3天；在温度为30。C时，分离培养基成分为葡萄糖5g、亚硝酸钾2g、 硫酸4美0.2g、氯化钠lg、磷酸二氩钾4g、磷酸氢二钾6g、蒸馏水1000 mL, pH值为7.0~7.2，固体培养基另加琼脂2%(W/V,即在100毫升培养基中 用的琼脂是2克)中分离。所述的厌氧反硝化菌菌抹属于施氏假单胞菌抹(Pseudomonas stutzeri),主要特征为菌落为乳白色、圆形、无突起、边缘规则、粘稠， 菌落大小为1 2mm;菌林个体呈弯杆状，宽为0.5~0.8pm,长0.7 1.2pm,无 芽孢，具端生鞭毛，丛生，能运动。所述的厌氧反硝化菌菌株的生理生化特征表现为革兰氏染色阴性， 氧化酶阳性，接触酶阳性，可利用多种碳源，不需要生长因子。一种利用所述的一抹特效厌氧反硝化菌处理含氮污水的方法，包括如 下步骤a) 厌氧反硝化菌菌林的培养；b) 厌氧反硝化菌菌林的分离；c) 厌氧反硝化菌菌抹与污7JC反应除氮；d) 回收厌M硝化菌菌抹，循环使用。环境因素对所述的厌M硝化菌菌株影响的主次顺序为(^2+>温度> 碳源x:/N〉pH值，在以甘油为碳源、pH值为7.5、温度为32。C、 C/N比为 3:1、铜离子浓度为5mg/L时，所述的厌氧反硝化菌菌抹有最大反硝化能 力。本专利技术的有益效果是，通过厌氧反硝化处理废水，成本低、除氮高效 稳定、无二次污染，从而有效地处理了含氮废水，保护环境。附图说明图1是不同温度对HJD07菌林的影响曲线图； 图2是不同pH对HJD07菌抹的影响曲线图3是HJD07菌株应用于深圳市布吉河水质净化厂对氮的去除效果曲 线图。具体实施方式从废水中去除氮素污染是近年来的重要研究课题。目前普遍认为生物 脱氮是从废水中去除氮素污染的经济有效的方法之一，生物脱氮包括硝化和反竭化两个过程硝化作用由亚硝酸盐细菌和硝酸盐细菌将氨化合物氧 化为亚硝酸盐和硝酸盐；反硝化作用也称脱氮作用，由反贿化细菌在厌氧 或微厌氧条件下将硝酸盐还原成氧化亚氮或氮气。反硝化作用是生物脱氮 中心环节，直接关系到脱氮效果的好坏。反硝化细菌在这一过程中起核心 作用，因此，发现高效的反硝化菌种及其实施办法是提高生物脱氮效率的 关键。一直以来，异养反硝化细菌在反硝化作用的过程中占据主要地位，并 且这些异养反硝化细菌大多在厌氧或兼氧状态进行反硝化作用，近年来人 们虽然也发现了 一些好氧反硝化菌，但对好氧反硝化菌的筛选和研究尚处 起步阶段，离实践应用还有一段距离。所以目前，对异养反硝化孩t生物的 深入研究有较大的实践意义。厌氧反硝化细菌在转换亚硝酸盐、硝酸盐为氮气时不需要氧气，通过 诱导产生硝酸还原酶和亚硝酸还原酶对硝酸盐和亚硝酸盐进行还原，需要 有机碳作为碳源和电子供体，以亚硝酸盐和硝酸盐作为电子受体。目前， 已知有50属以上的微生物能够进行反硝化作用。不同反贿化细菌的反硝化 作用能力不同，生长条件也存在;[艮大差异，因此筛选出反贿化作用能力强、 生长条件温和的菌抹，对于强化污水的生物脱氮具有潜在应用价值。本专利技术特效厌氧反硝化菌，属于施氏假单胞菌抹(Pseudomonas stutzeri),命名为HJD07。于2007年09月13日保藏于中国微生物菌种保 藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC ),保藏号为CGMCC Nq2163。本专利技术一抹特效厌M硝化菌，厌氧反硝化菌菌抹取自深圳市布吉河 底泥，经8次富集培养、7次分离纯化得到一林反贿化能力强的菌抹。在 YDC培养基上菌落为乳白色、圆形、无突起、边缘规则、粘稠，菌落大小 为l~2mm，菌抹个体呈弯杆状，宽为0.5 0.8nm,长0.7 1.2pm，无芽孢， 具端生鞭毛，丛生，能运动。其生理生化特征表现为革兰氏染色阴性， 氧化酶阳性，接触酶阳性，可利用多种碳源，从图1和图2可明显看出， 该菌最适生长pH值为7.0 8.0，最适生长温度为30 35。C,生长条件与一般的 细菌相似。对水体中的硝态氮通过反硝化来实现生物脱氮,这种反硝化的活 性与水体中溶氧的含量呈负相关。实施例1:厌氧反硝化菌HJD07菌抹的分离、鉴定及其反硝化特性 1、菌林的分离 (1 )采集样品现场采集深圳市布吉河底淤泥样品于150ml茶色细口瓶盛装，用适量 的蒸馏水稀释后放入厌氧盒保存，装运回实验室。(2)菌株富集、分离取样品溶液10ml至装有150ml富集培养基(已灭菌)的三角瓶中，于 30。C密闭培养3天。富集培养基成分葡萄糖5g、硫酸铵2g、硫酸镁0.02g、 柠檬酸钠lg、磷酸二氢钾4g、磷酸氢二钾^、蒸馏水1000mL, pH值为 7.0 7.2,固体培养基另加琼脂2% (W/V)。培养基变混浊后，再转移8ml 至新的富集培养基中，同样条件下振荡培养3天，如此再重复4次，每次 的转移量分别为5ml、 3ml、 lml、 0.5ml。依次增加培养基中硝酸钾的含量 2mg、 5mg、 8mg、 10mg、 15mg、 20mg。取lml的菌悬液稀释至10000倍 后，取稀释菌液0.5ml平板涂布，于30。C培养2 3天，即有菌落出现。选 择那些形态不一样的菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株特效厌氧反硝化菌，其特征在于：该菌株为ＨＪＤ０７，厌氧反硝化菌菌菌株，保藏号为ＣＧＭＣＣ　№　２１６３，保藏日期为２００７年０９月１３日。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金文标，赵勇娇，闫韫，张国栋，
申请(专利权)人：哈尔滨工业大学深圳研究生院，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]