鸡传染性支气管炎病毒基因型的检测方法技术

本发明专利技术属肾型传染性支气管炎病毒基因型检测方法。本发明专利技术设计四种引物： Ｐ↓［１］：５′ ＴＴＧＡＡＡＡＣＴＧＡＡＣＡＡＡＡＧＡＣＡ－３′ Ｐ↓［２］：５′ＧＡＴＧＴＣＡＴＡＴＴＡＴＴＡＡＣＡＣＡＣＴＧＡ－３′ Ｐ↓［３］：５′ＴＡＣＴＡＣＴＡＣＣＡＡＡＧＴＧＣＣ－３′ Ｐ↓［４］：５′ＣＣＡＴＡＡＣＴＡＡＣＡＴＡＡＧＧＧＣＡＡ－３′对传染性支气管炎病毒反转录产物进行快速检测。传统的检测方法要求有多种标准血清、需时较长等缺点。本发明专利技术将上述四种引物分两组配对进行ＰＣＲ反应，以９４℃２分钟→３５个循环：９４℃６０秒，４５℃９０秒，７２℃９０秒→７２℃７分钟这样的反应程序进行ＰＣＲ后，电泳、紫外检测仪直接检测。该方法快速、简便、准确。可用于传染性支气管炎的基因型诊断。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属鸡的传染性支气管炎病毒(IBV)基因型的检测方法。本专利技术设计四种引物采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，以下简称PCR)技术对鸡传染性支气管炎病毒(Avian infectious Bronchitis，以下简称IBV)的S1基因(即纤突蛋白基因)进行体外扩增，电泳直接检测，根据电泳结果判断IBV的基因型。IBV可导致鸡产生传染性支气管炎，临床上可分为呼吸型和肾病型，并可导致雏鸡死亡，在我国每年可造成数亿元的损失。传统的检测方法是利用进行中和试验进行血清分型。该方法的缺点是在需各种标准血清和大量的实验室工作，且耗时长。因此建立一种能鉴定IBV基因型的快速简便的方法对于雏鸡的IB防治十分必要。本专利技术通过分析IBV-S1基因的碱基组成，建立了一种直接检测IBV-S1基因，用于基因分型诊断方法，通过简单操作即可分辨出被测试病毒的基因型。本专利技术设计四种引物(P1～P4)，对IBV核酸的反转录产物DNA在PCR仪上进行扩增。引物的碱基序列分别是P1:5′TTGAAAACTGAACAAAAGACA-3′P2:5′GATGTCATA本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）基因型的方法，通过设计引物、引物配对及反应温度和时间，其特征在于测试传染性支气管炎病毒Ｓ↓［１］基因的变异，以确定ＩＢＶ的基因型。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：常维山，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]