一种新的多肽--磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－磷脂酰丝氨酸脱羧酶４２．６８，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如神经髓鞘相关性疾病、神经发育紊乱性疾病、神经性肿瘤、神经递质紊乱相关疾病等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的磷脂酰丝氨酸脱羧酶４２．６８的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。在哺乳动物细胞中，磷脂酰丝氨酸由游离的丝氨酸和磷脂的极性头部通过基团互换而合成，至少有两种丝氨酸交换酶催化该反应，一种是磷脂酰丝氨酸合成酶I，它利用磷脂酰胆碱作为磷脂酰供体，另一种是磷脂酰丝氨酸合成酶II，它特异性地利用磷脂酰乙醇胺作为磷脂酰供体。磷脂酰丝氨酸主要在内质网中合成，转运到线粒体，由线粒体磷脂酰丝氨酸脱羧酶催化形成磷脂酰乙醇胺(Veolker，D.R.，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1989，869921-9925)。游离丝氨酸和磷脂酰乙醇胺的乙醇胺基在磷脂酰丝氨酸合成酶II的催化下合成磷脂酰丝氨酸，磷脂酰丝氨酸脱羧酶酶将其羧基(COO-)从丝氨酸上移走，产生的乙醇胺通过CDP-乙醇胺可再产生磷脂酰乙醇胺，脱羧反应是磷脂酰丝氨酸-磷脂酰乙醇胺循环的限速步骤。1991年Osamu Kuge等人克隆出一个能弥补磷脂酰丝氨酸生物合成缺陷的基因——pssC基因，该基因是一个抑制基因，至少由6个kb组成，编码定位于内质网的磷脂酰丝氨酸脱羧酶，该酶在磷脂酰丝氨酸形成及脱羧(脱羧后产物为磷脂酰乙醇胺)、磷脂酰乙醇胺的合成中均有重要作用。该基因产物是由370个氨基酸组成的蛋白质，与大肠杆菌的磷脂酰丝氨酸脱羧酶酶原(由322个氨基酸残基组成)具31％的同源性。该基因其产物不具有磷脂酰丝氨酸合成酶I或II活性，能作为抑制基因补充磷脂酰丝氨酸生物合成的缺陷。本专利技术的新的多肽与已知的磷脂酰丝氨酸脱羧酶基因pssC蛋白在蛋白水平上具有93％的同源性和97％的相似性，并与之具有相似的结构特征，由此认为其是一种新的磷脂酰丝氨酸脱羧酶基因pssC蛋白，命名为多肽命名，并与已知蛋白具有相似的生物学功能，能催化磷脂酰丝氨酸脱羧，若表达异常，会破坏磷脂酰丝氨酸-磷脂酰乙醇胺循环，导致各种疾病，影响生物体的正常功能。此外，它在相关疾病的诊断及治疗方面也有一定作用。由于如上所述磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中238-1404位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-2518位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68的分子。“拮抗剂”或“抑制物”是指当与磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68结合时，一种可封闭或调节磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68的生物学活性或免疫学活性的分子。拮抗剂和抑制物可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.68的分子。“调节”是指磷脂酰丝氨酸脱羧酶42.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－磷脂酰丝氨酸脱羧酶４２．６８，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]