一种新的多肽--精氨酰tRNA合成酶15.84和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－精氨酰ｔＲＮＡ合成酶１５．８４，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的精氨酰ｔＲＮＡ合成酶１５．８４的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——精氨酰tRNA合成酶15.84，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。氨酰tRNA合成酶(aaRS)有三个底物即氨基酸、tRNA、ATP。aaRS催化氨基酸的酯化使之连接于tRNA的3’端，每一aaRS对应于一种氨基酸与数种同功tRNA。ATP提供了活化氨基酸所需的能量，氨基酸先活化为氨酰基腺苷酸，然后再与tRNA生成氨酰tRNA。AaRS与底物之间相互作用涉及识别与结合的问题。aaRSs可分为各含十个成员的两类型，精氨酰tRNA合成酶(ArgRS)属aaRS类型1(Eriani et al.，1990)。aaRS类型1通常有以下结构域(Cavarelli Jetal.，1998)1.氨基酸识别区域在aaRS类型1氨基酸结合裂隙上仅有两个高度保守的氨基酸残基，一个是酪氨酸残基在347位点，一个是天冬氨酸残基在191位点。在ArgRS，Tyr 347参与识别氨基酸底物的η-氮原子，在aaRS类型1的其它成员中，酪氨酸残基执行其它一些功能。Asp191在链第5个β折叠的C端，它不涉及底物结合却有结构上的作用，它稳定了链第5个β折叠与链第6个β折叠和周围二级结构的相互作用。2.ATP结合位点两条特异的多肽结构域HIGH与KMSKS连接于ATP结合位点。HIGH上不变的Gly在链第6个α螺旋的N端形成了一个平台以便结合ATP，两个His与Lys涉及氨酰化过渡态产物形成的稳定。3.tRNA的识别与结合位点Add-1与Add-2结构域共同识别反密码子与tRNA臂，结构域Ins-1遮盖了氨基酸受体主干的一边，Rossmann折叠遮盖了另一边。4.tRNA锚定平台aaRS类型1的四个成员包括ArgRS共有一个链第13个β折叠与链第14个β折叠组成的结构域，位于Rossmann折叠之后，这个结构域涉及tRNA锚定于ArgRS平台。5.ArgRS N端的RNA结合域ArgRS的Add-1结构域与tRNA的识别，与tRNA的D噗噜的相互作用最为密切。Add-1结构域的裸露β折叠在许多核酸结合蛋白上占有重要作用。6.反密码子结合位点ArgRS的反密码子结合位点位于C端的左手侧，链第21个α螺旋与链第22个α螺旋的氨基酸残基上。Add-1结构域的裸露β折叠亦识别反密码子臂。研究显示，九个aaRS(Arg，Asp，Gln，Glu，Ile，Leu，Lys，Met，and Pro)均由一个基因编码(Vellekamp et al.，1985).人ArgRS的cDNA序列与其它哺乳动物ArgRS基因有87％的同源性，氨基酸序列与中华鼠卵巢ArgRS有87.7％的同源性，与大肠杆菌ArgRS有37.7％的同源性。ArgRS在哺乳动物细胞中是高度保守的(Girjes AA et al.，1995)。通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本专利技术的多肽的表达谱与精氨酰tRNA合成酶的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为精氨酰tRNA合成酶15.84。由于如上所述精氨酰tRNA合成酶15.84蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的精氨酰tRNA合成酶15.84蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新精氨酰tRNA合成酶15.84蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——精氨酰tRNA合成酶15.84以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码精氨酰tRNA合成酶15.84的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码精氨酰tRNA合成酶15.84的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产精氨酰tRNA合成酶15.84的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——精氨酰tRNA合成酶15.84的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——精氨酰tRNA合成酶15.84的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与精氨酰tRNA合成酶15.84异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中1286-1720位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1815位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制精氨酰tRNA合成酶15.84蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与精氨酰tRNA合成酶15.84蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于精氨酰tRNA合成酶15.84表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－精氨酰ｔＲＮＡ合成酶１５．８４，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]