一种测定腺苷脱氨酶的试剂及其制法制造技术

本发明专利技术是关于采用氨偶联酶法，应用酶反应产物氧化型烟酰胺辅酶配制测定试剂，用于测定体液样本中腺苷脱氨酶及其同工酶活力的酶法测定试剂。本发明专利技术所指的酶法测定试剂并不加入测定反应所需的还原型烟酰胺辅酶或其类似物，而加入其反应产物氧化型烟酰胺辅酶或其类似物及其相应的生成还原型辅酶所需的酶和底物系统，通过在试剂内形成酶－底物－ＮＡＤ或酶－底物－ＮＡＤＰ等慢反应系统，将这类氧化型辅酶或其类似物缓慢循环还原为还原型烟酰胺辅酶或其类似物，当被还原的还原型烟酰胺辅酶或其类似物达到一定的浓度时，本发明专利技术所指的酶法试剂就可达到测定样本中腺苷脱氨酶及其同工酶活力的目的。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及测定腺苷脱氨酶的试剂及其制法。腺苷脱氨酶的活性测定方法主要包括放射核素法、电泳法和生化法。放射核素法灵敏度高，但需使用放射性核素，操作复杂，费用高，限制了该方法的临床应用，电泳法多用于腺苷脱氨酶同工酶的活性测定，由于电泳法测定时间较长，操作繁琐，不宜自动化，难以对大量样本进行测定，因此，临床上大多采用生化法。在生化法中，主要包括氨偶联酶测定法和次黄苷生成率测定法。次黄苷生成率测定法是于250nm波长处直接测定腺苷脱氨酶分解腺苷产生的次黄嘌呤核苷，由于其吸收峰与腺苷吸收峰部分重合，故灵敏度低，准确度差。氨偶联酶测定法是通过偶联的谷氨酸脱氢酶测定腺苷脱氨酶分解腺苷产生的氨。在传统的试剂配制过程中，需要加入氢氧化钠并煮沸去氨，以提高测定的准确度。在保存过程中，试剂容易发生生环境中氨污染，降低试剂的测定性能。本专利技术采用内源性慢反应酶循环机制不断排除试剂中污染的氨，从而无需煮沸去氨，并在试剂保存过程中，该机制能不间断地排除氨污染，稳定和提高了试剂的测定性能。在腺苷脱氨酶及其同工酶活力的氨偶联酶测定法中，采用还原型烟酰胺辅酶或其类似物(如NADH、NADPH、thio-N本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定腺苷脱氨酶的试剂，其特征在于：采用氨偶联酶法，应用酶反应产物氧化型烟酰胺辅酶配制测定试剂，包含其反应产物氧化型烟酰胺辅酶或其类似物及其相应的生成还原型辅酶所需的酶和底物系统，在试剂内形成酶－底物－ＮＡＤ、酶－底物－（ｔｈｉｏ－ＮＡＤ）、酶－底物－ＮＡＤＰ或酶－底物－（ｔｈｉｏ－ＮＡＤＰ）慢反应系统。如：葡萄糖脱氢酶－木糖－氧化型烟酰胺辅酶或其类似物系统、乳酸脱氢酶－ａ－酮戊二酸－氧化型烟酰胺辅酶或其类似物系统、甘油脱氢酶－乙二醇－氧化型烟酰胺辅酶或其类似物系统、（葡萄糖－６－磷酸脱氢酶）－葡萄糖－氧化型烟酰胺辅酶。如：ＮＡＤＨ、ＮＡＤＰＨ、ｔｈｉｏ－ＮＡＤＨ或ｔｈｉｏ－ＮＡＤＰＨ等，对...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：颜箫，
申请(专利权)人：江西特康科技有限公司，
类型：发明
国别省市：36[中国|江西]