一种从南瓜籽中分离的生物碱类化合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种从南瓜籽中分离的生物碱类化合物及其应用，属于食品、保健品技术领域。本发明专利技术从南瓜籽中提取除了具有治疗前列腺增生的化合物，该化合物在250mg/kg的作用剂量时前列腺湿重、前列腺指数和前列腺酸性磷酸酶(PAP)三个指标有显著的抑制作用，在500mg/kg剂量时三个指标有非常显著的抑制作用，具有重要的应用潜力。

A alkaloid compound separated from pumpkin seed and its application

【技术实现步骤摘要】
一种从南瓜籽中分离的生物碱类化合物及其应用
本专利技术涉及一种从南瓜籽中分离的生物碱类化合物及其应用，属于食品、保健品

技术介绍
南瓜籽是南瓜(Cucurbitaspp)的成熟种子，含有丰富的不饱和脂肪酸、维生素、生物黄酮及矿物质等。南瓜籽油对泌尿系统及前列腺增生有良好的防治和治疗作用。匈牙利的吉卜赛人、小亚西亚的土耳其人普遍食用南瓜籽，这些国家的男性很少发生前列腺肥大。在德国2245个前列腺增生临床病例中，每天服用1～2个胶囊的南瓜籽提取物，疗程12周，结果显示，41.6％病例前列腺不良症状减少，46％生活质量改善，患者报告没有不能容忍的副作用，可见南瓜籽提取物有利于前列腺增生症状的有效改善。但南瓜籽中具体的抑制前列腺增生的功效成分并不清楚，也无法明确功效的机理。食用大量的南瓜籽易对肠胃造成负担，因此，提取南瓜籽中的对于前列腺疾病的预防和治疗具有重要的医学推进意义。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种化合物，所述化合物的结构式如式1所示，或式1的任何互变异构形式或立体化学异构形式。本专利技术的第二个目的是提供含有式1所示化合物的组合物。本专利技术的第三个目的是提供一种药物组合物，所述药物组合物由式1所示的化合物和药学上可接受的载体组成。在本专利技术的一种实施方式中，所述药物组合物的剂型包括粉剂、片剂、针剂、口服液或注射液。本专利技术的第四个目的是提供所述化合物在制备治疗前列腺增生的药物中的应用。本专利技术的第五个目的是提供所述化合物的制备方法，所述方法是将南瓜籽经粉碎，经过乙醇提取、乙酸乙酯萃取、MCI层析、ODS层析、乙醇洗脱后获得。在本专利技术的一种实施方式中，所述乙醇提取是按料液比1：8～12加入90～95％的乙醇，于50～70℃条件下搅拌提取3h，过滤取上清液，重复2～3次。在本专利技术的一种实施方式中，所述MCI层析是将乙酸乙酯萃取物上样至MCI柱，依次用去离子水、浓度为30％～95％的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液。在本专利技术的一种实施方式中，所述ODS层析是将MCI层析后的洗脱液上样至ODS柱，依次用浓度50～95％的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，上样到ODS-AQ柱，依次用浓度70～95％的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，重复2～3次。本专利技术还提供含有所述化合物的食品或保健品。有益效果：本专利技术从南瓜籽中提取除了具有治疗前列腺增生的化合物，该化合物在250mg/kg的作用剂量剂量时前列腺湿重、前列腺指数和前列腺酸性磷酸酶(PAP)三个指标有显著的抑制作用，能够使病理状态的前列腺湿重、前列腺指数和PAP分别降低9～13.3％；南瓜籽碱在500mg/kg剂量时三个指标有非常显著的抑制作用。能够使前列腺湿重、前列腺指数和PAP等指标降低至接近正常水平，上述结果表明南瓜籽碱具有抑制前列腺增生的作用。附图说明图1为本专利技术的南瓜籽碱化合物HPLC色谱图；图2为本专利技术的南瓜籽碱化合物的质谱图；图3为本专利技术的南瓜籽碱化合物的13C核磁共振图。具体实施方式实施例1将南瓜籽经粉碎后，按料液比1:10(m/v)加入95％的乙醇，于50～70℃条件下搅拌提取3h，过滤取上清液，如此重复3次。将3次所得上清液减压浓缩，去乙醇后即得南瓜籽醇提物。将南瓜籽醇提物用2倍体积乙酸乙酯萃取，萃取2次，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩，得乙酸乙酯萃取物。将乙酸乙酯萃取物上MCI柱，依次用去离子水、浓度为30％、60％、95％的乙醇进行梯度洗脱，收集95％乙醇洗脱部分，减压浓缩后上样到ODS柱，依次用浓度50％、70％、95％的乙醇进行洗脱，收集95％乙醇洗脱部分，减压浓缩后上样到ODS-AQ柱，依次用浓度70％、85％、95％的乙醇进行洗脱，收集95％乙醇洗脱部分。将95％乙醇洗脱部分反复上样至ODS-AQ柱，最后得到单体化合物，命名为南瓜籽碱。该化合物为淡绿色油状，易溶于氯仿、乙酸乙酯，可溶于甲醇、乙醇。实施例2分别用HPLC、LC-MS和核磁共振对实施例1获得的物质结构进行鉴定。HPLC检测条件为：采用ODSC18色谱柱、甲醇︰水＝95︰5流动相，流速0.5mL/min，检测波长228nm色谱图如图1所示；保留时间为8.39min处的色谱峰为南瓜籽碱。LC-MS检测条件为：采用ESI+模式，电压1170v，，结果如图2所示，化合物m/z为338.3303，计算分子式为C19H31N04，核磁共振检测条件为：以D3Cl为溶剂，四甲基硅烷为内标，Bruck500MZ进行NMR测定。，核磁共振检测结果如表1所示。HREI-MS给出分子质量为337.3303，计算分子式为C19H31N04，1H和13C核磁共振数据见表1。表1南瓜籽碱的1H和13C核磁共振数据1H-NMR可见δ5.26(3H，d,J＝3.6)为双键氢，5.18(1H，d,J＝3.6),δ4.22(2H，dd,J＝7.6)，为连氧氢，δ2.23(2H，t),1.95(2H，dq),1.52(2，q),1.20(3H，d,J＝3.6)为脂肪链上的-CH2-氢信号，δ0.8(3H，m)为甲基氢信号。从13C-NMR可见化合物共有19个碳信号，其中δ171.7，171.6为二个羰基碳信号，表明化合物含有二个羧基，δ128.6，128.5，128.4，127.5，有四个碳信号，应为二个双键上碳信号，δ68.3，61.7为二个连氧碳信号，δ13--32为11个碳信号。从135DEPT可见有三个双健信号，δ68.3为-CH-碳信号，δ61.7为-CH2-碳信号，δ22—32.8为10个-CH2-碳信号，δ13.1为甲基碳信号。可以得出化合物含有一个脂肪酸链。在HMBC中可见δC171.7的羧基与δH4.22(δC61.7)的氢有相关，δC127的双键碳与δH4.22也相关。δC171.6的羧基与δH5.18(δC68.3)的氢有相关，δC128的双键碳与δH5.18也相关。δC128的双键碳与δH1.95有相关。通过以上测定分析该化合物的结构如下所示:实施例3利用丙酸睾丸素所致小鼠前列腺增生的模型对南瓜籽碱进行了体内抗前列腺增生试验，选取6周龄，体重20～25g的雄性昆明小鼠，前期适应性饲养1周，使实验动物适应新环境，随机分组，每组10只，分别为模型组，对照组和治疗组1和治疗组2。模型组和治疗组小鼠每日皮下注射5mg/kg的丙酸睾丸酮(TP)，注射体积为0.1mL/10g体重，连续造模30天，建立小鼠BPH模型。对照组小鼠每日皮下注射等体积大豆油。造模完成后，模型组和对照组小鼠每日灌胃等体积生理盐水，治疗组小鼠分别每日灌胃不同剂量实施例1制备的南瓜籽碱，治疗组1和治疗组2分别对应低剂量组(250mg/kg·d)高剂量组(500mg/kg·d)，连续灌胃30天。通过前列腺湿重、前列腺指数和前列腺酸性磷酸酶(PAP)三个指标来检测南瓜籽碱对前列腺增生的作用。结果如表2所示。表2南瓜籽碱对丙酸睾丸素所致小鼠前列腺增生的抑制效果n＝10；*表示与模型组相比有明显差异，P<0.05；**表示与模型组相比有非常明显差异，P<0.01；***表示差异极度明显，P<0.001以上结果显示，与模型组相比，南瓜籽碱在250mg/kg剂量时前列腺湿重、前列腺指数和前列腺酸性磷酸酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种化合物，其特征在于，所述化合物的结构式如式1所示，

【技术特征摘要】
1.一种化合物，其特征在于，所述化合物的结构式如式1所示，或式1的任何互变异构形式或立体化学异构形式。2.含有权利要求1所述化合物的组合物。3.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物由权利要求1的化合物和药学上可接受的载体组成。4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，剂型包括粉剂、片剂、针剂、口服液或注射液。5.权利要求1所述的化合物在制备治疗前列腺增生的药物中的应用。6.权利要求1所述的化合物在食品领域非医药用途方面的应用。7.含有权利要求1所述化合物的食品或保健品。8.一种制备权利要求1所述化合物的方法，其特征在于，所述方法是将南瓜籽经粉碎，经过乙醇提取、乙酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐一达，
申请(专利权)人：徐一达，
类型：发明
国别省市：江苏,32