一种鼓槌石斛组织培养方法技术

本发明专利技术公开了一种鼓槌石斛组织培养方法，包括鼓槌石斛种子培养萌发成圆球茎，壮苗培养，诱导生根，炼苗四个步骤，所述鼓槌石斛种子培养萌发成圆球茎中使用的种子培养基包含以下成分：硝酸钾1800mg/L、硝酸铵1450mg/L、硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、氯化钙440mg/L、硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、硫酸锰16.9mg/L、硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、碘化钾0.83mg/L、钼酸钠0.25mg/L、Na2‑EDTA 37.3mg/L、硫酸亚铁27.8mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇100mg/L、NAA 1‑10mg/L、6‑BA 5‑10mg/L、马铃薯100000mg/L、碳粉250mg/L、蔗糖30000mg/L、水解乳蛋白700mg/L。该方法提高了鼓槌石斛的繁殖效率。

A method for culture of Dendrobium chrysotoxum organization

The invention discloses a method for culturing Dendrobium chrysotoxum tissues, including seed germination into cultivation of Dendrobium chrysotoxum round bulb, seedling culture, rooting and seedling of four steps, the cultivation of Dendrobium chrysotoxum seed germination using protocorm in seed medium comprises the following components: potassium nitrate, ammonium nitrate 1800mg/L 1450mg/L, Magnesium Sulfate 370mg/L 170mg/L 440mg/L, potassium dihydrogen phosphate and calcium chloride, copper sulfate, cobalt chloride, 0.025mg/L 0.025mg/L, 16.9mg/L 8.6mg/L, zinc sulfate, manganese sulfate, boric acid, potassium iodide, 6.2mg/L 0.83mg/L 0.25mg/L, Na2 EDTA sodium molybdate 37.3mg/L, ferrous sulfate 27.8mg/L, glycine 2.0mg/L, thiamine hydrochloride, pyridoxine hydrochloride, 0.1mg/L 0.5mg/L 0.5mg/L, 100mg/L NAA, inositol nicotinate 1 10mg/L, 6 10mg/L, 5 BA potato 100000mg/L, sucrose 30000mg/L, 250mg/L powder, hydrolyzed milk protein White 700mg/L. This method can improve the reproductive efficiency of Dendrobium chrysotoxum.

【技术实现步骤摘要】
一种鼓槌石斛组织培养方法
本专利技术涉及一种鼓槌石斛组织培养方法。
技术介绍
鼓槌石斛(学名：DendrobiumchrysotoxumLindl.)生于海拔520-1620米，阳光充足的常绿阔叶林中树干上或疏林下岩石上。分布于中国、印度、缅甸、泰国、老挝、越南。鼓槌石斛的花观赏价值极高，花姿优雅，玲珑可爱，花色鲜艳，气味芳香，被喻为“四大观赏洋花”之一，既可作切花，也可盆栽观赏，至今，广泛用于大型宴会、开幕式剪彩典礼或招待贵宾。此外，花朵剪下2-3天也不凋萎，生命力旺盛令人赞叹。目前，虎牙石斛的人工培育包括分株繁殖、扦插繁殖、分芽繁殖，但是，上述繁殖方式繁殖效率低，不能满足市场需求，因此，需要利用植物组织培养技术对虎牙石斛进行快速繁殖。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鼓槌石斛组织培养方法，该方法可以提高鼓槌石斛的繁殖效率。为实现本专利技术的目的，本专利技术采用以下技术方案：一种鼓槌石斛组织培养方法，包括鼓槌石斛种子培养萌发成圆球茎，壮苗培养，诱导生根，炼苗四个步骤，其中，所述鼓槌石斛种子培养萌发成圆球茎中使用的种子培养基包含以下成分：一、种子培养基配方所述壮苗培养中使用的壮苗培养基包含以下成分：二、壮苗培养基配方试剂名称规定量(mg/L)试剂名称规定量(mg/L)硝酸钾2000Na2-EDTA37.3硝酸铵1750硫酸亚铁27.8硫酸镁370甘氨酸2.0磷酸二氢钾170盐酸硫胺素0.2氯化钙550盐酸吡哆醇0.65硫酸铜0.025烟酸0.5氯化钴0.025肌醇50硫酸锰16.9NAA1-10硫酸锌8.66-BA5-10硼酸6.2香蕉200000碘化钾0.83碳粉500钼酸钠0.25蔗糖30000所述诱导生根中使用的生根培养基包含以下成分：三、生根培养基配方试剂名称规定量(mg/L)试剂名称规定量(mg/L)硝酸钾1650硫酸亚铁27.8硝酸铵1350甘氨酸2.0硫酸镁270盐酸硫胺素0.2磷酸二氢钾130盐酸吡哆醇0.65氯化钙450烟酸0.5硫酸铜0.025肌醇5氯化钴0.025NAA1-10硫酸锰16.96-BA0.1-10硫酸锌8.6香蕉100000硼酸6.2碳粉500碘化钾0.83蔗糖18000钼酸钠0.25艾比蒂生根粉0.1-1Na2-EDTA37.3所述种子培养萌发成圆球茎步骤中，成熟鼓槌石斛种子经消毒处理后播种于种子培养基中培养，一星期转绿，继续培养20-30天，经过种胚膨大、萌发形成绿色圆球茎；培养条件为25-26℃，光照为1600-1800lx，光照时间为10h/d。所述的消毒处理过程为：自来水加洗洁精冲洗3分钟后用75％酒精消毒30秒，之后用35％双氧水消毒10分钟，然后用无菌水冲洗三次。所述壮苗步骤中，圆球茎转入壮苗培养基中进行壮苗培养，经过80-90天壮苗培养，获得高度达到1.5-3cm的幼苗，培养条件：温度25-26℃，光照度1900-2100lx，光照时间为12h/d。本专利技术具有以下优点：1.本专利技术提供的鼓槌石斛的组织培养方法的鼓槌石斛种子萌发率高，在90％以上，获得的幼苗粗壮，主根系发达，种植成活率在90％以上，从而大大地提高了鼓槌石斛的繁殖效率。2.种子培养基对鼓槌石斛种子的萌发有重要影响，本专利技术提供的种子培养基可以使鼓槌石斛种子萌发在90％以上。3.本专利技术采用的壮苗培养基可以促进圆球茎生成粗壮的幼苗。4.本专利技术采用的生根培养基可以促进幼苗生根，所得的主根系发达，有利于在炼苗及种植中成活。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步的详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制，任何在本专利技术权利要求范围内所做的有限修改，仍在本专利技术的权利要求保护范围内。实施例1鼓槌石斛组织培养分四个阶段，分别是种子萌发、壮苗培养、诱导生根和炼苗四个阶段，所以在本专利技术提供的鼓槌石斛组织培养方法包括鼓槌石斛种子萌发成为圆球茎，壮苗培养，生根，炼苗四个步骤，具体培养过程如下：(1)种子萌发成为圆球茎：取成熟鼓槌石斛种子进行消毒处理，用自来水加洗洁精冲洗3分钟，然后75％酒精消毒30秒，再用35％双氧水消毒10分钟，最后用无菌水冲洗三次后播种于种子培养基中培养，一星期转绿，继续培养20-30天，经过种胚膨大、萌发形成绿色圆球茎，种子的萌发率在90％以上。培养条件为25-26℃，光照为1600-1800lx，光照时间为10h/d。(2)壮苗培养：将步骤(1)中产生的圆球茎转入壮苗培养基中进行壮苗培养，经过80-90天壮苗培养，高度达到1.5-3cm的粗壮幼苗出现，培养条件：温度25-26℃，光照度1900-2100lx，光照时间为12h/d。(3)诱导生根：将步骤(2)得到的幼苗转入生根培养基进行诱导生根，长成具有发达主根系的生根苗。(4)炼苗：将步骤(3)得到的生根苗进行炼苗驯化，使其适应外部生长环境。完成炼苗后，所得驯化苗移栽大棚或室外，同时种植管理，驯化苗成活率在90％以上。一、种子培养基配方试剂名称规定量(mg/L)试剂名称规定量(mg/L)硝酸钾1800硫酸亚铁27.8硝酸铵1450甘氨酸2.0硫酸镁370盐酸硫胺素0.1磷酸二氢钾170盐酸吡哆醇0.5氯化钙440烟酸0.5硫酸铜0.025肌醇100氯化钴0.025NAA1-10硫酸锰16.96-BA5-10硫酸锌8.6马铃薯100000硼酸6.2碳粉250碘化钾0.83蔗糖30000钼酸钠0.25水解乳蛋白700Na2-EDTA37.3二、壮苗培养基配方试剂名称规定量(mg/L)试剂名称规定量(mg/L)硝酸钾2000Na2-EDTA37.3硝酸铵1750硫酸亚铁27.8硫酸镁370甘氨酸2.0磷酸二氢钾170盐酸硫胺素0.2氯化钙550盐酸吡哆醇0.65硫酸铜0.025烟酸0.5氯化钴0.025肌醇50硫酸锰16.9NAA1-10硫酸锌8.66-BA5-10硼酸6.2香蕉200000碘化钾0.83碳粉500钼酸钠0.25蔗糖30000三、生根培养基配方种子培养基中的NAA的规定量在1-10mg/L范围内调整，6-BA的规定量在5-10mg/L范围内调整，都能够使鼓槌石斛种子萌发率达到90％以上。如，NAA的规定量为1mg/L、1.5mg/L、2mg/L、2.5mg/L、3mg/L、3.5mg/L、4mg/L、4.5mg/L、5mg/L、5.5mg/L、6mg/L、6.5mg/L、7mg/L、7.5mg/L、8mg/L、8.5mg/L、9mg/L、9.5mg/L和10mg/L均可。6-BA的规定量为5mg/L、5.5mg/L、6mg/L、6.5mg/L、7mg/L、7.5mg/L、8mg/L、8.5mg/L、9mg/L、9.5mg/L和10mg/L均可。壮苗培养基中的NAA的规定量在1-10mg/L范围内调整，6-BA的规定量在5-10mg/L范围内调整，都能够使鼓槌石斛的圆球茎长出粗壮的幼苗。如，NAA的规定量为1mg/L、1.5mg/L、2mg/L、2.5mg/L、3mg/L、3.5mg/L、4mg/L、4.5mg/L、5mg/L、5.5mg/L、6mg/L、6.5mg/L、7mg/L、7.5mg/L、8mg/L、8.5mg/L、9mg/L、9.5mg/L和10mg/L均可。6-BA的规定量为5mg/L、5.5mg/L、6mg/本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鼓槌石斛组织培养方法，包括鼓槌石斛种子培养萌发成圆球茎，壮苗培养，诱导生根，炼苗四个步骤，其特征是，所述鼓槌石斛种子培养萌发成圆球茎中使用的种子培养基包含以下成分：硝酸钾1800mg/L、硝酸铵1450mg/L、硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、氯化钙440mg/L、硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、硫酸锰16.9mg/L、硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、碘化钾0.83mg/L、钼酸钠0.25mg/L、Na2‑EDTA 37.3mg/L、硫酸亚铁27.8mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇100mg/L、NAA 1‑10mg/L、6‑BA 5‑10mg/L、马铃薯100000mg/L、碳粉250mg/L、蔗糖30000mg/L、水解乳蛋白700mg/L。

【技术特征摘要】
1.一种鼓槌石斛组织培养方法，包括鼓槌石斛种子培养萌发成圆球茎，壮苗培养，诱导生根，炼苗四个步骤，其特征是，所述鼓槌石斛种子培养萌发成圆球茎中使用的种子培养基包含以下成分：硝酸钾1800mg/L、硝酸铵1450mg/L、硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、氯化钙440mg/L、硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、硫酸锰16.9mg/L、硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、碘化钾0.83mg/L、钼酸钠0.25mg/L、Na2-EDTA37.3mg/L、硫酸亚铁27.8mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇100mg/L、NAA1-10mg/L、6-BA5-10mg/L、马铃薯100000mg/L、碳粉250mg/L、蔗糖30000mg/L、水解乳蛋白700mg/L。2.根据权利要求1所述的鼓槌石斛组织培养方法，其特征是，所述壮苗培养中使用的壮苗培养基包含以下成分：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1750mg/L、硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、氯化钙550mg/L、硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、硫酸锰16.9mg/L、硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、碘化钾0.83mg/L、钼酸钠0.25mg/L、Na2-EDTA37.3mg/L、硫酸亚铁27.8mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸硫胺素0.2mg/L、盐酸吡哆醇0.65mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇50mg/L、NAA1-10mg/L、6-BA5-10mg/L、香蕉200000mg/L、碳粉500mg/L、蔗糖300...

【专利技术属性】
技术研发人员：涂耀文，
申请(专利权)人：容县明曦铁皮石斛种植场，
类型：发明
国别省市：广西,45