在结合了转录/转译的无细胞体系中制备性表达基因的方法技术

技术编号:1749929 阅读:186 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
制备性基因表达是在结合了转录/转译的无细胞体系中实现的,体系中作为基质含有氨基酸,ATP,GTP,CTP和UTP,使用呈DNA分子形式的基因,其结果在体系中生成基因表达产物,包括多肽,AMP,ADP,GDP,CDP,UDP,焦磷酸盐和无机磷酸盐。在转录/转译的无细胞体系的工作过程中,随着基质的消耗和产物的生成,从体系中取出基因表达产物,包括多肽,AMP,ADP,GDP,CDP,UDP,焦磷酸盐和无机磷酸盐。同时往体系中加入呈氨基酸,ATP,CTP,UTP形式的基质,以保持它们的原始浓度。(*该技术在2009年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学和生物技术,即涉及。众所周知,基因表达产物是肽或蛋白质。这些物质作为生物过程的生物调节剂,医疗药剂及诊断系统,广泛应用于医学上。例如,已知有免疫系统的肽活性剂,盐交换的肽刺激剂,蛋白质,血中糖量的调节剂及其它。已知多肽在农业中作为生物刺激剂例如生长激素的应用。已知通过基因工程技术来制备性表达细胞的遗传材料的方法,该基因工程是基于把遗传材料通过宿主细胞器表达的异种DNA引入到活细胞内实现的。这种基因工程广泛用于蛋白质的工业生产。但是它在应用方面有一定的限制性。这是由于基因表达产物分离的复杂性,宿主细胞的某些目标产物的致死以及异种基因表达产物受到细胞蛋白酶的降解或聚集所引起的。后一种情况会使长度有15-70氨基酸残基的多肽的分离或使有人工改变的氨基酸顺序的蛋白质生产特别困难。由上面的情况得到的结论是基因工程的方法不确保制备性表达任何基因的可能性。还有一种基因表达方法,它是基于利用结合了转录/转译的无细胞体系。这方法是基于使用DNA分子的细胞提取物。在这种体系中产生mRNA与DNA分子的扩增及其以后的转译。结合了转录/转译的无细胞体系没有由细胞造成的限制,实际本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种在结合了转录/转译的无细胞体系中制备性表达基因的方法,体系中作为基质有氨基酸、ATP,GTP,CTP和UTP,利用呈DNA分子形式的基因,在体系中生成的基因表达产物,包括多肽,AMP,ADP,GDP,CDP,UDP,焦磷酸盐,无机磷酸盐,该方法的特点是,在转录/转译的无细胞体系工作过程中,随着基质的消耗和产物的生成,从体系中取出基因表达产物,包括多肽,AMP,ADP,GDP,CDP,UDP,焦磷酸盐和无机磷酸盐,同时往体系中加入呈氨基酸,ATP,GTP,CTP,UTP形式的基质,其目的是为了保持它们的原始浓度。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员:弗拉基米尔伊万诺维奇巴拉诺夫伊格尔米丽维奇莫罗佐夫亚利山大赛格维奇斯比林
申请(专利权)人:苏联科学院蛋白质研究所
类型:发明
国别省市:SU[苏联]

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